JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:58 dk. • August 7th, 2025
Teslimat hızını kontrol etmek için suyla dolu bir şırıngaya bağlı ve bir mikro pompaya bağlı özelleştirilmiş deliklere sahip bir kuvars mikro iğne alın.
Açıkta kalan enjeksiyon bölgesi ile güvenli, anestezi uygulanmış bir sıçan alın.
Mikroiğneyi yerleştirin ve altına bir parafin filmi yerleştirin. Üzerine bir damla enjeksiyon solüsyonu koyun.
Bir hava kabarcığı oluşturmak için suyu geri çekin, ardından çözeltiyi çekmek için mikro iğneyi indirin.
Net bir geçiş sağlayarak bir damla oluşmasına izin verin.
Beyin zarını delmek için keskin bir iğne kullanın.
Doku parçasının iğneye girmesini önlemek için mikroiğneyi düşük bir dağıtım hızına ayarlanmışken yerleştirin.
Yerleştirildikten sonra biraz daha derine inin. Geri akışı önlemek için teslimatı durdurun ve tekrar kaldırın.
Teslimatı daha hızlı bir şekilde başlatın. İğnedeki delikler, enjekte edilen çözeltinin optimum dağılımını sağlar.
Difüzyonu kolaylaştırmak için iğneyi çekmeden önce yeterli zaman tanıyın.
Küçük bir parça plastik parafin filmi kesin ve kafatasının üzerine yerleştirin. 10 mikrolitrelik pipeti kullanarak, plastik parafin filme uygulamak için solüsyondan bir damla damlatın. Pompayı durdurun. Pompanın iticisini hafifçe geri alın ve mikroenjeksiyon şırıngasının pistonunu hafifçe çekerek kılcal damarda küçük bir hava kabarcığı oluşturun.
İğnenin ucunu damlaya ulaşana kadar indirin. Mikroenjeksiyon şırıngasının pistonunu çok yavaş çekerek ve herhangi bir kabarcık oluşumundan kaçınarak numuneyi çizin. Pistonla temas eden pompa iticisini değiştirin ve pompayı dakikada 0,3 mikrolitre akış hızında açın.
Ardından, bir sonraki adıma geçmeden önce bir düşüş oluşana kadar bekleyin. Daha sonra, akışı dakikada 0,1 mikrolitreye düşürün. Dura'yı paslanmaz çelik konik uçlu bir iğne ile çentikleyin ve beyin dokusuna girmek için iğneyi yavaşça indirin. İstenilen konuma ulaşıldığında, 0,1 milimetre daha aşağı inin, ardından pompayı durdurun.
Stereostatik kolu 0,1 milimetre kaldırın ve pompayı dakikada 0,3 mikrolitre ile tekrar çalıştırın. Bundan sonra, zamanlayıcıyı ve enjeksiyonu başlatın. Enjeksiyon sırasında kabarcık hareketini izleyin. Sonunda, pompayı durdurun ve iğneyi yavaşça almadan önce beş dakika bekleyin.