EKG, Nabız, Core Vücut Sıcaklığı ve Serbest hareket eden Laboratuar Fare Etkinlik Veri Verimli Radiotelemetry Vericiler implantasyonu

Bu prosedürün genel amacı, çekirdek vücut sıcaklığının, lokomotor aktivitelerin ve serbest hareket eden bağlı olmayan farelerde kalp atış hızı, kalp atış hızı değişkenliği ve PQ ve QT aralıklarının oluşturulabileceği biyo potansiyelin sürekli ölçümleri için kullanılan bir telemetri vericisini implante etmektir. Bu, ilk olarak fareyi ameliyattan birkaç gün önce implantasyon için hazırlayarak gerçekleştirilir. Daha sonra, çalışma ortamı cihazları ve telemetrik verici hazırlanır.

Daha sonra telemetrik verici cerrahi olarak fareye implante edilir. Son olarak, hayvanın iyileşmesini ve hayatta kalmasını garanti etmek için hayvana ameliyat sonrası bakım uygulanır. Sonuç olarak, sonuçlar, manifold biyomedikal deneylerin ve genetik modifikasyonların kısa ve uzun vadeli kalp atış hızı, kalp atış hızı değişkenliği, PQ ve QT aralıkları, çekirdek vücut sıcaklığı ve lokomotor aktivitesi üzerindeki etkisini ve ayrıca telemetrik ölçümler yoluyla bu parametrelerin sirkadiyen ritmi üzerindeki etkisini göstermektedir.

Telemetrinin kısıtlama, bağlı ve hatta ize edilmiş hayvanlarda yapılan ölçümler gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, sınırsız, serbestçe hareket eden farelerde kısa ve hatta uzun vadeli zaman dilimlerinde doğru verilerin elde edilebilmesidir İmplantasyon gününde, telemetrik verici, aseptik koşullar altında dezenfekte edilmiş bir tezgah üzerinde laminer akış başlığı altında hazırlanır, otoklav aletleri ve sterilize edilmiş malzemeler kullanarak. Başlamak için, vericileri steril paketlerinden çıkarın ve makas kullanarak uçları farenin boyutuna uygun bir uzunlukta kısaltın. Çoğu yetişkin fare için, kırmızı elektrot yaklaşık 42 milimetreye ve beyaz veya renksiz elektrot yaklaşık 55 milimetre uzunluğa kadar kısaltılabilir.

Kırmızı elektrotun distal kısmından yaklaşık 20 milimetre ve beyaz veya renksiz elektrottan 10 milimetre yalıtım borusunu çıkarın. Her elektrotun distal kısımlarını, uçları ince ipek dikişlerle sabitleyerek bir halka haline getirin. Vericiyi, implantasyondan bir gün önce implantasyona hazır, ılık, steril tuzlu suya yerleştirin.

Fareyi %8 cevo flor içeren bir perspeks odasında uyuşturarak hazırlayın. Yazma refleksini kaybettiğinde, %3 ila %4 cevo flor içeren bir burun konisi takın. Kırpmak. Ön boyun ve karın bölgesindeki saçları tıraş edin.

Hayvanın uyanmasına ve ertesi gün analjezi uyguladıktan ve fareyi uyuşturduktan sonra ev kafesine geri dönmesine izin verin, cerrahi alanda ılık banyo ısıtmalı bir yüzeye aktarın. Farenin gözlerine merhem sürün ve bir burun maskesi ve% üç ila 4 seva flor kullanarak anesteziyi koruyun. Daha fazla ayrıntı için lütfen yazılı protokole bakın.

Dolular, farenin ön boynunun ve karın bölgesinin daha önce traş edilmiş cildini dezenfekte eder. Daha sonra alt göğüs kafesinden karnın orta hattı boyunca deride bir ila 1,5 santimetre uzunluğunda bir kesi yapın. Ön boynunda uzunlamasına yönde küçük bir kesi yapın ve vericinin negatif ucunu göğüs kafesinden boyuna deri altından tünelleyin.

Elektrotun tel halkasının sabitlenmesi için yer açmak üzere cildi ve alttaki dokuyu hazırlayın. İki ince ipek dikiş kullanarak trakeanın sağında bulunan kaslar arasındaki tel halkayı sabitleyin. Daha sonra boyundaki yarayı altı çizgi O Vicryl sütürlü ile katmanlar halinde kapatın.

Lan alba'da karın duvarını açın ve telemetrik vericiyi karın boşluğuna yerleştirin. Pozitif elektrotun tel halkasını, sol üst karın bölgesinde karaciğer ile diyafram arasında kalacak şekilde ipek dikişlerle ksifoid prosese dikin. Enfeksiyonu önlemek ve sıvı sağlamak için, karın boşluğuna bir sul doin ve trimetoprim ve salin karışımı enjekte edin ve deri altından ağrı tedavisi için karın derisini kapatın.

Kilogram bup başına 0.1 miligram uygulayın, ine ve hayvanın tezgahın ılık yüzeyinde iki saat boyunca iyileşmesine izin verin. Hayvanlar yakından izlenir ve yazılı protokolde belirtildiği gibi ameliyatı takiben dört ila 10 gün boyunca iyileşme desteği sağlanır. Ameliyattan 10 gün sonra, hayvanları en az dört haftalık normal sosyal etkileşim için fare kolonisine geri koyun.

Veri toplamayı başlatmak için hayvana bir mıknatısla dokunun. Bu, vericiyi açacaktır. Bir veri değişim matrisi, belirli bir süre boyunca düzenli aralıklarla veya sürekli olarak veri sinyallerini toplar ve bilgisayara gönderir ve verileri bilgisayarın sabit diskine kaydeder, çünkü yayılan sinyalin menzili ve kalitesi büyük ölçüde kafesin ve çevresindeki ekipmanın malzeme bileşimine bağlıdır.

Alıcı plakayı hayvana mümkün olduğunca yakın, örneğin hayvanın kafesinin altına yerleştirin. Bir veya daha fazla hayvandan gelen sinyallerin algılanmasını, toplanmasını, analizini ve grafiksel sunumunu koordine etmek için bir RT yazılımı olan veri arayışını kullanın. Sürekli örnekleme modunda gerçek zamanlı ölçümler yaparak kayıt ve veri iletim sisteminin konfigürasyonunun doğru olduğunu kontrol edin.

Veriler toplandıktan ve saklandıktan sonra, analiz programı kullanılarak kalp atış hızı, kalp atış hızı değişkenliği, vücut ısısı ve lokomotor aktivite gibi çeşitli farklı parametreler için çizim listesi ve analiz edildikten sonra, bilinçli bir fareden alınan bir derivasyonlu EKG eğrilerinin ham bir çıktısı ve aynı hayvanın cevo flor ile inhalasyon anestezisi altında burada gösterilmektedir. Kalp atış hızı, telemetri sistemi tarafından otomatik olarak hesaplanır. Anestezi altında kaydedilen üç saniyelik sekans, dakikada 440 atışlık bir kalp atış hızını gösterir.

Bilinçli farede kaydedilen eğri, dakikada 660 atışlık bir kalp atış hızını gösterir ve bu da kalp atış hızı için beklenen aralığa girer. Burada tımar etme veya yemek yeme gibi orta derecede fiziksel aktiviteler sırasında, kalp atış hızı, çekirdek vücut ısısı ve lokomotor aktivite, farklı vücut koşullarına sahip üç fareden, herhangi bir rahatsızlık olmadan ev kafeslerinde ayrı ayrı barındırılırken ölçüldü. Kalp atış hızı her beş dakikada bir 30 saniye boyunca kaydedildi.

Çekirdek vücut sıcaklığından her beş dakikada bir 10 saniye süreyle numune alındı ve lokomotor aktivite sürekli olarak kaydedildi ve beş dakikalık aralıklarla saklandı. Sağlıklı fare, karanlık faz sırasında fizyolojik değerlerde ve lokomotor aktivite davranışında normal artışlarla net bir sirkadiyen ritim gösterir. Buna karşılık, büyük bir ameliyattan sonra, özellikle gün ışığı fazında kalp atış hızı artar ve lokomotor aktivite baskılanır.

Üçüncü fare kronik tümör hastalığından muzdaripti. Kalp atış hızı ve çekirdek vücut sıcaklığının sirkadiyen ritmi düzleşmiş görünür ve lokomotor aktivite azalır. Bu deneyde, 16 fareye 50 dakika isof flor veya cevo flor, anestezi uygulandı ve anesteziklerin kalp atış hızı, çekirdek vücut sıcaklığı ve lokomotor aktivite üzerindeki uzun vadeli etkisi telemetrik ortalamalarla karşılaştırıldı. Her hayvan için değerler gece ve gündüz fazları için ayrı ayrı hesaplandı.

Anesteziden önceki üç gün için normal değerler hesaplandı. Delta değerleri, karanlık ve aydınlık değerlerin normal değerlerle karşılaştırılmasıdır. Bu prosedürü denerken 35 ila 45 dakika içinde ustalaşan cerrahi yapılabildikten sonra, yeterli anesteziyi sürdürmek, etkili analjezikler uygulamak, enfeksiyonları önlemek ve sıvı sağlamak için akılda tutulması önemlidir.

Bu videoyu izledikten sonra, bu telemetrik vericinin nasıl implante edileceğini ve laboratuvar farelerinde kalp atış hızı veya soğuk vücut ısısı gibi fizyolojik değerlerin güvenilir ölçümlerinin nasıl elde edileceğini iyi anlamış olmalısınız.