JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:13 dk. • June 17th, 2025
Tat işleyen periferik nöronlardan oluşan bir küme olan cerrahi olarak maruz kalan bir genikülat ganglion ile anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.
Bu nöronlar, kalsiyum bağlanması üzerine floresan veren bir kalsiyum göstergesi olan GCaMP'yi ifade eder.
Net görselleştirme için gangliyonu kaplayan herhangi bir sıvıyı çıkarın.
Fareyi mikroskop altında emici bir ped üzerine yerleştirin ve anatomik yer işaretlerini kullanarak genikülat ganglionu bulun.
Epifloresan kapsamı üzerinde uygun bir filtre kullanarak, GCaMP eksprese eden nöronlardan gelen yeşil floresansı tespit edin.
Ardından, tastant dağıtım tüpüne bağlı bir dağıtım iğnesini farenin ağzına sokun ve tastandı verin.
Tastant, tat reseptör hücrelerini uyararak, ganglion nöron reseptörlerine bağlanan ve kalsiyum akışını tetikleyen ATP'yi serbest bırakır.
Bu kalsiyum iyonları GCaMP'lere bağlanarak floresan emisyonuna neden olur.
Kamerayı mikroskobun görüş alanıyla hizalayın ve floresan değişiklikleri yoluyla gerçek zamanlı nöronal aktiviteyi yakalamak için video kaydını sabit iletimle senkronize edin.
Tastant panelini çalıştırmak için, sıvıyı genikülatın üzerinden çıkarmak için emme kullanın ve fareyi diseksiyon mikroskobu altında emic
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin