JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:15 dk. • June 17th, 2025
Bir membran filtreye monte edilmiş ve konfokal mikroskop altında bir inkübasyon odasına yerleştirilmiş canlı bir doğum sonrası fare retinal eksplant ile başlayın.
Retina, yıldız patlaması amakrin internöronlarının zarlarında bir floresan proteini eksprese etmek için transfekte edilir.
Stabilize etmek için retina üzerine önceden ıslatılmış bir numune ağırlığı yerleştirin.
Hazneyi tamponla doldurun.
Nöronal canlılığı korumak için odadaki optimum tampon akışını ve sıcaklığını koruyun.
Görüntüleme odasına bir suya daldırma hedefi yerleştirin.
Epifloresan görüntülemeyi başlatın.
Objektif boyunca yönlendirilen lazer ışığı, amakrin hücrelerindeki floresan proteini uyarır.
Yayılan floresan aynı amaç doğrultusunda yakalanır ve etiketli amakrin hücrelerinin görselleştirilmesine izin verir.
Görüntüleme için parlak bir floresan hücre tanımlayın.
Görüntüleme parametrelerini ayarlayın.
Tüm dendritik morfolojinin 3D görselleştirmesini elde etmek için birden fazla Z düzleminde görüntü yakalayın.
Zaman içinde dendritik morfolojideki değişiklikleri izlemek için hızlandırılmış görüntüleme gerçekleştirin.
Canlı görüntüleme inkübasyon odasını monte edin ve oksijenli aCSF ile doldurun. Sıcaklığın 34 santigrat derec
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin