JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:59 dk. • June 17th, 2025
Doğum sonrası sıçan yavrusu beyninden elde edilen serebellar bir dilim ile çok kuyulu bir ortam içeren bir plaka ile başlayın.
Ortamı çıkarın ve granül hücrelerini (GC'ler) etiketlemek için dilimi bir sitoplazmik floresan boya çözeltisinde inkübe edin.
Dilimi bir transwell insert membranına aktarın ve fazla boyayı çıkarın.
Ek parçayı çıkarın ve kuyuyu ortamla doldurun. Ardından, eki değiştirin ve dokuyu kaplamak için ortam ekleyin.
Dokunun insert membranına yapışmasına izin vermek için inkübe edin.
Plakayı konfokal bir makroskopa bağlı bir inkübatöre aktarın ve plakanın üzerine bir cam kapak yerleştirin.
Kültür koşullarını ayarlayın, dokuyu daha fazla inkübe edin, ardından görüntülemeye başlayın.
Lazer aydınlatması üzerine, etiketli GC'ler floresan parlar.
GC'lerin serebellumun moleküler tabakası boyunca radyal göçünü görselleştirmek için hızlandırılmış görüntüler yakalayın.
Görüntüleme yazılımını kullanarak, GC'lerin göç mesafesini analiz edin.
Numuneyi dilimledikten sonra, bunları bir miktar HBSS ile altı oyuklu bir plakaya aktarmak için kesik bir beyaz ampul pipeti kullanın. Her kuyucuğa en fazla üç dilim yükleyin. Daha sonra, yüklenen her bir kuyucuktaki ortamı boşalttıktan sonra, 10 mi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin