JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:33 dk. • May 29th, 2025
Ters çevrilmiş bir mikroskop tablasına yerleştirilmiş bir perfüzyon düzeneği ile başlayın.
Perfüzyon düzeneği, sürekli salin perfüzyonlu bir lamel ile bir mikro su kemeri lamı arasına sabitlenmiş diseke bir periferik sinir içerir.
Sinirin miyelinli aksonları, yeşil florofor etiketli nörofilamentleri ifade eder.
Parlak alan aydınlatmasını kullanarak miyelinli aksonlara odaklanın.
Konfokal moda geçin, yüksek lazer gücüyle foto ağartıcı, ardından düşük lazer gücü kullanarak düşük otofloresan bir referans görüntüsü yakalayın.
Fotoaktivasyon penceresi uzunluğunu tanımlamak için akson boyunca paralel çizgiler çizin. Dikdörtgen bir etkinleştirme bölgesi oluşturmak için bunu bir kılavuz olarak kullanın.
Yeşil florofor etiketli nörofilamentleri aktive etmek için bu bölgeyi belirli bir dalga boyu ile aydınlatın ve floresan olmalarına neden olun. Görüntüyü elde edin.
Etkinleştirmeden sonra hızlandırılmış görüntüler yakalayın.
Zamanla, floresan nörofilamentler her iki yönde hareket eder ve bitişik yan bölgelere yayılır.
Aktivasyon bölgesine bitişik yan bölgelerde floresan görünümü, nörofilament taşınmasını doğrular.
Sinirin proksimal ucunu kavrayın ve yavaşça bir örtü kızağı üzerine yatırın. Ardından,
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin