Optik Koherens Tomografi ile Tümör Sferoidlerinin Morfolojik ve Fizyolojik İzlenmesi

Üç boyutlu bir kanser hücresi agregatı olan tümör sferoidlerini içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın.

Optik koherens tomografi veya OCT görüntüleme aşamasına yerleştirin ve doğru görüntüleme için stabilize edildiğinden emin olun.

Optimum ışık odağı için lensi ayarlayın, tarama parametrelerini ayarlayın ve zaman içinde görüntü yakalamayı başlatın.

Işık hücrelerle etkileşime girdiğinde, hücresel yapılara ve derinliklere bağlı olarak değişen yoğunluklarda yansır.

OCT, bu yansıyan ışık yoğunluklarını yakalar ve farklı düzlemlerde yüksek çözünürlüklü, iki boyutlu kesitsel görüntüler oluşturur.

Tüm kuyucuklardan tümör sferoidlerinin görüntülerini elde etmek için plakayı hareket ettirin.

Yazılım kullanarak, bu görüntüleri hizalayın ve boyut, şekil ve yapı dahil olmak üzere morfolojik özelliklerini ortaya çıkaran üç boyutlu bir küresel model oluşturmak için işleyin.

Zamanla, sferoiddeki hücreler ölür ve hasarlı yapıları ışık saçılımını artırarak yansıyan ışık yoğunluğunu azaltır.

Bu, canlı hücreleri canlı olmayanlardan ayırarak fizyolojik koşulların izlenmesini sağlar.

Tümör sferoidlerinin görüntülendiği gün, çok kuyulu plakayı inkübatörden çıkarın. OCT görüntüleme sistemi altına aktarın ve plaka adaptörüne yerleştirin. Plakanın yüksekliğini ayarlamak için, çeviri aşamasının z yönü boyunca hareket ettirin. Özel görüntüleme yazılımında, gelişim aşamalarına bağlı olarak tüm tümör sferoidini kapsayacak şekilde istenen bir OCT tarama aralığı ayarlayın ve ayarı kaydetmek için Parametreleri kaydet'e tıklayın.

Ardından, tümör sferoidlerinin optimize edilmiş xz ve yz OCT önizlemelerini gösterin. Sferoid içeren plakanın tüm kuyucukları için tümör sferoidlerinin 3D OCT görüntülerini tek tek elde edin. Önizleme görüntüsünü görüntülemek için, Önizleme düğmesini tıklatın. Ve OCT görüntüsünü elde etmek için, satın al düğmesini tıklayın. OCT veri toplamanın genel aşama taşıma sürecini kaydedin.

- Tüm tümör sferoidleri için en iyi görüntü kalitesini sağlamak için, plaka adaptörünün doğru şekilde ayarlanması ve orta hacmin aynı olması gerekir.

- OCT yapısal görüntüleri oluşturmak için tümör sferoidlerinin 3B OCT veri kümelerini işlemek için özel bir C++ işleme kodu kullanın. Küresel görüntülerin kolajını oluşturmak için sferoidin merkez noktası boyunca 3 kesitsel xy, xz ve yz düzleminde 2B OCT görüntüleri kullanın.