Taramalı Elektron Mikroskobu Kullanılarak Bir Fare Beyin Koroid Pleksusunun Görselleştirilmesi

Koroid pleksusu bir fare beyninden bir örnek sepetinde alın.

Beyin ventrikülleri içinde yer alan doku, apikal yüzeylerinde mikrovillus içeren bir epitel hücresi tabakası içerir.

Hücresel mimarisini korumak için dokuyu fiksatif bir çözelti içinde inkübe edin.

Fazla fiksatifi çıkarmak ve pH'ı stabilize etmek için bir tamponla yıkayın.

Dokuyu, hücre zarı lipidlerine bağlanan, zar stabilitesini koruyan osmiyum tetroksit ile inkübe edin, ardından fazla reaktifi durulayın.

Görüntüleme sırasında doku bozulmasını önlemek için artan alkol konsantrasyonları kullanarak dokuyu kurutun.

Dokuyu kurutun, karbon kaplı bir numune yuvasına sabitleyin, ardından iletken bir platin tabaka ile kaplayın.

Taramalı elektron mikroskobu kullanarak, bir elektron demetini yüzeye odaklayın. Platin tabakası elektronları dağıtarak yük birikmesini önler ve görüntüleme artefaktlarını en aza indirir.

Bir dedektör, yüzeyden geri saçılan elektronları yakalar ve mikrovilluslu epitel hücreleri sergileyen dokunun bir görüntüsünü üretir.

SEM için numune hazırlamayı gerçekleştirmek için, yeni izole edilmiş koroid pleksus'u yeni yapılmış fiksasyon solüsyonuna aktarın ve gece boyunca 4 santigrat derecede inkübe edin. Bittiğinde, num