Farelerde burundan beyine ilaç iletimi için pipet ve ters kanülasyon yoluyla intranazal ilaç uygulaması

Anestezi sağlamak için anestezi sağlamak için bir inhalasyon maskesi ile sırtüstü pozisyonda anestezi uygulanmış bir fare alın.

Pipet bazlı intranazal ilaç uygulaması için, radyoaktif işaretli bir ilaç içeren bir mikropipet alın.

Mikropipeti maskedeki bir açıklıktan geçirin ve ilacı burun boşluğuna uygulayın.

Boşluk, her ikisi de aktif olarak maddeleri temizleyen kirpikler içeren ve böylece ilacın tutulmasını sınırlayan solunum ve koku alma epiteli ile kaplıdır.

Tutulan ilaç molekülleri beyne ulaşmak için sinirler yoluyla hareket eder.

Ters kanülasyon yoluyla intranazal ilaç uygulaması için, fareyi mikroskop altına yerleştirin ve bir boyun kesisi yapın.

Trakeayı açığa çıkarın, kesin, bir kanül yerleştirin ve anesteziyi sürdürmek için maskeye bağlayın.

Yemek borusunu açığa çıkarın, bir kesi yapın ve burun boşluğuna doğru yönlendirilmiş bir kanül yerleştirin.

Kanülü bağlayın ve radyoaktif işaretli ilacı içeren bir şırıngaya takın.

İlacı siliyer hareket yönüne karşı verin, retansiyonu artırın ve ilaç taşınmasını iyileştirin.

İzole edilmiş bir radyoizotop tesisinde mikropipet yoluyla intranazal uygulama için, anestezi uygulanmış bir fareyi sırtüstü pozisyonda bir mantar tahtasına bantlayın ve alternatif olarak hayvanın sol ve sağ burun deliklerine bir ila iki mikrolitrelik dozlarda 25 mikrolitre karbon-14 inülin solüsyonu uygulayın.

Hava yolu tarafından yemek borusu boyunca ters kanülasyon verilmesi için, anestezi uygulanmış fareyi diseksiyon mikroskobu altına yerleştirin ve boğaz üzerinde 1.5 cilt kesisi yapın. Soluk borusu açığa çıkana kadar kesiyi genişletmek için forseps kullanın ve açıkta kalan trakeada 1 milimetrelik bir kesi yapın. İnsizyonun içine önceden işaretlenmiş konuma bir kanül 1.2 yerleştirin ve kanülün diğer ucunu bir inhalasyon maskesinin içine takın.

Bundan sonra, yemek borusunu trakeanın altından ortaya çıkarmak için forseps kullanın. Yemek borusunda 1 milimetrelik bir kesi yapmak için makas kullanın ve burun boşluğunun arka ucuna doğru önceden işaretlenmiş konuma ikinci bir kanül 1.4 yerleştirin.

Deney hayvanının ağırlığına göre uygun bir uzunlukta kanülün yerleştirilmesi, diğerlerinde ise kanül uzunluğunun ayarlanması önemlidir.

Yemek borusu kanülünü bağlayın ve programlanabilir bir mikro şırınga pompasına bağlı bir uygulama solüsyonu ile doldurulmuş 1 mililitrelik bir şırıngaya 27 gauge bir iğne takın. Daha sonra, tüm çözelti hacmi uygulanana kadar dakikada 5 mikrolitre sabit bir oranda 25 mikrolitre karbon-14 inülin verin.

Burun boşluğu içinde mümkün olduğunca fazla ilaç çözeltisinin tutulması için yavaş ama sabit bir difüzyon hızı önemlidir.