Bir farenin gerçek zamanlı kalsiyum görüntülemesi Bir miniskop kullanarak medial prefrontal korteks
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:55 dk. • June 17th, 2025
Nöronların genetik olarak kodlanmış kalsiyum göstergelerini ifade ettiği medial prefrontal korteksi hedefleyen bir gradyan indeksli lens ile implante edilmiş anestezi uygulanmış bir fareyi ele alalım.
Lens kapağını çıkarın ve net ışık iletimi için yüzeyini temizleyin.
Minoskopu lens tutucusuna sabitleyin.
En uygun odak düzlemini belirlemek için miniskop konumunu ayarlayın. Bu ayarlama, nöronal hücre gövdelerinin net bir şekilde görüntülenmesini sağlar.
Kabloyu çıkarın ve farenin iyileşmesine izin verin.
Kabloyu miniskopa bağlayın ve fareyi davranışsal kayıt kurulumuna sahip bir odaya aktarın.
Görüntüleme sırasında miniskop, hücre içi kalsiyum akışı üzerine floresan yayan kalsiyum göstergelerini uyarmak için ışık yayar.
Gradyan indeksli lens, bu optik sinyalleri derin beyin dokularından miniskopa ileterek ışık saçılımını azaltır ve nöronal aktivitenin gerçek zamanlı olarak görselleştirilmesini sağlar.
Nöronal aktiviteyi belirli davranışlarla ilişkilendirmek için kaydedilen kalsiyum geçici aktivitesini davranışsal gözlemlerle işleyin.
Fareyi izofluran ile kısa bir süre uyuşturduktan sonra, koruyucu kapağı çıkarmadan önce tabandaki kilitleme vidasını küçük bir tornavidayla gevşetin ve GRIN le
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin