JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:39 dk. • May 29th, 2025
Floresan etiketli internöromast hücreleri veya INMC'ler içeren, bir lamel üzerine monte edilmiş ve konfokal mikroskop altına yerleştirilmiş bir zebra balığı larvası ile başlayın.
INMC'ler, daha önce lazer ablasyona tabi tutulmuş, rejeneratif yeteneğe sahip progenitör hücrelerdir.
İlk olarak, hasarlı alanı floresan modunda gözlemleyin. Floresan olmaması, başarılı lazer ablasyonunu doğrular.
Ardından, hücrenin düzensiz çekirdeklerle granüler ve şişmiş göründüğü hasarlı alanı incelemek için iletilen ışık görüntüleme modunu kullanın ve hücre ölümünü doğrulayın.
Makrofajların bölgeye alınması, yaralanmaya aktif bir hücresel yanıtı gösterir.
Şimdi, floresan moduna geri dönün ve kurtarmayı izlemek için düzenli aralıklarla hızlandırılmış görüntüler yakalayın.
Kurtarma aşaması sırasında, INMC'ler projeksiyonları boşluğa uzatarak kapanmayı kolaylaştırır ve hücresel onarımı destekler.
Bu zaman serisi görüntülerini analiz için kaydedin. Ablasyonlu alanda farklı floresansın yeniden ortaya çıkması, başarılı hücre iyileşmesini doğrular.
Ablasyon sonrası hücre gövdelerinin görüntülenmesi için, Kanallar menüsü altında, ablasyon lazerini etkisiz hale getirmek için DAPI izinin işaretini kaldırın ve edin
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin