JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:14 dk. • May 29th, 2025
Nörodejeneratif bir fare modelinden beyin bölümleriyle başlayın.
Doku geçirgenliğini artırmak ve spesifik olmayan bağlanmayı engellemek için deterjan takviyeli bir engelleme solüsyonu ile inkübe edin. Çözümü atın.
Amiloid-beta plaklarını hedef alan primer antikorları tanıtın. Antikorların amiloid-beta plakları ile etkileşime girmesi için ajitasyon ile inkübe edin, ardından yıkayın.
Kırmızı florofor etiketli ikincil antikorlar ekleyin ve antikorların etkileşime girmesine izin vermek için karanlıkta inkübe edin.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın, ardından alkolle yıkayın.
Beta yaprağı bakımından zengin amiloidleri yüksek afiniteye bağlayan kurkumin ekleyin, ardından yıkayın.
Daha sonra, artan alkol konsantrasyonları ile tedavi edin, beyin bölümlerini kurutun. Herhangi bir reaktif izini gidermek için ksilen ekleyin.
Bir slayt üzerine bir bölüm monte edin ve bir floresan mikroskobu altında gözlemleyin.
İkincil antikorlar üzerindeki kırmızı floroforları uyarmak için 590 nanometre dalga boyunda bir lazer kullanın. Görüntüyü yakalayın.
Yeşil floresan yayan kurkumini uyarmak için 480 nanometre dalga boyunda bir lazere geçin.
Görüntüleri üst üste bindirin; Kırmızı ve yeşil floresan ko
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin