JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:17 dk. • August 7th, 2025
Anestezi uygulanmış bir fareyi stereotaksik bir çerçeveye sabitleyin.
Tıraşlı kafa derisini dezenfekte edin, ardından kafatasını ortaya çıkarmak için orta hat kesisi yapın.
Kafatasını kurutun ve bregma görünürlüğünü artırmak için hidrojen peroksit uygulayın.
Bregma ve lambda'yı bulun, ardından hedef siteleri belirleyin.
Hedef bölgelerde kafatasını dikkatlice delin.
Virüs dolu şırıngayı stereotaksik alete takın.
Virüs, enfekte nöronları etiketlemek için bir floresan raportör ile birlikte dentat girus nöronlarında genom düzenleme için Cas9 ve tek kılavuzlu bir RNA'yı kodlar.
Dentat girusa ulaşmak için şırıngayı indirin, ardından düzgün dağılımı sağlamak için virüsü yavaşça enjekte edin.
Şırıngayı yavaş yavaş kaldırın ve enjeksiyonu ek koordinatlarda tekrarlayın.
Geri akışı önlemek için kısa bir süre duraklayın, ardından iğneyi yavaşça geri çekin.
İşlemi karşı yarım kürede tekrarlayın.
Son olarak, kesiyi dikin.
Model artık daha ileri çalışmalar için hazır.
Enjeksiyon bölgesine hazırlanmak için anestezi uygulanmış bir farenin kafasını tıraş edin. Burun konisine doğrudan% 4 izofluran. Ardından, fareyi stereotaksik alete yerleştirin. Kulak çubuklarını sabitlemeden önce ısırma çubuğunu dişleri yuvaya
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin