JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:13 dk. • August 7th, 2025
Anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın ve göz bebeği genişletici bir ajan uygulayın.
Mikroskop altında, göz kapağını açın ve enjeksiyon bölgesini ortaya çıkarmak için gözü hafifçe çıkıntı yapın.
Bir damla oftalmik viskoelastik solüsyon uygulayın, ardından retinayı görselleştirmek için bir lamel yerleştirin.
İnce bir iğne kullanarak, kan damarlarına ve lense zarar vermekten kaçınarak kornea-sklera bağlantısının arkasında bir delik açın.
Bu önceden delinmiş delikten, retina nöronlarını destekleyen retina pigment epitelinin veya RPE'nin yakınındaki subretinal boşluğa teğet olarak künt bir şırınga yerleştirin.
Hedef genleri taşıyan lentiviral vektörü subretinal boşluğa enjekte edin.
Sıvı birikimine bağlı bir subretinal bleb oluşumunu gözlemleyin ve başarılı vektör iletimini onaylayın.
Enjeksiyon bölgesini kaplamak için göz kapağını yavaşça kapatın ve farenin iyileşmesine izin verin.
Lentivirüs, endositoz yoluyla RPE'ye girer, genetik materyalini serbest bırakır ve onu, konakçı genomu ile bütünleşen ve gen ekspresyonunu sağlayan karşılık gelen DNA'ya dönüştürür.
İlk olarak, 33 gauge künt iğne ile mikrolitrelik bir şırınga hazırlayın. Etilen oksit gazı kullanarak sterilize edin. Daha sonra, P
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin