JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:18 dk. • June 17th, 2025
Bir perfüzyon odasına monte edilmiş felçli bir transgenik zebra balığı larvasını alın.
Larva, su hareketini algılayan yanal çizgi sisteminin bir bileşeni olan nöromastın tüy hücrelerinde zar lokalize kalsiyum göstergelerini ifade eder.
Saç hücreleri, sinyalleri iletmek için afferent nöronlarla sinapslar oluşturan apikal saç demetleri ve bazal presinaptik bölgelerden oluşur.
Konfokal mikroskop altında, larvanın yakınına bir sıvı jeti pipeti yerleştirmek için düşük büyütme kullanın.
Bir nöromastın yerini belirlemek için büyütmeyi artırın, pipeti yanına yeniden yerleştirin ve
floresan görüntülemeye geçin.
Kalsiyum iyonları da dahil olmak üzere apikal katyon akışı için mekanotransdüksiyon kanalları açarak saç demetlerini saptırmak için sıvı darbeleri verin.
Zayıf floresan göstergeler kalsiyuma bağlanarak floresanda lokalize bir artışa neden olur.
Katyon akışı hücreyi depolarize eder, bazal presinapstaki voltaj kapılı kanallardan kalsiyum girişini tetikler, burada göstergelere bağlanır ve lokal olarak floresansı arttırır.
Apikal ve bazal kalsiyum dinamiklerini gerçek zamanlı olarak görselleştirin.
Bu prosedürde, 10 mikrolitre nöronal tamponu, bir jel yükleme ucu kullanarak uygun şekilde kırılmış
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin