Hücre Bazlı Nörotransmitter Floresan Mühendislik Raportörleri Kullanılarak Nörotransmitter Salınımının Görüntülenmesi

Beyin görselleştirmesini sağlamak için ince bir kafatası tabakası içeren bir kafatası penceresine sahip bir fare alın.

Baş hareketi, takılı bir kafa çubuğu kullanılarak sınırlandırılır.

Korteks, nörotransmitter salınımının gerçek zamanlı olarak tespit edilmesini sağlayan raportör hücreler olan hücre bazlı nörotransmitter floresan mühendislik raportörleri veya CNiFER'ler ile önceden enjekte edilir.

CNiFER'ler, bir G-proteinine bağlı nörotransmitter reseptörü ve donör ve alıcı floroforlara kaynaşmış bir kalsiyum bağlama alanından oluşan bir sitoplazmik kalsiyum detektörünü eksprese eder.

İki fotonlu bir mikroskop kullanarak, donör floresan emisyonuna neden olmak için dedektörü uyarın ve CNiFER görselleştirmesini etkinleştirin.

Kortekse ulaşan nöronal aktivite, nörotransmitter salınımına neden olur.

Bu nörotransmiterler CNiFER reseptörlerine bağlanır ve endoplazmik retikulumdan kalsiyum salınımını indükleyen sinyal yollarını aktive eder.

Artan sitoplazmik kalsiyum, dedektöre bağlanarak floroforları yakınlaştıran konformasyonel bir değişikliğe neden olur.

Verici, nörotransmitter salınımını gösteren alıcı floresan emisyonunu uyarmak için alıcıya enerji aktarır.

Görüntüleme platformunu, iki foto