Name: Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 57 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda spinal kord yaralanması sonrası akut ve kronik dokunsal duyu değişikliklerini iki farklı Von Fry test yöntemiyle nasıl nicelendireceğinizi. Bu doğrulanmış yöntemler allodini benzeri duyuları güvenilir şekilde tespit eder.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NIH NS43798 (DMB); NIH F31 NS058138 (MRD); P30-NS045758 (CBSCR) ve Amerika Felçli Gaziler # 2451 (DMB) ve # 2707 (MRD).

1. Yukarı / Aşağı Plantar Von Frey Test Testin amacı, daha kuvveti uyaran gelen pençe çekme ortaya çıkartılması için gerekli olan kadar ölçerek dokunsal hassasiyeti belirlemektir. 4,56 ve 6,10 olan aralığı arasında ticari olarak mevcut kalibre Von Frey kılı monofilamentlerin pençe teşvik etmek için kullanılır. Görsel veya proprioseptif girişi dayalı yanıtlar geçersiz nedenle uyarıcı veya Propriosepsiyon görselleştirme gibi diğer duyusal girdi dokunsal eşik tedbirleri etkilemesi için. Rat tahıl yemek yaparken cilt dokunmadan monofilament görselleştirme önlemek için, biz sadece test edin. Bu bilişsel çeldiriciye, aynı zamanda tüm sıçanlar konfor Benzer temel düzeyde test edilmesini sağlar. Çok dokunsal girişi daha proprioseptif nedeniyle tepkileri önlemek için, monofilament kaldırır veya pençe hareket çalışmalar dahil değildir. YUKARI-AŞAĞI YAKLAŞIM A. Klorofenoller PROSEDÜRLER <ol><li> Mevcut meyve cereafareler yiyecek ödül tanımak ve aramak çok ev kafeste l. Sıçanlar gentling veya test sürecinde herhangi bir noktada yoksun gıda olması gerekmez. </li><li> Sıçanlar onlar evde kafes içinde meyve tahıl yemek bir kez test ortamı ve prosedürlere acclimated hazırdır. Aklimasyonu her ama daha gerekli olabilir 10 dakika en az 4 seans içinde oluşur. On dakikalık seanslar sıçan oturumun sonuna kadar tok olmazlar böylece kullanılır. </li><li> Meyve tahıl üç adet test odasında sıçan yerleştirin. Ek meyve tahıl yedikleri gibi bir zaman ise bir ile iki sağlayın. Rat yemek yaparken sıçan pençesini aşağıya hareket alışık olur böylece üçüncü oturumunda, tel zemin altında el hareketleri üretir. Dördüncü oturumunda, yaklaşık kez ayaklarında, plantar yüzeyi on sunum olmak üzere toplam bir dakika için 5.18 monofilament geçerlidir. Bir naif sıçan bu alt eşik uyaranlara cevap olmamalıdır. </li><li> Uzun boyluy tüketilen tahıl parçalarını, idrar ve dışkılama, don ve damat davranışların sıklığı. Donma davranış iki şekilde oluşur: a) sıçan arka duvarına yakın genellikle yere çömeldi düşük veya sınav dönük ve hareketsiz kalır b) sıçan kafesi ortasında eğilmiş ve genellikle diş gevezelik . Donma davranışlar uzun süre devam edebilir. </li><li> Test edilmeğe hazır hale A mutedil sıçan 10 dakika boyunca yaklaşık olarak sürekli yiyecek. Bu kafes içinde kolaylıkla hareket ederler ve son tükettikten sonra çok hızlı bir şekilde meyve tahıl arayacak. Önemlisi, sıçan yeme durmayacak ya da tel döşeme veya pençe için monofilament uygulama altında el hareketleri ile avunmak. </li></ol> YUKARI-AŞAĞI YAKLAŞIM B. TEST İŞLEMLERİ <ol><li> Sıçanlar insan işitsel aralık üzerindedir sıkıntı seslenişleri üretmek. Onlar bu voc duyamıyor böylece test için bekleyen Rats ayrı bir odada tutulmalıalizations. </li><li> Von Frey Saç testi yukarı-aşağı için uygun olan omurilik yaralanması olan sıçanlarda uzuvlarıyla birlikte ağırlık taşıyan göstermek zorundadır. Monofilament uygulama saç virajlı önce pençe taşır, çünkü sıçan destek veremiyoruz Limbs güvenilir bir şekilde test edilemez. </li><li> Meyve kabuğu 2 veya 3 adet test odasında sıçan yerleştirin. Sıçanlar her VFH uygulama esnasında yemek gerekir. </li><li> HL ilk test başlatmak belirlemek için bir kalıp döndürün. Hatta numaraları sağ pençe temsil ve tek sayılar sol temsil eder. </li><li> 5.18 monofilament ile test oturumu başlayın. Çekilme tepkiler normal ve SKY sıçanlarda 4.56 den 6.10 kadar oluşabilir ve 5.18 monofilament aralık ortasına düşer. </li><li> Bir sıçan, çömelir donuyor veya yemez ise bir monofilament uygulama yapmayınız. Tester bekler, bazen bu şartları çözeceğini ve testleri devam edebilirsiniz. Sıçan app bu davranışlar ve toplam süreyi görüntüleraratus başından ertesi gün test ve tekrar test durdurmak, 20 dakikadır. Bu gerçekleştikten artabilir olarak bu davranışlar sergileme iken sıçan çıkarmayın. Sıçan, bu davranışların takviye önlemek için dokunmadan önce, bu kalıpları kıran kadar bekleyin. </li><li> Eğilir (Şekil 1A bakınız) kadar ayak pedleri arasında arka ayaklarında, L5 plantar dermatom için monofilament dokunun. Bu pürüzsüz kararlı uygulama yaklaşık bir saniye sonra cilt çıkarın almalıdır. Cilt hassasiyeti bu alanlarda çok daha düşük olduğu gibi ayak pedleri herhangi bir bölümünü dokunmaktan kaçının. Bu tek dokunmatik bir deneme teşkil etmektedir. </li><li> Sıçan hızlı monofilament uzak pençe kaldırır zaman pozitif bir tepki oluşur. Geri çekilme yanıtı monofilament uygulama ile ilişkili olduğunu teyit etmek için monofilament kaldırılır zaman başlatılması gerekir. </li><li> Mo bilincinin diğer kanıtları da hayvan izlegibi seslendirme gibi nofilament dokunmatik, aşağı, geri veya test pençe bakarak pençe, sürekli pençe çekme yalama veya kulak seğirmesi. Bilgi formunda bunları unutmayın. Bu davranışları pençe çekme meydana zaman uyaranın supraspinal algı delil olarak hizmet vermektedir. </li><li> Bir pozitif tepki yoksa, bir sonraki düşük monofilaman uygulanır. Yanıt yok (negatif) varsa, bir sonraki daha yüksek monofilament kadar hareket ettirin. (Adaptasyon) engellemek için yeniden test öncesi bazal ateş geri gelmek duyu reseptörleri için her monofilament uygulama arasında 30 saniye bekleyin. </li><li> Eğer 10 çalışma var kadar olumlu veya olumsuz yanıtlarına göre arka ayak daha yüksek veya daha düşük monofilament uygulamaya devam edilir. Sonra diğer arka ayak üzerinde tekrarlayın. (Örneğin veri bakınız). </li><li> Proprioseptif girdi tanıtılması ve pençe kaldırmadan test edilebilir en yüksek VFH 6.10 olduğunu. Pençe monof önce kaldırır, çünkü 6.45VFH ve daha büyük kullanılmamalıdırilament eğilir. 6.10 hiç tepki yoksa daha sonra bir sonraki duruşma yine 6.10 uygulanacaktır. </li><li> Bir yanıt iptal edilmeli ve aşağıdakilerden birini uyaran uygulama veya pençe çekme sırasında oluşursa deneme yeniden test edilmelidir: <ol class="lalpha"><li> Rat sürekli yemek değildir. </li><li> Sıçan imkansız çekilme yanıtı ortaya çıkarır uygulanan kuvveti bilmek yapmak, monofilament eğilme önce uzak VFH uyaran hareket eder. </li><li> Pençe dokunma uyarısına ek olarak proprioseptif sağlayan VFH (önce ya da sonra VFH bükülür ya) tarafından kaldırılmaktadır. </li></ol></li><li> Bir test seansının genellikle her iki arka ayaklarında için en az 15 dakika içinde tamamlanabilir. </li></ol> YUKARI-AŞAĞI YAKLAŞIM C. BİLGİ İŞLEM <ol><li> Başarılı bir testi, her pençe için 10 ardışık denemeler olacaktır. </li><li> Dokunsal eşik değeri &amp; g pençe çekme üretir düşük olan monofilamane; sunumlar ve monofilament 3 veya daha fazla sunum% 50 (örneğin veri, eşikler ıçine edilir bakınız) verilecektir var. </li><li> Sadece 2 toplam çalışma ile monofilament bir deneme pozitif ve bir negatif bile eşik olarak seçilir. Uyaranın Çoklu sunumlar bu kuvvete tepki desen daha iyi göstergelerdir. </li><li> Testlerden en az% 50 üzerinde olumlu yanıtları üreten herhangi bir monofilaman varsa, sıçan 6,45 bir skor verilir. Bu sıçan rastgele şansın ötesinde 6.10 en yüksek sınanabilir monofilament tespit etmedi anlamına gelir. Bu monofilament sınanabilir aralığı daha yüksek sonraki değeri temsil ettiği için 6.45 değeri verilir. </li><li> Gram yürürlüğe sağ ve sol patilerini için eşik değeri dönüştürün. Gram kuvveti değerleri von Frey kılların tedarikçisi tarafından temin edilir. . Ikili yaralanmalar veri için iki pençeleri için eşik gram kuvvet elde etmek için birlikte ortalama edilebilirtek bir puan. </li></ol> 2. Dorsal VON FREY TESTİ Bu testin amacı da tipik plantar VFH yöntemler kullanılarak test edilemez böyle zayıf motor kontrolü ile sıçanlarda dokunma hassasiyeti belirlemektir. Bu dokunma gücü caydırıcı bir yanıt üretmek için gerekli ne kadar rakamlarla. Proprioseptif uyarılara yanıt önlemek için, pençe uygulama sırasında VFH tarafından hareket edildiği çalışmalar dahil değildir. Ayrıca, VFH kayıyor veya ayak dorsal yüzeyi boyunca fırçalanmış olduğu çalışmalar dahil değildir. SIRT VON FREY TESTİ İÇİN A. Klorofenoller PROSEDÜRLER <ol><li> Temel test ve omurilik yaralanması önce 10 dakika her dört seans için Nazik sıçanlar. </li><li> Kıç (Şekil 1B) aşağıda gösterildiği gibi maruz böylece gevşek küçük bir havlu sıçan sarın. Arka pençelerinde hafifçe yüzeyi üzerine oturtulmuş bir tablo içinde sıçan yerleştirin. Aynı kullanınrahat ama sıkı sarın ve her bir rat için basılı tutun. Masanın kenarında kolunuzun Askılama sıçanlar arasında değişkenlik azaltabilir. </li><li> Test için hazır bir mutedil sıçan birkaç ardışık dakika havlu tutuluyor karşı değil, ancak yeniden-sarın sıçan 1 veya arka pençeleri her iki test sırasında 2 kat gerekebilir. </li></ol> SIRT VON FREY TESTİ İÇİN B. TEST İŞLEMLERİ <ol><li> İlk test başlatmak arka hangi uzuv belirlemek için bir kalıp döndürün. Hatta numaraları sağ pençe temsil ve tek sayılar sol temsil eder. </li><li> Gevşek maruz kıç bırakarak havlu sıçan sarın. </li><li> Dokunsal uyaran sıçan en az 10 saniye boyunca sakin ve sessiz ancak sonra uygulanır. </li><li> 4,56 VFH ile başlayarak, (Şekil 1C) müşterek için yaklaşık 1 cm proksimal birinci ve ikinci metatarsal arasında dorsal yüzeyi dik monofilaman uygulanır. Pürüzsüz, ste içinde monofilament uygulayınbir saniye aralığında ady şekilde eğilir sonra çıkarmak kadar. Bu tek dokunmatik bir deneme teşkil etmektedir. </li><li> Sıçan hızlı uyaran uzağa hareket ettirdiğinde pençe pozitif tepkisi oluşur. Hareket yönü arka bacak fleksiyonda önce genellikle posterior veya harici olduğunu. Geri çekilme yanıtı monofilament uygulama ile ilişkili olduğunu teyit etmek için monofilament kaldırılır zaman başlatılması gerekir. </li><li> 4.56 monofilament duyu "windup" önlemek ve duyu reseptörleri (adaptasyon) engellemek için yeniden test önce ateş başlangıca geri gelmek için izin vermek için uygulamalar arasında en az 30 saniye ile iki kez daha uygulayın. </li><li> Bir uyaran testi VFH kayması durumunda yeniden uygulanır ve nazikçe bir fırçalama ya da daha doğrusu sivri bir kişi daha süpürme gücü teslimat fazla yapma, cildin grazes edilmelidir. </li><li> 4.56 monofilament 2 (yani 1 ya da 0) daha az olumlu tepkiler varsa, bir sonraki büyük VFH 3 uygulanırAynı şekilde kez. </li><li> Bu şekilde, iki ya da daha pozitif yanıtları gerçekleşinceye kadar 5,88 yoluyla 4.56 den daha büyük VFHs aşamalı olarak uygulanır ya da büyük VFH ulaşılana kadar. </li><li> Pençe çekme eşiği 3 denemeler dışında en az 2 pozitif tepkiler ortaya çıkarır düşük VFH olduğunu. </li><li> Diğer pençe tekrarlayın. </li><li> Bir test seansının genellikle arka pençeleri her ikisi için de 15 dakika içinde tamamlanabilir. </li></ol> 3. Temsilcisi Sonuçlar Başarılı bir testi eklem (Şekil 1C) gelen orta plantar bölgeye (Şekil 1A) veya 1. ve 2. metatars 1 cm arasında dorsal yüzeye dik uygulanan VFH için arka ayak derhal, tempolu geri alınmasına yol açar . Bu tepkiler her arkadaki pençeyi için dokunsal eşik türetmek için sayımı edilir. Plantar VFH eşikleri elde akut SKY dorsal VFH testlerden Tactile eşikleri mükemmel bir vefa gösterdiKronik kez (Şekil 2) d. Plantar veya dorsal testlerden elde dokunsal eşikleri düşüşler dereceli SCI (Şekil 3 3,5) oluşabilir. Bu aşırı duyarlılık SKY sonrası gibi erken 7 gün olarak tezahür eder ve deney 3-4,6 süresince korunur. SCI şiddeti bir dizi pençe dokunma duyu eşikleri etkilemez iken, eşikler düşüşler daha şiddetli SCI (Şekil 3) oluşur. Önemlisi, aşağıda düzey allodini gelişimi lezyon merkez üssünde beyaz cevherde fazla% 60 bir kayıp olduğunda meydana gelen bir ya hep ya hiç yanıttır. (Şekil 4 3). Dokunsal eşikleri çürümeye ve düşük VFH kuvvetlerine yapay yanıtlar üretebilir. En az iki koşul eşik çürümesine üretebilir - hızla uyaran uygulamalar arasında yeterince uzun süre bekleyen bir alay ya da batıcı tarzda cilde VFH uygulayarak ya da değil. Emin olmakdokunma eşikleri gerçek vardır, bakım benzer bir düşük hız yaklaşım ve interstimulus aralığı en az 30 saniye olmalıdır kullanan her VFH uygulamaya alınmalıdır. Ayrıca yeme davranışı eşik çürümesi 5 azalttığını göstermiştir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3247/3247fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Plantar ve dorsal von Frey saç (VFH) test için VFH stimülasyon konumunu gösteren şematik ve fotoğraf. A) plantar VFH testi için, von Frey saç, yavaş ile orta parmak kemiği (as sıçanın sol arka ayağını plantar yüzeyi şemada kırmızı kutu ile gösterilir) yaklaşık 1 cm posterior orta plantar sıçanın sol arka ayağını dik uygulanmalıdır tutarlı hız bükülecek kadar. Fotoğrafını gösterildiği gibi dorsal VFH teknik için B ve C), sıçan gevşek cerrahi bir havlu sarılır. VFH birinci ve ikinci metatarsal approximatel arasında pençenin dorsal yüzeyi uygulanıreklem proksimalinde y 1 cm. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3247/3247fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2. Dorsal von Frey Saç duyusal eşikler standart plantar VFH ile bağlantılıdır. (N-44; Pearson katsayısı = 0,503, p &lt;0.01, r2 = 0.67). Kesik çizgiler Dorsal VFH veya plantar VFH teknikleri kullanarak allodinik hissi için kesim eşik değerinin göstermek ve Dorsal VFH testi kullanılarak SKY 7 gün sonra allodinik eşikleri plantar VFH yöntemlerle belirlenen kronik aşağıda düzey allodini tahmin olduğunu göstermektedir. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3247/3247fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3. Erken dorsal von Frey Saç duyu eşikleri daha sonra timepoints az yaralanma şiddeti karşısında allodinik ve non-allodinik dokunma hassasiyeti tahmin. Karşılaştırılabilir duyusal eşikler 7 gün sonrası SKY Dorsal VFH ve 28 gün sonrası SKY plantar VFH önlemler arasında oluştu. Olağanüstü bir benzerlik için oluştu önemli allodini ile SKY geniş, orta şiddetli SCI (diğer tüm gruplara göre p &lt;.05 1.1 mm deplasman) kaydedildi. <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3247/3247fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4. SKY sonrasında 6 hafta sıçanın sol arka ayağını allodini gösteren laminektomi (hiçbir SCI) alan sıçan ve SKY grupların yüzdesi. Allodini sadece dokunma uyarısına orta veya şiddetli SCI (OSU ESCID cihaz 0.9, 1.1, 1.25, 1.3 mm kablo deplasmanları) hafif SKY ratlarda (0.3, 0.5, 0.7 mm omurilik deplasmanları) sergilenen, normal süre ve yanıtları ile sıçanlarda görüldü. Temsilcisi koronal omurilik bölümleri laminektomi için lezyon merkez üssü (yaralanmamış kontrolü) de miyelin için boyanan, hafif (0.5 mm deplasman), orta (1.1 mm deplasman) ve ağır (1.3 mm deplasman) spinal kord kontüzyonları aksonal derecesini göstermek için dahil edilmiştir Bu aşırı duyarlılık ile ilişkili olduğu koruyucu. (Ölçek çubuğu = 0,5 mm). k "&gt; <img alt="Şekil 5" src="/files/ftp_upload/3247/3247fig5.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 5,"> Şekil 5. Yukarı-aşağı von Frey saç testi için örnek bir veri sayfası. Saç değeri ve sonuç (pozitif veya negatif) her bir deneme için kaydedilmektedir. Test supraspinal farkındalık Endikasyonları belirtilmiştir. Testin sonunda her bir saç değerde yanıtları sayımı edilir. Örneğin veri için seçilen eşik değerini daire edilir.

<ol><li>Cruz-Almeida, Y., Felix, E. R., Martinez-Arizala, A., Widerstrom-Noga, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pain+symptom+profiles+in+persons+with+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Pain+Med%22%5BJournal%5D)">Pain symptom profiles in persons with spinal cord injury.</a> Pain Med. 10, 1246-1259 (2009).</li>
<li>Hulsebosch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+discovery+to+clinical+trials%3A+treatment+strategies+for+central+neuropathic+pain+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Pharm.+Des%22%5BJournal%5D)">From discovery to clinical trials: treatment strategies for central neuropathic pain after spinal cord injury.</a> Curr. Pharm. Des. 11, 1411-1420 (2005).</li>
<li>Kloos, A. D., Fisher, L. C., Detloff, M. R., Hassenzahl, D. L., Basso, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stepwise+motor+and+all-or-none+sensory+recovery+is+associated+with+nonlinear+sparing+after+incremental+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Stepwise motor and all-or-none sensory recovery is associated with nonlinear sparing after incremental spinal cord injury in rats.</a> Exp. Neurol. 191, 251-265 (2005).</li>
<li>Detloff, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remote+activation+of+microglia+and+pro-inflammatory+cytokines+predict+the+onset+and+severity+of+below-level+neuropathic+pain+after+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Remote activation of microglia and pro-inflammatory cytokines predict the onset and severity of below-level neuropathic pain after spinal cord injury in rats.</a> Exp. Neurol. 212, 337-347 (2008).</li>
<li>Detloff, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validity+of+acute+and+chronic+tactile+sensory+testing+after+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Validity of acute and chronic tactile sensory testing after spinal cord injury in rats.</a> Exp. Neurol. 225, 366-376 (2010).</li>
<li>Hutchinson, K. J., Gomez-Pinilla, F., Crowe, M. J., Ying, Z., Basso, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three+exercise+paradigms+differentially+improve+sensory+recovery+after+spinal+cord+contusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Three exercise paradigms differentially improve sensory recovery after spinal cord contusion in rats.</a> Brain. 127, 1403-1414 (2004).</li>
<li>Carlton, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+and+central+sensitization+in+remote+spinal+cord+regions+contribute+to+central+neuropathic+pain+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Peripheral and central sensitization in remote spinal cord regions contribute to central neuropathic pain after spinal cord injury.</a> Pain. 147, 265-276 (2009).</li>
<li>Lindsey, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+analysis+of+changes+in+sensory+thresholds+to+mild+tactile+and+cold+stimuli+after+experimental+spinal+cord+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurorehabil.+Neural+Repair%22%5BJournal%5D)">An analysis of changes in sensory thresholds to mild tactile and cold stimuli after experimental spinal cord injury in the rat.</a> Neurorehabil. Neural Repair. 14, 287-300 (2000).</li>
<li>Basso, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+testing+after+spinal+cord+injury%3A+congruities%2C+complexities%2C+and+controversies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Behavioral testing after spinal cord injury: congruities, complexities, and controversies.</a> J. Neurotrauma. 21, 395-404 (2004).</li>
<li>Langford, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312, 1967-1970 (2006).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

VFH test yöntemleri hassas ve sıçan SKY modellerinde kullanılmak üzere geçerli olan iki test paradigmaları temsil sunuldu. Önemlisi, dorsal VFH testi fareler kendi kıç üstünde duramayabilirsiniz zaman akut orta torasik SKY sonrasında arka pençelerinin dokunsal kurtarma değerlendirilmesi için oluşturuldu. Sıçanlarda kendi ağırlığı destek ve servikal SCI&#39;de arka bacak için yeteneği geri kazanmak Bu test paradigma da kullanılabilir. İki paradigma burada her bir arka pençenin dokunsal eşik b...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Semmes-Weinstein monofilament </td><td> Co Stoelting </td><td> 58011 </td><td></td></tr><tr><td> Balık Damızlık Kutusu </td><td> Akvaryum Tedarik Mağaza </td><td></td><td> Delik tahıl teslimat için yan açılmış </td></tr><tr><td> Artmış hasır (1/4 &quot;X 1/4&quot; grid) </td><td> Donanım Mağaza </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Elastik bir yerde balık damızlık kutusu tutmak için </td><td> El Sanatları Mağazası </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Şekerli Tahıl </td><td> Bakkal </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cerrahi Huck Havlu 16 &quot;x 23&quot; </td><td> Tıbbi Sarf Malzeme Mağazası </td><td></td><td></td></tr></tbody></table><pclass = &quot;jove_content&quot;&gt;

