JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:54 dk. • April 28th, 2025
Nöronlar açısından zengin dorsal hipokampusu açığa çıkaran fare beyin bölümleriyle başlayın.
Nöronal peroksidaz aktivitesini söndürmek için hidrojen peroksit ekleyin, ardından yıkayın.
Bir geçirgenleştirme arabelleği ile işlem yapın, ardından spesifik olmayan bağlamayı engellemek için bir engelleme arabelleği uygulayın.
Primer antikorları ekleyin ve çalkalama ile inkübe edin. Bu antikorlar nöronal aktivasyon işaretleyici proteinlerine bağlanır.
Primer antikorları bağlamak için biotin ile konjuge ikincil antikorları yıkayın ve uygulayın.
Durulayın ve konjugatlar üzerindeki biotine bağlanan bir avidin-biotin-peroksidaz kompleksi ekleyin.
Tekrar yıkayın, ardından kahverengi bir çökelti oluşturmak için peroksidaz tarafından oksitlenen kromojenik bir substrat ekleyin. PBS ile reaksiyonu durdurun.
Bölümleri jelatin kaplı bir slayta aktarın ve artan konsantrasyonlarda etanol kullanarak kurutun. Ardından, ksilen içindeki bölümleri temizleyin ve monte edin.
Slaytı parlak alan mikroskobunun altına yerleştirin.
Işık aydınlatması altında, lekelenmemiş bölgeler ışığı iletir ve parlak görünürken, lekeli nöronlar ışığı emer ve yansıtır ve daha koyu görünür.
Belirgin koyu alan, hipokampus içindeki nöro
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin