JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:52 dk. • May 29th, 2025
İki fotonlu mikroskop için uyarma ışığını ayarlayarak başlayın.
Dairesel bir cam görüntüleme penceresi ve kafatasına implante edilmiş bir kafa plakası ile anestezi uygulanmış bir transgenik fare yavrusu alın.
Nöronlar, görüntülemeyi kolaylaştırmak için kırmızı floresan proteinleri eksprese eder.
Cam görüntüleme penceresini temizleyin ve yavruyu iki fotonlu görüntüleme aşamasına sabitleyin.
Yavrunun kafasını ayarlayarak görüntüleme penceresini mikroskop objektifi ile hizalayın.
Yavrunun vücut ısısını korumak için bir ısıtma yastığı kullanın.
Anestezik akış hızını ayarlayın.
Lamel üzerine bir damla su uygulayın, ardından mikroskobun objektif merceğini indirin.
İki foton mikroskobu, floresan proteinleri aktive etmek için iki ışık fotonu kullanır ve minimum arka plan gürültüsü ve fotoağartma ile ayrıntılı nöronal görüntülemeye izin verir.
Yapılarını görselleştirmek için nöronların çeşitli derinliklerdeki görüntülerini yakalayın
Son olarak, büyümeyle ilgili morfolojik değişiklikleri incelemek için nöron projeksiyonları da dahil olmak üzere nöronun üç boyutlu bir temsilini oluşturmak için görüntüleri yığınlayın.
Görüntülemeye başlamak için önce iki fotonlu lazer dalga boyunu ayarlayın. RFP uyarımı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin