JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:48 dk. • May 29th, 2025
Transgenik bir fareden alınan frenik sinirlerle hareketsiz hale getirilmiş bir diyafram içeren bir floresan mikroskobu kurulumuyla başlayın.
Diyaframın nöromüsküler kavşağı, bir motor nöron, bir kas lifi ve asetilkolin reseptörleri ve kalsiyum kanalları içeren Schwann hücrelerinden oluşur.
Bu hücreler floresan olarak etiketlenmiş asetilkolin reseptörlerine sahiptir ve hücre içi kalsiyum göstergelerini eksprese eder.
Kuruluma takılan bir görüntü ayırıcı, her iki floresan sinyalinin aynı anda görselleştirilmesini sağlar.
Frenik sinir, elektriksel uyarı vermek için bir emme elektroduna yerleştirilir.
Floresan mikroskobu altında, bir nöromüsküler kavşağı tanımlamak için asetilkolin reseptörlerini görselleştirin.
Maksimum temel floresan ayarlamak için, hücre zarını geçici olarak depolarize etmek için bir potasyum klorür çözeltisi ekleyin. Bu, hücre içi kalsiyum akışını tetikleyerek göstergelerin floresansında bir artışa neden olur.
Floresan sinyalinin aşırı doygunluğunu önlemek için parlaklık ayarlarını yapın.
Repolarizasyondan sonra, hücreye kalsiyum akışını tetiklemek için elektriksel stimülasyonlar uygulayın ve hücre içi floresanstaki değişikliği yüksek kare hızında kaydedin.
20 kat büyütm
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin