JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:02 dk. • April 28th, 2025
Dairesel bir cam görüntüleme penceresi ve kafatasına yerleştirilmiş bir kafa plakası olan anestezi uygulanmış bir transgenik fare ile başlayın.
Mikroglial veya bağışıklık hücreleri ve nöronlar floresan proteinlerle etiketlenir.
Ardından, fareyi iki fotonlu mikroskop aşamasına sabitleyin.
Ardından, kan damarlarını kırmızıya boyamak için intraperitoneal bir floresan boya enjekte edin.
Cam görüntüleme penceresini temizleyin, tuzlu su damlası uygulayın ve mikroskop objektifini indirin.
Ardından, kan damarlarının görüntüsünü yakalamak için lazer ışığını ayarlayın. Aynı bölgeyi daha sonra bulmak ve görüntülemek için dallanma desenini ve koordinatları kaydedin.
Şimdi, lazeri floresan proteinleri uyararak mikroglia ve nöronların floresan oluşmasına neden olacak şekilde ayarlayın.
Kaydedilen dallanma desenini kullanarak, aynı bölgeyi bulun ve düzenli olarak hücrelerin görüntülerini yakalayın.
Vasküler ağ ve nöronlar sabit kalırken, zaman içindeki mikroglial pozisyon değişiklikleri nöronal aktiviteye yanıt olarak bağışıklık dinamiklerini yansıtır.
Bir diş matkap ucu kullanarak kafatasına yaklaşık 4 milimetre dairesel bir açıklık açın. Delme sırasında, beyni soğutmak için kafatasını düzenli olar
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin