İzleyicileri Doğrudan Sıçan Motor Nöronlarına Taşımak için Motor Uç Plakaları Boyunca Kas İçi Enjeksiyonlar

Anestezi uygulanmış bir sıçan alın ve göz kayganlaştırıcı uygulayın.

Hedeflenen uzvu tıraş edin, cildi sterilize edin ve fareyi hedeflenen kasa en iyi erişimi sağlayacak şekilde konumlandırın.

Kası ortaya çıkarmak için cildi kaldırın ve kesin.

Motor nöron akson terminallerinin nöromüsküler kavşaklar oluşturmak için kas lifleriyle sinaps yaptığı bölgeler olan motor uç plakalarının veya MEP'lerin fotoğraflarına bakın.

MEP bölgesini zihinsel olarak açıkta kalan kas üzerine haritalayın.

Floresan izleyici içeren bir cam mikropipet alın.

İzleyiciyi MEP bölgesi boyunca birden fazla noktada kas içine enjekte edin.

Fazla izleyiciyi çıkarın, kesiği kapatın ve bir ağrı kesici uygulayın.

Enjeksiyon, nöromüsküler kavşaklarda izleyici kullanılabilirliğini artırarak akson terminallerinde endositozunu kolaylaştırır.

Veziküller içinde bulunan izleyiciler daha sonra geriye doğru omurilikteki motor nöron hücre gövdelerine taşınır.

Omurilikte izleyici işaretli motor nöronların varlığı, MEP hedefli uygulamanın nöroterapötik potansiyelini düşündürmektedir.

Canlı kası motor uç plakalarına enjekte etmek için, önce pistonlarla donatılmış dereceli cam mikropipetleri çekmek için bir mikropipet çektirmesi kullanın. Dah