sıçanlarda spinal kord yaralanma sonrası akut ve kronik dokunsal duyu testi

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal kord yaralanması (SKY) allodini 1-8 neden duyu sistemleri bozar. Duyarlı allodini hücresel ve moleküler nedenleri ve sıçan SKY modellerinde geçerli duyusal test belirlemek için gereklidir. Bu standart metotlar laboratuarlar arasında uygulamaya henüz böylece Ancak, yakın zamana kadar, tek bir test yaklaşımı SKY için valide edilmiştir. Ek olarak, mevcut test yöntemleri akut uygulanamamıştır veya ağır motor bozukluk mevcut olduğunda, SCI indüklenen allodynia 3 geliştirilmesi çalışmaları önlenmesi. Burada SKY 4-5 sonra dokunsal duyu eşikleri değişiklikleri ölçmek von Frey Saç (VFH) monofilamentler kullanılarak iki valide duyusal test yöntemleri sunuyoruz. Bir testi kronik 5 test farklı SCI şiddeti arasında yüksek duyarlılık ve özgüllük gösteren köklü Yukarı-Aşağı testtir. Diğer test SKY sonra akut olarak uygulanabilir yeni geliştirilmiş dorsal VFH testi olduğundallodynia önce motor iyileşme 4-5, geliştirir. Bükülecek kadar arka ayaklarında, cilde dokunduğunda Her VFH monofilament kalibre edilmiş bir kuvvet uygular. Yukarı-aşağı yönteminde, yüksek veya düşük güçlerin alternatif VFHs fleksör çekilmesi eşikleri belirginleştiren plantar L5 dermatomunda kullanılır. Çekme kuvveti daha düşük VFHs çekilmesi geçene kadar kullanılır sonra oluşana dek gittikçe daha yüksek güçler uygulanır. Dokunsal eşik uyaranların% 50 geri çekilme ortaya çıkarmak için gerekli kuvvet yansıtır. Sıçan uzman tarafından desteklenirken yeni bir test için, her VFH pençenin dorsal L5 dermatomunda uygulanır. VFH stimülasyon belirli bir kuvvet az 3 uygulamaların en az 2 pençe çekme üretir kadar yürürlükte artan sırasında oluşur. Dokunsal duyu eşik zaman çekilmesi% 66 ortaya çıkartılması için en düşük güç. Aklimasyon, test ve puanlama işlemleri açıklanmıştır. Bir tekrar ve tipik çalışma gerektiren anormal denemeler tanımlandığı gibidir. Hayvan kullanımı wgibi Ohio Devlet Üniversitesi Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylandı.

Biz ratlarda spinal kord yaralanmasının akut veya kronik dönemlerde iki dokunma duyusal test yöntemleri açıklanmaktadır. Bu onaylanmış prosedürler allodini gibi duyumların geliştirme ve bakım algılayabilir.

Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi

Omurilik yaralanması (SCI), allodiniye neden olarak duyusal sistemleri bozar1-8. Allodini'nin hücresel ve moleküler nedenlerini belirlemek için hassas ve geçerli duyusal...

Bu prosedürün genel amacı, iki farklı Von Fry test yöntemi kullanarak spinal kord yaralanmasını takip eden akut ve kronik zaman noktalarında taktil duyudaki değişimleri nicelleştirmektir. Bu, öncelikle sıçanların, yukarı-aşağı von fry testi için bir pleksiglas hazneye ve dorsal von fry testi için bir havluyla sabitlenmeye alıştırılmasıyla gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, von Fry monofilamanları kullanarak arka pençenin plantar veya dorsal yüzeyine taktil stimülasyon uygulamaktır.Sıçanın patisini monofilamentten hızla yukarı kaldırması durumunda pozitif yanıt oluşur. Prosedürün son adımı, uygulanan her bir kuvvete verilen pozitif yanıtların veya pati geri çekilmelerinin sayısını belirleyerek arka patinin taktil duyusal eşiğini saptamaktır. Sonuç olarak, yukarı, aşağı ve dorsal von fry test tekniklerinin her birinin, orta ila şiddetli omurilik yaralanmasından sonra meydana gelen taktil eşik düşüşlerine karşı duyarlı olduğu gösterilebilir.Bugün, omurilik yaralanması olan sıçanların patilerindeki dokunma duyusunu test etmek için iki tekniği göstereceğiz. Bu teknikler, yıpratıcı ağrısı ve omurilik yaralanması olan kişiler için gelecekteki tedavi yöntemlerini belirlememize yardımcı olacaktır. Omurilik yaralanması olan kişilerin en az üçte ikisi ilerleyen dönemde şiddetli ve yıpratıcı nöropatik ağrılar geliştirmektedir.Araştırmacılar olarak, gelecekteki tedaviler için hücresel ve moleküler mekanizmaları belirleyebilmek adına doğru, hassas ve geçerli davranışsal test teknikleri kullanmamız önemlidir. Bu yöntem, orta torasik spinal kord kontüzyon yaralanması sonrası duyusal iyileşme hakkında bilgi sağlayabilmesinin yanı sıra, dokunsal duyumu etkileyen diğer patoloji ve yaralanma türleri için de faydalıdır. Bu testin görsel olarak gösterilmesi kritik öneme sahiptir çünkü duyum değerlendirmesi, sıçanın pati çekme yanıtının yorumlanmasına dayanmaktadır.Yeni kullanıcılar için, yanıtın propriyoseptif veya görsel ipuçlarından ziyade gerçekten taktil bir stimülusa bağlı olup olmadığını belirlemek zor olabilir. Bu videoyu izledikten sonra, hayvanları nazikçe test ortamına alıştırabileceksiniz. Von Fry monofilamanlarını arka patinin dorsal veya plantar yüzeyine uygulayabilecek ve pozitif bir pati geri çekme yanıtını yorumlayabileceksiniz.Ve son olarak, hayvanlardaki dokunma duyusu eşiğini belirleyin. İlk olarak, sıçan meyveli gevreği tanısın ve gıda ödülünü arasın diye gevreği kendi kafesinde sunun. Sıçan, kendi kafesinde gevrek yemeye alıştığında, sıçanı üç adet daha meyveli gevrekle birlikte test odasına yerleştirin.Meyveli gevrek parçaları, tüketildikçe ek olarak verin. Teste hazır, uysal bir sıçan yaklaşık 10 dakika boyunca neredeyse kesintisiz şekilde yemek yiyecek ve tel taban altındaki el hareketlerinden veya pençeye uygulanan eşik altı monofilaman uygulamasından dikkatini dağıtmayacaktır. Uysal bir sıçanı, iki veya üç parça meyveli gevrek ile birlikte test haznesine yerleştirin.Sıçan yemek yerken, çift sayıların sağ patiyi ve tek sayıların sol patiyi temsil edecek şekilde, hangi arka ekstremiteyle teste başlanacağını belirlemek için zar atın. Test oturumuna 5.18 monofilamanı kullanarak başlayın. Sıçan donma davranışı sergilerse veya yemek yemezse, sıçanın sakinleşmesini bekleyin.Test aşamasına geçmeden önce, monofilamanı arka pençenin ayak yastıkları arasındaki L5 plantar dermatomuna, bükülene kadar temas ettirin. Monofilaman geri çekilmeden önce bu pürüzsüz ve sabit uygulama yaklaşık bir saniye sürmelidir. Sıçan pençesini hızla monofilamandan uzaklaştırarak kaldırdığında pozitif yanıt oluşmuş sayılır.Vokalizasyon, test edilen patiye bakma veya yalama ya da kulakların seyirmesi gibi monofilaman temasına dair farkındalığın diğer kanıtlarını gözlemleyin ve kaydedin. Pozitif bir yanıt alınırsa, bir alt seviyedeki monofilamanı uygulayın. Yanıt alınmazsa, sensory reseptörlerin yeniden test edilmeden önce bazal ateşleme seviyesine dönmesi için her monofilaman uygulaması arasında 30 saniye bekleyerek bir üst seviyedeki monofilamana geçin.Kılın pençeyi fiziksel olarak yerinden oynattığı geçersiz denemelere karşı dikkatli olun. Bu tür denemelerde kıl hem taktil hem de propriyoseptif geri bildirim sağlar ve bu veriler sonraki analizlerden hariç tutulmalıdır.Pozitif veya negatif yanıtlara dayanarak arka patiye daha yüksek veya daha düşük monofilamanlar uygulamaya devam edin. Toplam 10 deneme için, arka kısımları açıkta kalacak şekilde bir sıçanı küçük bir havluya gevşekçe sarın. Sıçanı, arka patileri yüzeye hafifçe değecek şekilde bir masa üzerine yerleştirin.Ön kolunuzu masa kenarına yaslamak sıçanlar arasındaki değişkenliği azaltabilir; ancak test için hazır olan uysal bir sıçan, havluyla birkaç dakika boyunca tutulmaya direnç göstermeyecektir; her iki arka patinin testi sırasında sıçanı yeniden sarmanız gerekebilir. Tekrar, hangi arka uzuvdan teste başlanacağını belirlemek için bir zar atın. İlk olarak, uysal bir sıçanı arka kısımları açıkta kalacak şekilde havluya gevşekçe sarın.Sıçan en az 10 saniye boyunca sakinleştikten sonra, 4,56 von Fry kılıntısını, birinci ve ikinci metatarsal arasındaki dorsal yüzeye, eklemin yaklaşık bir santimetre proksimaline, bükülene kadar bir saniyelik bir süre zarfında pürüzsüz ve sabit bir şekilde dik olarak uygulayın. Sıçan, arka ekstremiteyi bükmeden önce patiyi hızla posteriora veya eksterne doğru hareket ettirdiğinde pozitif bir yanıt oluşur. Monofilamente yanıt olarak arka patide herhangi bir hareket olmadığında veya hareket von Fry kılıntısı uygulamasıyla doğrudan ilişkili olmadığında ise negatif bir yanıt oluşur.Adaptasyonları önlemek amacıyla, 4.56 monofilamentini uygulamalar arasında en az 30 saniye ara vererek iki kez daha uygulayın. 4.56 monofilamentine ikişten az pozitif yanıt alınırsa, bir sonraki en büyük monofilamenti aynı şekilde uygulayın. Bir monofilament, üç denemenin en az ikisinde pozitif yanıt aldığında test tamamlanmış olur. Burada, her bir arka pençe için dokunsal eşikleri belirlemek amacıyla her iki von Fry kılı testi yaklaşımından gelen yanıtlar toplanır. Akut SCI sıçanlarla yapılan dorsal von fry kılı testlerinden elde edilen dokunsal eşikler, up down von fry ile mükemmel uyum göstermektedir.Kronik sürelerde elde edilen kıl eşikleri, dereceli SCI modellerinde plantar veya dorsal testlerden elde edilen taktil eşiklerdeki düşüşlerle birlikte görülür; bu hipersensitivite, en şiddetli SCI farelerinde SCI sonrası erken dönemde, yedinci günde ortaya çıkar ve deney süresince devam eder. Önemle belirtmek gerekir ki, seviye altı allodininin gelişimi, lezyon merkezindeki beyaz maddenin %60'ından fazlasının kaybı durumunda gerçekleşen "hep ya da hiç" şeklinde bir yanıttır. Bu teknik uzmanlaşıldığında, uygun şekilde uygulandığında fare başına yaklaşık 15 ila 20 dakikada tamamlanabilir.Bu tekniklerin doğru şekilde uygulanabilmesi için, davranış faktörlerinde değişkenliğe yol açabilecek çevresel karıştırıcı değişkenlerin kontrol altına alınması önemlidir; örneğin testlerin günün aynı saatinde ve sıcaklık ile nemi kontrol edilen aynı odada gerçekleştirilmesi değişkenliği minimize etmeye yardımcı olacaktır. Ek olarak, sıçanlar ultrasonik olarak vokalize olduklarından, test zamanları gelene kadar onları test odasının dışında tutmamız önemlidir. Ayrıca, duyusal eşikleri stabilize etmek için şekerli gevrek veriyoruz.Tahıl verildiğinde eşik değerlerinin stabil kaldığını, tahıl verilmediği duruma göre daha stabil olduğunu saptadık. Bu davranışın, korku ve duygusal merkezlerini aktive ederek sıçanlarda hipervijilans ve katastrofize etme davranışları oluşturan beklenti davranışlarından ve ağrı tehdidinden kaynaklandığı düşünülmektedir.

acute-chronic-tactile-sensory-testing-after-spinal-cord-injury

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Cerrahi basitlik ve sağlam davranışsal sonuçları nedeniyle, siyatik sinirin kronik daralma nöropatik ağrı seçkin hayvan modelleri biridir. Ameliyat sonrası 24 saat içinde, ağrı aşırı duyarlılık kurulan ve kantitatif bir von Frey aesthesiometer (mekanik test) ve plantar analjezi metre (termal testi) kullanılarak ölçülebilir.

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Ciddi omurilik yaralanması bir kontüzyon modeli açıklanmıştır. Ayrıntılı ameliyat öncesi, ameliyat ve ameliyat sonrası adımları tutarlı bir model elde etmek açıklanmıştır.

Sıçanlarda Şiddetli Spinal Kord Yaralanması bir bere modeli

Kemirgenlerde servikal spinal kord yaralanması sonrası ön ayakları fonksiyonu değerlendirmek için üç yeni davranış testleri (ön ayakları adım münavebe, postural instabilite testi, makarna işleme testi) tarif edilmiştir.

Roman Görevleri kullanılarak tek taraflı Servikal SKY sonra ön ayakları Fonksiyon değerlendirilmesi: Ekstremite Adım münavebe, postural İstikrarsızlık ve Pasta Taşıma

Omurilik yaralanması modelleri yüksek oranda tekrarlanabilir olmalıdır. Omurilik yaralanmasının kalibre edilmiş forseps kompresyon modelinin, murin omuriliğinde tekrarlanabilir yaralanmalar oluşturmak için kullanımı kolay bir cerrahi yöntem olduğunu gösterdik.

Omurilik Sıkıştırma Yaralanma Kalibre Forseps Modeli

Burada erişkin sıçanlarda9'uncu torasik düzeyde güvenilir bir spinal kord lateral hemiksiyon (HX) üretmek için yapılan cerrahi prosedürleri ve böyle bir tek taraflı yaralanma sonrası asimetrik açıkları tespit etmek için tasarlanmış nörodavranışsal değerlendirmeleri açıklıyoruz.

Erişkin Sıçanlarda Spinal Kord Lateral Hemisite ve Asimetrik Davranış Değerlendirmeleri

Bu iletişim kuralı modelimiz lokomotor koşu bandı etkinlik tabanlı eğitim için rats Medulla Spinalis Yaralanmalarında (SCI) ile gösterir. Hem dört ayaklı ve salt forelimb gruplarına ek olarak iki farklı tür denetim sigara eğitimli grup içerir. Müfettişler eğitim etkileri bu iletişim kuralını kullanan SCI fareler üzerinde değerlendirmek edebiliyoruz.

Etkinlik tabanlı eğitim omurilik ile bir koşu bandı üzerinde Wistar fareler yaralı

Sıçan torasik spinal hemiseksiyon lokomotor kurtarma ve tedavi etkinliğini nöral mekanizmaları araştırmak için tek taraflı omurilik hasarı değerli ve tekrarlanabilir bir modeldir. Bu makalede, hemiseksiyon prosedürü gerçekleştirmek ve bir açık alan arenada lokomotor performansını değerlendirmek için ayrıntılı bir adım adım kılavuz içerir.

Sıçan içinde torasik omurilik Hemiseksiyon cerrahisi ve açık saha lokomotor değerlendirmesi

Otomatik yürüyüş analizi periferik sinir yaralanması ve omurilik kontüzyonu yaralanması kemirgen modellerinde fonksiyonel iyileşme değerlendirmek için uygun bir araçtır. Çeşitli deneysel modellerde lokomotor fonksiyonu değerlendirmek için tek bir kurulum gerektirmesine gerek kalırken, hayvanların titiz sert ve yumuşak gereç lerin ayarlanmave eğitimi son derece önemlidir.

Periferik Sinir veya Spinal Kord Kontüzyonu Yaralanması olan Kemirgenlerde Fonksiyonel İyileşmeyi Değerlendirmek için Otomatik Yürüyüş Analizi

Burada, sıçanlarda laminektomiyi ortadan kaldıran açık omurilik yaralanmasını modelleyen yeni ve hızlı bir teknik tanımlanmıştır. Lateral hemiseksiyon mikroskopla görüntülenirken yapılır. Teknik çok yönlüdür ve diğer hayvanların omuriliğinin servikal, torasik ve bel bölgelerinde de kullanılabilir.

Sıçanlarda Açık Omurilik Yaralanmalarını Modellemek için Minimal İnvaziv, Hızlı Omurilik Lateral Hemikesim Tekniği

Sırt ağrısının önlenmesi ve yönetimi için yeni terapötik müdahaleler geliştirmek için, bu tedavilerin mekanizmalarını ve etkinliğini translasyonel bir bakış açısıyla incelemek için hayvan modellerine ihtiyaç vardır. Mevcut protokol, sıçandaki mekanik duyarlılığı değerlendirmek için standartlaştırılmış bir yöntem olan BMS testini açıklamaktadır.

Kronik Sırt Ağrısının Mekanik Araştırılması için Sıçanda Geri Mekanik Duyarlılık Değerlendirmesi

Burada sunulan, fareler için değişen derecelerde omurilik yaralanması kontüzyon modellerini doğru bir şekilde üretebilen yeni bir otomatik omurilik yaralanması kontüzyon cihazıdır.

Farelerde Kontüsif Omurilik Yaralanması Modeli için Otomatik Çarpma Tertibatı

Öğrenin, sıçanlarda spinal kord yaralanması sonrası akut ve kronik dokunsal duyu değişikliklerini iki farklı Von Fry test yöntemiyle nasıl nicelendireceğinizi. Bu doğrulanmış yöntemler allodini benzeri duyuları güvenilir şekilde tespit eder.

Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi

Daha fazla video keşfet