Fare Beyninde TRPV1 Duyarsızlaştırma için Resiniferatoksin ile İntraserebroventriküler Tedavi

Duyusal nöronlarda eksprese edilen ağrıya duyarlı iyon kanalları olan TRPV1 reseptörlerinin yüksek afiniteli bir agonisti olan resiniferatoksin ile doldurulmuş bir mikroşırınga alın.

İğneyi metal bir tüpten geçirin ve hassas ventriküler hedefleme için ucun kısa bir ucunu açığa çıkarın.

Anestezi uygulanmış bir fareyi yüzüstü yatırın ve kafasını alkol kullanarak dezenfekte edin. Kafatasını stabilize etmek için kafayı sıkıca tutun.

İğneyi sagital dikişe takılana kadar kafa derisi üzerinde yanal olarak hareket ettirin.

İğneyi sağa kaydırın, ardından koronal sütürün üzerine asmak için rostrally olarak hareket ettirin.

İğneyi sağ lateral ventriküle sokun, ardından RTX'yi yavaşça enjekte edin.

RTX yayılmasına izin vermek için iğneyi kısa bir süre tutun, ardından geri akışı önlemek için yavaşça geri çekin.

RTX, beyindeki duyusal nöronlar üzerindeki TRPV1 kanallarına bağlanarak sürekli kalsiyum akışına ve uzun süreli nöronal depolarizasyona neden olur.

Bu, fosforilasyon aracılı TRPV1 duyarsızlaşmasını, ardından TRPV1 içselleştirmesini ve lizozomal bozulmayı tetikler, bu da ağrı uyaranlarına nöronal yanıtı azaltır.

Bir fareyi intraperitoneal olarak pentobarbital sodyum ile uyuşturun ve doğru refleks