Glioblastoma Dokusunda Tümör Hücresi Migrasyonunun Hızlandırılmış Taramalı Konfokal Mikroskopi Kullanılarak Görüntülenmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:07 dk. • June 17th, 2025
Cerrahi olarak eksize edilmiş bir tümörden elde edilen bir glioblastoma doku dilimi ile başlayın.
Hücre sağkalımını desteklemek için doku dilimini bir kültür ortamında tutun.
Dilim içindeki tümör hücreleri, hücre göçü sırasında tümör hücrelerinin görselleştirilmesini kolaylaştıran yeşil bir floresan proteini veya GFP'yi eksprese eder.
Doku dilimlerini içeren kültür plakasını konfokal mikroskop tablasına yerleştirin.
Ortamın sıcaklığını korumak için bir sahne üstü inkübatör yerleştirin.
Bir objektif seçin ve dilim kültürlerini mikroskop altında görselleştirin.
Mikroskoplar, hücrelerdeki floresan proteinleri uyarmak için lazer ışığı kullanır.
Şimdi, çeşitli derinliklerde görüntüler yakalamak için örneği katman katman tarayın.
Hücrelerin ayrıntılı bir 3B temsilini oluşturmak için görüntüleri yığınlayın.
Ardından, hücre hareketini ve yönünü izlemek için düzenli aralıklarla Z-yığını görüntüleri yakalayın ve zaman içinde tümör hücresi göçünün incelenmesini sağlayın.
Çanağı, konfokal bir mikroskobun 37 derece,% 5 CO2 sızdırmaz mikroskop kademeli üst inkübatörüne yerleştirin. Hücre göçünün üç boyutlu, zamana bağlı görüntülerini yakalamak için tek veya çoklu fotonlu görüntüleme ile birlikte uzun bir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin