$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Deneysel otoimmün ensefalomiyelit veya EAE'li anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın. Bu durum gözlerde ve beyinde iltihaplanmaya neden olur.
Fareyi, sırtın üst kısmını merkeze hizalayarak bir görüntüleme aparatına yerleştirin.
Bu bölgeden sinyal girişimini önlemek için farenin alt kısmını siyah bir bezle örtün.
Fare konumunu kaydetmek için görüntüleme yazılımı kullanın.
Biyolüminesan substratı içeren bir reaktifle doldurulmuş bir şırınga alın ve intraperitoneal olarak fareye enjekte edin.
Reaktif dolaşır ve substratın iltihaplanmaya özgü enzimlerle etkileşime girdiği iltihaplanma bölgesine girer.
Enzim-substrat reaksiyonu bir biyolüminesan sinyali üretir.
Bu sinyali izlemek için düzenli zaman aralıklarında görüntü yakalayın.
Optik sinir yüzeye yakın uzanır ve göz çevresindeki biyolüminesansı belirgin hale getirir. Buna karşılık, kafatası yayılan ışığı emdiği için beyinden gelen sinyaller zayıftır.
Görüntüde, mavi hafif iltihabı, kırmızı ise şiddetli iltihabı gösterir.
İn vivo görüntüleme yapmak için, tüm görüntüleme prosedürleri sırasında fareleri %2 ila 2,5 izofluran anestezisi altında tutun. Aparatta iki fareyi yan yana yerleştirin ve farelerin üst dikenlerini merkeze yerleştirin.
Ardından, aşılama bölgesini siyah bezle koruyun. Görüntü yakalama için yazılımı açın ve kamerayı başlatın. Ardından, farelerin doğru konumlandırılmasını değerlendirmek için bir temel görüntü alın.
Ardından, tüm görüntüleri yakalamak için fotoğraf makinesine 6,5 santimetre mesafeli B odaklamayı kullanın. Daha sonra, şırıngayı doldurmadan önce kullanıma hazır kemilüminesan reaktifi mililitre başına 40 miligramda karıştırın. Daha sonra, farelere intraperitoneal olarak 100 mikrolitre enjekte edin ve enjeksiyondan 5, 10 ve 15 dakika sonra biyolüminesans görüntülerini yakalayın.