Bir konumlandırma cihazı kullanılarak siRNA'nın fare beynine intranazal iletimi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:05 dk. • August 8th, 2025
Anestezi uygulanmış farelerin, sırtları sandalyenin sırt desteğine paralel ve koltuğa dik olacak şekilde bir konumlandırma cihazına yerleştirilmesiyle başlayın.
Fareler baş aşağı ve ileri pozisyonda konumlandırılır ve sandalye kemerleri kullanılarak sabitlenir.
Nöron hedefli bir peptit-siRNA kompleksi ile yüklü bir mikropipet kullanarak, bir burun deliğinin yanına bir damla yerleştirin ve farenin çözeltiyi doğal olarak solumasına izin verin.
Solüsyonun akciğerlere akmasını önlemek için soluma sırasında farenin başını hafifçe aşağı doğru bastırın.
Kısa bir süre duraklayın, ardından uygulamayı diğer burun deliğinde tekrarlayın.
Kalan fareler için prosedürü tekrarlayın.
Kompleks, burun mukozasına nüfuz eder, buradan koku alma ve trigeminal sinirlere girer ve beyne ulaşmak için bunların içinden geçer.
Beynin içinde, kompleks nöronal reseptörlere bağlanır, endositoza uğrar ve hücre içi siRNA iletimini kolaylaştırır.
siRNA, hedef mRNA'ya bağlandıktan sonra gen susturulmasını indükleyen RISC kompleksinin bir parçası haline gelir.
Bu işleme başlamak için, cerrahi düzlemi korumak için farelerin iki ayaklı refleksinin anestezi seviyesini değerlendirin. Ardından, gerekli tüm reaktiflere kolay erişim
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin