JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:27 dk. • May 29th, 2025
Deneysel otoimmün ensefalomiyelit veya EAE'li anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın. Bu durum gözlerde ve beyinde iltihaplanmaya neden olur.
Fareyi, sırtın üst kısmını merkeze hizalayarak bir görüntüleme aparatına yerleştirin.
Bu bölgeden sinyal girişimini önlemek için farenin alt kısmını siyah bir bezle örtün.
Fare konumunu kaydetmek için görüntüleme yazılımı kullanın.
Biyolüminesan substratı içeren bir reaktifle doldurulmuş bir şırınga alın ve intraperitoneal olarak fareye enjekte edin.
Reaktif dolaşır ve substratın iltihaplanmaya özgü enzimlerle etkileşime girdiği iltihaplanma bölgesine girer.
Enzim-substrat reaksiyonu bir biyolüminesan sinyali üretir.
Bu sinyali izlemek için düzenli zaman aralıklarında görüntü yakalayın.
Optik sinir yüzeye yakın uzanır ve göz çevresindeki biyolüminesansı belirgin hale getirir. Buna karşılık, kafatası yayılan ışığı emdiği için beyinden gelen sinyaller zayıftır.
Görüntüde, mavi hafif iltihabı, kırmızı ise şiddetli iltihabı gösterir.
İn vivo görüntüleme yapmak için, tüm görüntüleme prosedürleri sırasında fareleri %2 ila 2,5 izofluran anestezisi altında tutun. Aparatta iki fareyi yan yana yerleştirin ve farelerin üst dikenlerini merkeze yerleştirin.
A
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin