JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:23 dk. • June 17th, 2025
Bir lamel üzerinde ölümsüzleştirilmiş insan koku alma kılıflayıcı glia veya OEG hücreleri ve aksotomize sıçan retinal ganglion nöronları veya RGN'lerin bir ko-kültürünü alın.
OEG hücreleri, RGN'lerde aksonal rejenerasyonu kolaylaştıran nörorejeneratif özellikler sergiler.
RGN'ler immün olarak etiketlenmiştir, böylece somaları veya hücre gövdeleri kırmızı floresan yanarken aksonları yeşil floresan olur.
Montaj ortamını kullanarak, hücreleri içeren lameli monte edin.
RGN'lerin birden fazla görüntüsünü yakalamak için bir epifloresan mikroskobu kullanın.
Görüntüleme yazılımında bir görüntü açın.
Toplam RGN sayısına göre aksonlarla nöronların yüzdesini ölçün.
Ardından, soma'dan başlayarak sonuna kadar bir akson izleyin ve tüm aksonların uzunluklarını belirlemek için akson izlemeye başlayın.
Tüm aksonal uzunlukların toplamını toplam RGN sayısına bölerek aksonal rejenerasyon indeksini ölçün.
Lamelleri montaj ortamı ile monte edin ve 4 santigrat derecede tutun. Aksonal rejenerasyonu ölçmek için bir epifloresan mikroskobunun 40 katı objektifini kullanın. Retinal ganglion nöronlarının toplam popülasyonuna göre aksonlu nöronların yüzdesini ölçün.
Aksonal rejenerasyon indeksini veya bir akson sunup sun
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin