JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:14 dk. • May 29th, 2025
Enterik nöron ve glial hücre ağlarından oluşan ganglionlu pleksusları barındıran hareketsiz fare kolonik myenterik pleksus dokusu içeren bir görüntüleme odası alın.
Bu hücreler, kalsiyum bağlanması üzerine floresan veren bir kalsiyum indikatörü ile etiketlenir.
Ardından, odayı bir floresan mikroskobu aşamasına yerleştirin. Görüntüleme sırasında kas kasılmalarını bastırmak için odayı önceden ısıtılmış inhibitörler içeren bir tamponla perfüze edin.
Bir mikroskop kullanarak, düzgün floresan sergileyen sağlıklı ganglionik bölgeleri tanımlayın.
Temel aktiviteyi ölçmek için hücre içi kalsiyum seviyeleri için bir referans sağlayan floresan görüntüler elde edin.
Hücre içi kalsiyum akışını ve floresan yoğunluğunda bir artışı tetikleyen nöronal reseptörleri aktive etmek için dokuyu bir reseptör agonisti ile perfüze edin.
Nöronal aktivasyon dolaylı olarak çevredeki glial hücreleri uyararak kalsiyum akışına ve ardından floresanda bir artışa yol açar.
Floresan yoğunluğundaki değişiklikleri ölçmek için hem nöronlarda hem de glial hücrelerde temel seviyelere göre kalsiyum dinamiklerini ve sinyal aktivitesini gösteren hızlandırılmış floresan görüntüler yakalayın.
İnkübasyon sırasında, protokolün yazılı b
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin