JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:11 dk. • May 29th, 2025
Bir örtü ile kaplı, açıkta kalan bir kafatasına sahip anestezi uygulanmış bir sıçan alın.
Trigeminal ganglion ve servikal dorsal kök gangliyonlarından kaynaklanan ağrıya duyarlı duyusal nöronlar tarafından innerve edilen beynin en dış tabakası olan dura mater'i ortaya çıkarmak için bir delik açın.
Sızıntıyı önlemek için bir bariyer oluşturun, geriye dönük bir izleyici yerleştirin ve deliği kapatın.
Yarayı dikin ve farenin iyileşmesine izin verin.
İzleyici, duyusal nöronal aksonlara girer, retrograd olarak gangliyonlarına gider ve nöronal hücre gövdelerine girer.
Sıçanı ötenazi yapın ve gangliyonları inceleyin.
Ganglionların bölümlerini hazırlayın ve bunları slaytlara monte edin.
Hücresel zarları geçirgen hale getirmek ve spesifik olmayan bağlanma bölgelerini maskelemek için bir çözelti ekleyin.
İzleyici ve duyusal nörona özgü nöropeptitleri hedef alan birincil antikorlarla inkübe edin.
Primer antikorlara özgü floresan etiketli sekonder antikorlar ekleyin.
Floresan mikroskobu kullanarak, duyusal nöronların ganglionik kökenini doğrulayarak, hücre gövdeleri içindeki nöropeptitlerin ve izleyicilerin kolokalizasyonunu gözlemleyin.
Farenin kafasını elektrikli bir tıraş bıçağıyla tıraş edin. Sonra
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin