JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:33 dk. • June 17th, 2025
Erken evre bir embriyo içeren pencereli, döllenmiş bir tavuk yumurtası ile başlayın, nöral tüpü bir ila yedi somit seviyesinde eksize edilir.
Evre uyumlu bir transgenik tavuk embriyosundan GFP etiketli bir donör nöral tüp alın ve uygun anatomik oryantasyonu sağlayarak alıcıya implante edin.
Donör ve konakçı dokular arasındaki yapışmayı artırmak için greftin etrafındaki fazla sıvıyı çıkarın.
Dehidrasyonu ve kirlenmeyi önlemek için pencereyi şeffaf bantla kapatın.
Embriyo istenen aşamaya gelene kadar yumurtayı kuluçkaya yatırın.
Bandı çıkarın.
Yumurta sarısı üzerinde kanı embriyoya doğru taşıyan bir vitellin damarı tanımlayın ve üstteki vitellin zarını çıkarın.
Bir cam iğne kullanarak, damar içine sürekli olarak lipofilik bir floresan boya enjekte edin.
Embriyoyu stereofloresan mikroskobu altında görselleştirin.
Enjekte edilen boya, kan damarlarını kaplayan endotel hücrelerine bağlanarak vasküler ağı vurgularken, GFP etiketli nöral tüp, sinir ağının izlenmesini sağlar.
Greftleme prosedürüne başlamaya hazır olduğunuzda, disseke edilmiş nöral tüpü saat camından konakçı embriyoya dikkatlice aktarın. Nöral tüpü doğru yönde konumlandırın. Ve bitişikteki eksplantı, eksize edilen bölgeye nazikçe iti
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin