Orta Serebral Arter Oklüzyonu Fare Modelinde Bir Test Bileşiğinin Nöroprotektif Etkilerinin Değerlendirilmesi

Dış karotis arter veya ECA ve iç karotis arter veya ICA ve orta serebral arteri veya MCA'yı tıkayan ince bir filament üzerinde dikişler bulunan anestezi uygulanmış farelerle başlayın.

MCA'daki bağıl serebral kan akışını ölçmek için bir lazer Doppler probu yerleştirin. Kan akışındaki bir azalma MCA oklüzyonunu doğrular.

MCA oklüzyonunu korumak için filamenti ICA'ya sabitleyin.

Bu tıkanıklık, beyne giden oksijenli kan akışını kısıtlayarak nöronal ölüme ve ölü doku veya enfarktüs oluşumuna yol açar.

Oklüzyon döneminden sonra, kan akışını eski haline getirmek için filamenti geri çekin.

Kesiği dikin ve farelerin iyileşmesine izin verin.

Fareleri iki gruba ayırın ve kontrol grubu tedavi edilmeden kalırken, tedavi edilen gruba oral gavaj yoluyla bir test bileşiği uygulayın.

Bileşik dolaşıma girer, beyne ulaşır, nöronal apoptozu sınırlar ve tedavi edilmeyen kontrol grubuna kıyasla daha fazla nöronal ölümü engeller.

Tedavi edilen grupta kontrol grubuna kıyasla daha küçük bir enfarktüs, bileşiğin nöroprotektif etkisini doğrular.

Bir fare orta serebral arter oklüzyon modeli veya MCAO kurmak için, anestezi uygulanmış altı haftalık, 22 ila 25 gram erkek C57 siyah 6 farede masal uyaranına yanıt eksikliğini doğrulayın. Ve fareyi bir termometreye bağlı 36,5 santigrat derece vücut ısısı tutan bir battaniyenin üzerine yerleştirin.

Farenin göğsünden ve boynundan tıraş ve tüy dökücü krem ile tüm tüyleri çıkardıktan sonra, fareyi stereo mikroskop altına yerleştirin ve boynun ortasına iki santimetrelik bir cilt kesisi yapın. Sol ana karotis arteri, dış karotis arteri ve iç karotis arterin dalını çevredeki bağ dokularından dikkatlice izole edin. Ve dış karotis arteri ve ortak karotis arteri bağlamak için 4-0 ipek sütür kullanın, iç karotis artere kan akışını geçici olarak engellemek için yarım askılı bir düğüm ile.

0,1 ila 0,12 milimetre kalınlığında, 11 milimetre uzunluğunda, silikon kaplı, 8-0 Monofilament, internal karotis arterden sol orta serebral arterin kökenine kadar 4-0 sıfır ipek sütür. Ve göreceli serebral kan akış arterindeki azalmayı ölçmek için bir lazer Doppler akış ölçer kullanın. Serebral arter tıkalıyken, yerleştirilen filamenti iki saat boyunca kan damarına sabitleyin.

Oklüzyon süresinin sonunda, 22 saatlik reperfüzyon için kan akışını eski haline getirmek için filamenti dikkatlice geri çekin. Ve cildi iki yarım düğüm ile beş yerden dikmek için 3-0 ipek dikişler kullanın. Ardından, anestezik iyileşme için fareyi kafesine geri koyun. Reperfüzyonun bitiminden bir saat sonra, vücut ağırlığının kilogramı başına 300 miligram G-Rex'i deney hayvanlarına sadece oral gavaj ile uygulayın.