JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:00 dk. • June 17th, 2025
Lusiferin ile takviye edilmiş ortamda transgenik fare embriyolarından kortikal beyin dilimleri içeren bir tabakla başlayın.
Kortikal bölge, yeşil floresan proteinleri veya GFP'leri eksprese eden nöral kök hücreleri ve bir lusiferaz raportör genine kaynaşmış bir ilgi geni içerir.
Floresan ve parlaklık ölçümleri için çanağı mikroskop tablasına yerleştirin.
İlgi alanlarına odaklanarak GFP floresansının test görüntülerini yakalayın.
Nöronal farklılaşma sırasında, kök hücreler ilgilenilen geni ifade etmeye başlar ve lusiferaz enzimi ile kaynaşmış proteinler üretir.
Luciferin, lusiferaz enzimleri ile etkileşime girer ve farklılaşma sırasında ilgilenilen genin ekspresyonunu doğrudan yansıtan biyolüminesans üretir.
Belirli aktivite bölgelerini tanımlamak için bir floresan görüntüsü, dinamik gen ekspresyonunu izlemek için bir biyolüminesans görüntüsü ve morfolojik bilgi sağlamak için bir parlak alan görüntüsü yakalayın.
Doğal doku ortamındaki nöronal farklılaşma sırasında gen ekspresyonunu görselleştirmek için bu üç boyutlu hızlandırılmış görüntüleri elde edin.
Dilim kültürleri içinde lusiferaz raportör ifadesini görselleştirmek için 40x hedefini seçin. Ve numune kabını mikroskop tablasına yerleşt
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin