19 Kasım 2011
Diseksiyon tekniği high-throughput ekranlarında fenotipleme gerçekleştirmek için doku fiksasyonu fare gözün enükleasyonu göstermektedir.
Bu video, fare gözünü ve çekirdeklenmesini veya göz küresinin göz yuvasından çıkarılmasını gösterecektir. Göz küresi, alt kapak kenarı ile sınırlıdır. İşte medial veya nazal kantus.
Arkada temporal veya lateral kantus var. Yukarıda üst kapak kenar boşluğu var. İşte cerrahi bir örnek.
İğne şeffaf korneayı işaret ediyor. Lensin bir kısmının irisin yanından geçtiğini görebiliriz. İris burada kahverengi renktedir ve lensi kaplar.
En önemli cerrahi dönüm noktası bu beyaz çizgidir veya limbus hemen arkasında bir delinme yarası yapacaktır. Dünyanın arka yarısı limbusun arkasında ve biz bir kas girişine işaret ediyoruz. Burada küreye karşı yatan kası ve ardından yörüngeyi dolduran ve Arian bezini içeren bağ dokusunu görebilirsiniz.
Ve son olarak, bu künt bir diseksiyondan kaynaklanan beyaz uzun optik sinir şerididir. Keskin bir uçla özelleştirilmiş kavisli bir pansuman forseps kullanarak, göz kapaklarını ayırarak başlayın. Bu, gözü dışarı ve uzağa kaldırma eğilimindedir.
Forsepslerinizi yörüngeye ve göz küresinin arkasına geçmek için dikkatlice kullanın, göz küresinin arkasına sıkmadan nazikçe sıkıştırın ve öne doğru çekin. Göz küresini değil, bağ dokusunu kavrayabilmeliydiniz. Göz küresini yana çevirirseniz, beyaz optik sinir ile birlikte orbital dokuyu görebilirsiniz.
Bu ikinci bir diseksiyon, tekrar göstermek için, kanthustan içeri giriyorsunuz, forsepsleri göz küresinin arkasına itiyorsunuz, bağ dokusunu tutuyorsunuz ve göz küresinin kendisine bastırmadan öne doğru çekiyorsunuz. Yine, beyaz optik sinirin uzun şeridinde bağ dokusunu görebilirsiniz. Bir delinme yarası yapmak için, göz küresini bir kas sokularak kavrayın ve sabitlemek için gözü tuttuğunuz yerin hemen yanındaki limbusun arkasına bir iğne sokun.
Bu, fiksatifin göze girmesine izin verecektir. Delinmeyi gözü tuttuğunuz yerden çok uzağa yaparsanız, göz küresi çok dengesiz olacaktır ve gözü sıkıştırmadığınız veya aşırı baskı uygulamadığınız sürece bu yarayı yapmak zor olacaktır. Ayrıca göz küresinin hemen arkasındaki tüm bağ dokusunu da kavrayabilirsiniz.
Bazı fiksatifler delinme yarası gerektirmez. Genel olarak, gözün suya batırıldığından emin olmak için gözü en az üç cc fiksatif içeren beş cc'lik bir sintilasyon şişesine koyarız. Bolluk sabit hayvanlar için keskin bir diseksiyon gereklidir.
Kavisli bir calibri forseps ve kavisli wescott makası kullanıyoruz. Alt kapağı calibri forseps ile kavrayın. Makasınızı orbital kemiğe sokun ve bağ dokusunu kesmeye başlayın.
Eğriyi göz küresinden uzakta kullanıyoruz ve boyutlandırmadan kaçınıyoruz. Gözlerden herhangi biri, alt kapak kenarı boyunca bir kantustan diğerine kadar tüm yol boyunca çalışacaktır. Belli bir noktada, bağ dokusunun çoğu çıkarılacak ve makasınızı kürenin arkasına kaydırıp çekip çekebilirsiniz.
İşte yine başka bir örnek, makası yörüngeye sokmak, ancak göz küresi yerine orbital kemiğe karşı ve bağ dokusunu kesmek. Bu, sepetteki bir sepet topu gibi olan göz küresini serbest bırakmaya başlayacaktır. Göz kapaklarını geri çekmek için forsepsleri kullanın ve göz küresinin etrafında hafif kısa kesikler yapın.
Burada Collibra ile bağ dokusunu veya bir kas girişini kavrarız ve göz küresini orbital bağ dokusundan kesmeyi bitiririz. Gözbebekleri uygun şekilde sabitlendikten sonra ve taşınmaları gerekiyorsa, bir miktar para filmi yerleştiriyoruz. Sation şişesinin etrafındayız.
Ambalaj, üniversitenize ve hükümet düzenlemelerine uygun olmalıdır. Bunları genellikle biraz pamuklu bir kaba koyarız Herhangi bir sıvıyı yakalamak için bu kabın çok sıkı bir şekilde kapatılması gerekir. Bu nakliye konteyneri daha sonra bir balonlu naylon torbaya yerleştirilir.
Bu, herhangi bir belgeyle birlikte bir sıvı laboratuvar nakliye paketine yerleştirilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu video, yüksek verimli fenotipleme ekranlarında doku fiksasyonu için kritik olan fare gözünün enucleasyon tekniğini göstermektedir. Prosedür, anatomik referans noktaları daha net görünürlük için vurgulayarak göz küresinin soketinden çıkarılmasını içerir.
Remote high-throughput phenotyping of mouse eyes enables distributed genetic resource utilization and accelerates discovery of genotype-phenotype correlations in ophthalmic disease models. Standardized enucleation and tissue transfer protocols reduce geographic and operational barriers, supporting scalable, multi-site preclinical research. This approach enhances portfolio-wide access to rare or geographically dispersed transgenic lines for early-stage target validation and phenotypic screening.
This remote enucleation and tissue transfer protocol integrates into the early discovery and preclinical continuum, bridging genetic model generation with centralized phenotyping and analysis.