JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:42 dk. • May 29th, 2025
Agaroz içinde hareketsiz hale getirilmiş ve anestezik bir çözelti içeren bir Petri kabına yerleştirilmiş anestezi uygulanmış bir transgenik zebra balığı larvası ile başlayın.
Ayrıntılı görüntüleme için iki foton kullanan iki fotonlu bir lazer mikroskobu altına yerleştirin.
Görüntüleme sınırlarını belirlemek için beynin üst ve alt katmanlarına odaklanın.
Lazer tedavisinden önce nöronları gözlemlemek için çeşitli derinliklerde görüntüler yakalayın.
Odağı ilgilenilen bölgeye ayarlayın ve nöronlara odaklanmayı iyileştirmek için çerçeve boyutunu ayarlayın.
İki fotonlu lazeri kullanarak nöronları seçin ve ışınlayın.
Lazer, lokalize ısıyı indükleyerek çevredeki dokuya minimum hasarla nöronal ölümle sonuçlanır. Görüntüyü yakalayın.
Floresan değişikliklerini değerlendirmek için tedavi öncesi ve sonrası görüntüleri karşılaştırın.
Nöronları daha derin düzlemlerde yeniden odaklayın ve ilgilenilen bölgedeki tüm nöronları tedavi etmek için ışınlamayı tekrarlayın.
Görüntüyü yeniden yakalayın ve işlem öncesi görüntüyle karşılaştırın. Lazer tedavisinden sonra floresan kaybı, başarılı nöronal ablasyonu doğrular.
Agaroz gömülü larvayı 2 fotonlu lazer taramalı mikroskop altına yerleştirin ve mikroskopi sistemi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin