Bir fare beyninde insan nöral progenitör hücrelerinin in vivo biyolüminesans görüntülemesi

Beynine genetik olarak değiştirilmiş insan nöral progenitör hücreleri veya NPC'ler enjekte edilen immün yetmezliği olan bir fare ile başlayın.

Bu hücreler, ışık üreten bir enzim olan lusiferazı eksprese eder.

Lusiferaz için substrat olan lusiferini fareye intraperitoneal olarak enjekte edin.

Fareyi uyuşturun, ardından kurumasını önlemek için gözlerine oftalmik kayganlaştırıcı sürün ve görüntüleme için kafasını tıraş edin.

Fareyi, görüntüleme için önceden ayarlanmış koşullara sahip bir görüntüleme odasının içinde yüzüstü konuma getirin.

Luciferin kan dolaşımında dolaşır ve endotel hücrelerinden geçerek beyin dokusuna girer ve nakledilen NPC'lere ulaşır.

Hücrelerin içinde, lusiferin lusiferaz ile reaksiyona girer ve biyolüminesan ışık üretir.

Görüntüleme sistemi, NPC nakli bölgesinden yayılan bu biyolüminesan sinyalleri yakalar.

Bu biyolüminesan sinyaller, insan NPC'lerinin fare beynine başarılı bir şekilde nakledildiğini doğrular.

Luciferini intraperitoneal olarak enjekte edin ve beş dakika sonra hayvanları sürekli bir izofluran kaynağı ile uyuşturun. Geleneksel bir saç tıraş makinesi kullanarak baş bölgesindeki sedasyonlu hayvanları tıraş edin. Hayvanı görüntüleme odasına yerleştirin ve lusiferin enjeksiyonundan 15 dakika sonra kontrol panelindeki Al'a tıklayarak görüntülemeye başlayın.