JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:56 dk. • August 7th, 2025
Duyusal nöron hücre gövdeleri içeren açıkta kalan L4 ve L5 dorsal kök gangliyonlarına sahip anestezi uygulanmış bir fare alın.
Akson rejenerasyonunu düzenleyen florofor etiketli RNA yapılarına ve bir izleyici boyaya sahip bir mikroenjeksiyon pipeti yükleyin.
Karışımı DRG'lere enjekte edin.
Elektroporasyon elektrotlarını kullanarak DRG'lere elektrik darbeleri uygulayın.
Bu, duyusal nöron hücre gövdelerinin zarlarını bozar, yapıların sitoplazmaya girmesine izin veren gözenekler oluşturur ve transfeksiyonu kolaylaştırır.
Kesiği dikin ve farenin iyileşmesine izin verin.
Birkaç gün sonra, fareyi yeniden uyuşturun ve sabitleyin.
Soldaki orta hattın yanal bir kesi yapın. Siyatik siniri ortaya çıkarmak için kasları inceleyin.
Duyusal nöron aksonlarına zarar vermek için siniri ezin. Siteyi bir dikiş düğümü ile işaretleyin.
Kesiği dikin ve farenin iyileşmesine izin verin.
Transfekte edilmiş yapılar, DRG duyusal nöron hücre gövdelerindeki hedef mRNA'ları hedef alır ve yaralanma sonrası duyusal akson rejenerasyonunu artırmak için protein üretimini geçici olarak modüle eder.
DRG enjeksiyonu için, DNA plazmitlerini veya RNA oligolarını cam kılcal pipete yükleyin. Ardından kılcal cam pipetin ucunu dikkatli
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin