JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 6:41 dk. • May 29th, 2025
Kuduz virüsü ile enfekte olmuş bir fareden sabit kalın bir beyin bölümü alın.
Virüs nöronları enfekte eder ve çoğalır, bu da hücrelerde bulunan viral proteinlerle sonuçlanır.
Hücresel zarları geçirgen hale getirmek için bir deterjan ve spesifik olmayan bağlanma bölgelerini maskelemek için bir engelleme solüsyonu ile muamele edin.
Viral proteinleri hedef alan birincil antikorlarla inkübe edin, ardından birincil antikorlara bağlanan florofor konjuge ikincil antikorlar gelir.
Çekirdeği etiketlemek için floresan nükleik asit bağlayıcı bir boya ile muamele edin.
Dokuyu artan alkol konsantrasyonlarında kurutun, ardından görüntüleme için doku şeffaflığını artırmak için bir temizleme solüsyonu uygulayın.
Bölümü bir görüntüleme odasına monte edin, temizleme solüsyonuyla doldurun ve kapatın.
Konfokal lazer tarama mikroskobu kullanarak, floresan etiketleri kullanarak dokuyu ayrı ayrı görüntüleyin, ardından iki boyutlu bir görüntü oluşturmak için bunları birleştirin.
Doku boyunca farklı odak düzlemlerinde görüntüler elde edin ve enfeksiyonun ilerlemesini değerlendirmek için üç boyutlu bir temsil oluşturmak üzere bunları birleştirin.
Beyin dokusu bölümlerinin immün boyaması için, numuneleri PBS'de 4 mi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin