İskemik İnme Fare Modelinde Enfarktüs Oluşumunu Tespit Etmek için TSPO-PET/BT Görüntüleme

Anestezi uygulanmış kontrol farelerini ve somatosensoriyel kortekse kısıtlı kan akışı olan fareleri alın.

Bu kısıtlama beyinde nöronal ölüme ve enfarktüs oluşumuna neden olarak mikroglial aktivasyonu ve periferik immün hücre infiltrasyonunu tetikler.

Bağışıklık hücreleri, mitokondriyal translokatör proteini (TSPO) aşırı eksprese eder.

Fareleri PET/CT tarayıcı yatağına sabitleyin.

X-ışınlarını farenin vücudundan geçiren dönen bir X-ışını kaynağı kullanarak bir CT taraması yapın.

Bir dedektör, X-ışınlarını yakalar ve bunları önemli anatomik yer işaretlerinin görüntülerine dönüştürür.

Kuyruk damarı yoluyla bir TSPO radyoizleyici enjekte edin.

Radyoizleyici enfarktüs bölgesine gider ve bağışıklık hücrelerinde TSPO'ya bağlanır.

Bir PET taraması gerçekleştirin.

Radyoizleyici, gama ışınları üretmek için yakındaki elektronlarla çarpışan pozitronlar yayarak pozitron bozunmasına uğrar.

Bir dedektör bu ışınları yakalar ve radyoizleyici dağılımının 3D görüntüsünü yeniden oluşturur.

Daha yüksek izleyici tutulumu olan enfarktüs alanlarını belirlemek için üst üste binen PET/CT görüntülerini görselleştirin.

Anestezi uygulanmış fareleri PET/CT tarayıcı yatağına yüzüstü yatırarak başlayın, burun konilerinde düzleştiklerinden ve güvenli bir şekilde yerleştirildiklerinden emin olun. Her farenin başını ve gövdesini yumuşak cerrahi bantla yatağa bantlayın ve bandın yerleştirilmesiyle solunumun kısıtlanmamasını sağlayın. Hayvanlar yatakta güvende olduklarında ve solunum stabil hale geldiğinde, lazer artı işaretlerini açın ve tarama yatağını dört farenin de beyni ile aynı hizada olacak şekilde hareket ettirin.

Tarayıcı yatağını, farelerin beyinleri görüş alanının merkezine mümkün olduğunca yakın olacak şekilde çekim konumuna getirin. Konumlarını doğrulamak için farelerin izci görünümü görüntüsünü alın ve gerekirse arayüzdeki görüş alanı kutusunu sürükleyerek konumu ayarlayın. Son olarak, CT taramasını başlatmak için tarayıcı yazılımında İş Akışını Başlat'a tıklayın ve PET taramasının izleyici enjeksiyonundan önce manuel olarak başlatılabilmesi için Etkileşimli kullanıcı istemlerini görüntüle'yi seçtiğinizden emin olun.

Fareler otomatik olarak CT'den PET'e ilerlediğinde, radyoizleyici enjeksiyonu için tarayıcının arkasını ayarlayın. Koruyucu emici dolguyu bir çıkıntıya yerleştirin ve makas ve çakmağın elinizin altında olduğundan emin olun. Mühürlü kateter borusunu makasla kesin. Kateter hatlarında herhangi bir kabarcık olmadığını kontrol edin ve 10 ila 20 mikrolitrelik tuzlu su yıkama yaparak kanülün hala damar içinde olduğunu onaylayın. Daha sonra, önceden ölçülen doz şırıngalarını dört kateterin her birine yükleyin ve her bir fareye hangi dozun verildiğini takip edin.

PET taraması başlamaya hazır olduğunda ve aynı anda 10 saniyelik bir zamanlayıcı başlatırken Tamam'a tıklayın. Tarayıcının arkasında, zamanlayıcı sıfıra ulaştığında dört fareyi de aynı anda enjekte etmek için doz şırıngaları ile iki araştırmacı bulundurun. Tam dozun kuyruk damarına girdiğinden emin olmak için her kateteri 50 ila 100 mikrolitre salinle yıkayın ve bir çakmak kullanarak boruyu bir kez daha kapatın.

Daha sonra, artık bir radyoaktivite değeri elde etmek için bir doz kalibratörü kullanarak doz şırıngalarını ölçün. Değerleri ve kaydedildikleri zamanı not edin. Tarama tamamlandıktan sonra, hareket kontrol panelindeki yatay ana sayfa düğmesini kullanarak PET yatağını orijinal konumuna geri getirin. Fareleri tarayıcıdan çıkarın ve kateteri dikkatlice çıkarın. Aşırı kanamayı önlemek için kanülasyon bölgesine hafifçe baskı uygulayın. Daha sonra bir doz kalibratörü kullanarak kateterdeki kalıntı aktiviteyi ölçün.

