JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:54 dk. • June 18th, 2025
Deneysel bir jig'de, başı sıkıca yerine sabitlenmiş, kısıtlanmış, uyanık bir sıçanla başlayın.
Önceden implante edilmiş kayıt odasını açın ve silikon jel kaplamayı çıkarın.
Beyne erişmek için yeniden büyümüş dokuları temizleyin.
Hidrasyonu korumak için bir damla tuzlu su ekleyin.
Ardından, Chicago mavisi boyası içeren önceden doldurulmuş bir kayıt pipetini bir mikromanipülatöre takın.
Pipeti hedef beyin bölgesine ulaşana kadar kayıt odasına indirin.
Pipet nöron ile temas eder ve nörondan gelen sinyalleri nörona nüfuz etmeden kaydeder.
Bu nöronal sinyalleri sesli tıklamalar olarak dinleyin, ardından pipetten elektrik darbeleri iletin.
Bu darbeler, nörona bitişik boyayı enjekte ederek hedef beyin bölgesinin hassas bir şekilde boyanmasını sağlar.
Bu yan yana kayıt ve boyama teknikleri, kayıt bölgesini hassas bir şekilde görselleştirir ve nöral aktivitenin beyin anatomisine doğru bir şekilde haritalandırılmasını sağlar.
Fareyi bez çorabın içine yerleştirin ve bez çorabı uygun bir deney aparatı üzerindeki sert bir tüpe aktarın. Sıçan üzerindeki baş tutma plakasını jig üzerindeki ilgili parçaya takın. Ardından, fareye implante edilen baş tutma cıvatasına bir 832 somunu yerleştirin.
Ardından, dişli bir paslanmaz çelik çubuğu baş cıvatasına vidalayın. Bundan sonra, kayıt odasını açın ve silikon jeli çıkarın. Kraniotomide doku yeniden büyümüşse, ince forseps kullanarak kraniyotomiyi temizleyin. Gerekirse bu işlem sırasında izofluran anestezisi kullanın.
Ardından, pipeti motorlu mikromanipülatöre takın. Pipeti ön, arka ve medial lateral eksenlerde istenen kayıt konumuna taşıyın. Ardından pipeti, amaçlanan kayıt konumuna yaklaşık 500 mikrometre dorsal olana kadar dura boyunca ventral olarak ilerletin. Yükseltilmiş voltajın ses monitöründe ani yükselme olaylarını dinlerken pipeti yavaşça ilerletin.tage kaydedildi. Ani yükselme olayları belirlendikten sonra, pozitif voltaj sapmaları yaklaşık 500 mikrovolttan büyük olana kadar pipeti yaklaşık 0 ila 100 mikrometre arasında hareket ettirmeye devam edin.
Kayıt alanını etiketlemek için akım kaynağını eksi 4 mikroamper %50 Görev döngüsünde iki saniyelik darbelerle. Ve akımı dört dakika boyunca iyontoforetik pipetten Chicago Sky Blue'ya enjekte edin.