Spinal ve Bulbar Kas Atrofisi Fare Modelinde Rekombinant Adeno İlişkili Vektörlerin Enjekte Edilmesi

Kısıtlanmış bir Spinal ve bulbar kas atrofisi veya SBMA'dan etkilenen fare ile başlayın.

Kuyruğunu temizleyin ve damarı genişletmek için ısıtın.

SBMA, mutasyona uğramış bir androjen reseptörü veya mutant AR mRNA üreten AR geninden kaynaklanır.

Bu mRNA, motor nöronlarda sinyal iletimini bozan ve kas güçsüzlüğüne neden olan toksik proteinleri sentezler.

Daha sonra, terapötik mikroRNA'yı kodlayan bir plazmit ile rekombinant adeno ilişkili virüs veya AAV vektörleri içeren bir şırınga alın.

İğneyi kuyruk damarına sokun ve çözeltiyi enjekte edin.

Şimdi, kanamayı durdurmak için baskı uygulayın, ardından fareyi kafesine geri koyun.

Dolaşıma girdikten sonra, viral vektör kas fonksiyonunu kontrol eden motor nöronlara ulaşır.

Virüs hücreye endositoz yoluyla girer ve plazmidi serbest bırakır.

Plazmit, mutant AR mRNA'ya tamamlayıcı dizilere sahip olgun mikroRNA üretir.

Bu mikroRNA'lar AR mRNA'lara bağlanarak bozulmalarını tetikler.

Bu, toksik protein birikimini engeller ve nöromüsküler fonksiyonun iyileştirilmesine yardımcı olur.

AAV mikroRNA plazmit stoğunu, mililitre başına 10 ila 100 trilyon genomluk bir viral yük içeren 100 ila 200 mikrolitrelik alikotlara bölün. Ardından, bir şırıngaya bir alikot yük