Gen Ekspresyonunu Değerlendirmek için Fare Omuriliğinde Subpial Gen İletimi

Anestezi uygulanmış bir fare alın, sırtını tıraş edin ve cildi dezenfekte edin.

Cildi kesin, kasları omurlardan ayırın ve kelepçeler kullanarak geri çekin.

Çatlaklar oluşturmak için vertebral laminaları delin, ardından dış omurilik zarı olan dura mater'i ortaya çıkarmak için kemik parçalarını çıkarın.

Bir iğne kullanarak, bir dural açıklık oluşturun ve omurga dokusuna doğrudan erişim için subpial boşluğa girmek için alttaki pia materini delin.

Floresan protein eksprese eden bir gen taşıyan rekombinant adeno ilişkili virüsün bir süspansiyonunu içeren bir dağıtım iğnesi alın ve süspansiyonu enjekte edin.

İğneyi geri çekin, kasları ve cildi dikin ve farenin iyileşmesine izin verin.

Virüs, nöronlar ve glial hücreler üzerindeki reseptörlere bağlanır ve endositoza uğrar.

Çekirdeğin içine girdikten sonra virüs, floresan proteinler üretmek için gen ekspresyonunu tetikler.

Subpial gen dağıtım modeli artık omurilikteki hedef gen ekspresyonunu değerlendirmeye hazırdır.

Ameliyat için hayvanı uygun şekilde uyuşturarak başlayın. İzofluran burada kullanılır. Devam etmeden önce bir pençe sıkışması tepkisi olmadığından emin olun. Sonra gözleri oftalmik merhem ile örtün. Daha sonra, hayvanın sırtını makasla