Son olarak, ilk dosyadan oluşturulan histogram verilerini kullanarak her taramayı otomatik olarak yeniden oluşturacak olan işlem sonrası yönetim yazılımını açarak verileri yeniden oluşturun. PET analizi için, görüntü analiz yazılımını açarak başlayın. CT görüntüsünü yüklemek için Veri Aç simgesine tıklayın. Ve dinamik PET'i yüklemek için veri ekle simgesini seçin. Açılır menüdeki zaman serisi operatörü aracılığıyla verilerin görsel kalite kontrolünü gerçekleştirin. Referans ve Genel'i seçin ve renk skalası için uygun bir Min ve Max uygulayın.

Dinamik PET verilerini kare kare görselleştirin, radyoaktivite alımını doğrulayın ve tarama sırasında herhangi bir hareket karışıklığı olup olmadığını kontrol edin. Ardından, aritmetik işlevi kullanarak ortalama bir PET görüntüsü oluşturun. Ortalama Seçilen'i seçin, Referans'ın seçimini kaldırın ve bir giriş yapıldığından emin olun. Tüm PET çerçevelerinin ortalamasını oluşturmak için giriş iki ve giriş yıldızı seçilir.

Veri Yöneticisi sekmesine gidin ve ortalama PET görüntüsünü kullanarak PET sinyalinin görselleştirilmesine izin vermek için Ortalama Görüntüyü giriş konumuna bir yukarı sürükleyin. Ardından, MinMax aracındaki Otomatik hesaplamaya tıklayarak renk ölçeğini yeniden dağıtın. Ardından, otomatik 3D işlevini kullanarak CT'yi ortalama PET dosyasına kaydedin. Yeniden Yönlendirme Kaydı Açılır menüsünde, Ref'i seçin ve 1'i girin ve kaydı ref etmek için Katı Hızlı giriş bir'i seçin.

Her üç boyutta da kaydı görsel olarak kontrol edin ve gerekirse çevirme ve döndürme işlevlerini kullanarak manuel 3D sekmesinde manuel olarak ayarlayın. Kayıttan memnun kaldığınızda, Giriş 2 ve Giriş Yıldızı'nı seçin ve Onay İşareti'ne tıklayarak tüm evcil hayvan çerçevelerine uygulayın. DM'deki CT ve PET dosyalarına sağ tıklayın ve ham olarak kaydedin. Ardından, Açılır menüden Kırpma'yı seçin ve her seferinde bir farenin başını beyin sapının altına kırpmak için görüntü sınırlarını sürükleyin.

PET ve CT görüntülerini, kafatası tüm boyutlarda düz olacak şekilde manuel olarak yeniden yönlendirin. Arayüzün sol üst kısmındaki veri ekle düğmesini kullanarak bu fare için MR görüntüsünü yükleyin. Manuel 3D yeniden yönlendirmeyi kullanarak MR'yi hareket ettirin ve BT görüntüsündeki kafatasına sığdırın. Ardından, görsel denetleyici sekmesinde seçimini kaldırarak PET görselleştirmesini kapatın ve İlgi Bölgesini veya ROI'yi çizmek için yalnızca MR ve CT'yi kullanın.

3D ROI aracında, yeni bir ROI oluşturmak ve bunu enfarktüs olarak adlandırmak için ROI Ekle düğmesine tıklayın. Spline aracını seçin, ROI kenarlığını çizmek için sol tıklayın ve kapatmak için sağ tıklayın. Bunu takiben, yeni bir yatırım getirisi oluşturun ve bunu karşı taraflı olarak etiketleyin. Enfarktüs ROI'ye sağ tıklayın ve Dışa Aktar'ı seçin. Ardından, yeni yatırım getirisinin görselleştirilmesine ve manuel olarak yeniden yönlendirilmesine izin vermek için ROI'yi 2 konumuna, Birinci Giriş'e taşıyın.

Yalnızca bir giriş seçiliyken, ROI kutusunu işaretleyin ve enfarktüs ROI'sinin yeniden yönlendirilmeden görselleştirilmesine izin vermek için Yalnızca Görüntüle'yi seçin. Yeniden yönlendirme kayıt menüsünde, operatör işlevini kullanarak sola sağa çevirme uygulayın ve yeni ROI'yi karşı taraftaki aynı bölgeye manuel olarak hareket ettirin. Ardından aritmetik operatörünü seçin ve yeni ROI'ye 2'nin skaler çarpımını uygulayın, böylece ROI'lerin bağımsız olarak nicelleştirilmesine izin verin.

3D ROI aracına geri dönün. Dışa Aktar ve Deneysel sekmesine gidin ve ROI'yi İçe Aktar düğmesine tıklayın. Yeni birimi kontralateral ROI olarak yüklemek için iletişim kutusundan bir giriş seçin. Son olarak, Ortalama PET görüntüsüne sağ tıklayın ve boşaltın ve PET'i tekrar açın. 3D ROI aracındaki dışa aktarma sonuçları simgesini kullanarak nicel alım sonuçlarını oluşturun.