Name: T-labirent Zorla Değişim ve Çalışma ve Fareler Referans Bellek değerlendirilmesi için sağ-sol Ayrımcılık Görevler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 17 min 45 s
Description: Öğrenin farelerde çalışma ve referans belleği değerlendirmek için otomatik T-labirent test protokolünü. Bu yöntem, davranışsal nörobilim araştırmalarında bilişsel fonksiyonları güvenilir şekilde ölçer.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz davranış analizi için gelişmekte Görüntü TM adlı programda yardım Kazuo Nakanishi teşekkür ederim. Bu araştırma Keşif Araştırmaları için Grant-in-Aid (19653081), Grant-Aid Bilimsel Araştırma (B) (21.300.121), Yenilikçi Alanları Bilimsel Araştırma Grant-in-Aid (Kapsamlı Beyin Bilim Ağı) ile desteklenmiştir Milli Eğitim Bakanlığı, Bilim, Japonya Spor ve Kültür, Nöroinformatik Japonya Merkezi (NIJC) hibe ve CREST ve Japonya Bilim ve Teknoloji Ajansı (JST) ve KUŞ hibeler.

1. Aparatı ayarı <ol><li> Otomatik modifiye T-labirent aparatı (O'Hara &amp; Co, Tokyo, Japonya) 25 cm yüksekliğinde duvarlar 1 ile beyaz plastik pist inşa edilmiştir. Labirent otomatik olarak aşağı doğru açılabilir sürgülü kapılar (s3, a1, a2, p1, p2, s1, s2) (Şekil 1) 6 alanlar (A1, A2 S2, S1, P1, P2) içine kapalı bölümlenmiş. T kök S2 alanda oluşan (13 x 24 cm) ve T kollar alanları A1 ve A2 (11.5 x 20.5 cm) ihtiva edilir. Alanların P1 ve P2 başlangıç ​​bölmesi (alanı S1) ile kol (alanı A1 veya A2) için bağlanma pasajlar içermektedir. </li><li> Her kolun sonunda otomatik bir ödül olarak bir sükroz pelet (20 mg, Formula USA, IN 5 TUT, TestDiet, Richmond) sağlayan bir pelet dağıtıcı ile donatılmıştır. Fare ile pelet emme kızılötesi sensörü tarafından tespit edilir ve otomatik olarak, bir bilgisayar tarafından kaydedilmektedir. </li><li> Charge Coupled Device (CCD) kamera farenin &amp; # izlemek için cihaz üzerine monte edilmişx2019; davranış ve aparatları ve fare görüntüleri bilgisayar tarafından yakalanır. </li><li> Ses geçirmez bir odada (170 x 210 x 200 cm, O'Hara &amp; Co, Tokyo, Japonya) mümkün olduğu kadar T-labirent aparat yerleştirin. Cihazı laboratuvarımızda 100 lux floresan ışıkları ile aydınlanıyor. Işık yoğunluğu bu lux seviyesi daha zayıf olabilir ama bütün bu deneyler sırasında sabit bir seviyede tutulmalıdır. </li></ol> 2. Hayvan hazırlığı <ol><li> Evi sıcaklık kontrollü bir odaya kafes başına iki dört fareler hakkında (23 ± 2 ° C) rehberlik ve yerel Hayvan Bakımı tarafından kurulmuş protokollere göre, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsü (AM 7:00 'de ışıklar) ile ve Komite kullanın. </li><li> İlk duruşma başlamadan önce konut odadan ses yalıtımlı odaya en az 30 dakika fareler içeren tüm kafesleri aktarın. </li><li> Tüm deneyler her zaman aynı zaman diliminde (örneğin, 9:00 6:00 PM arası) sırasında uygulanmalıdır. Test sırasında PEgörev performansını bir gün içinde zaman potansiyel bir etkisi olabilir bu yana beklenilirlik, her genotip veya deneysel durumundan konular, dengeli amacıyla test edilmelidir. </li></ol> 3. Gıda kısıtlama <ol><li> Denemenin başında kadar, farelere ücretsiz standart pelet yemi erişim ve su verin. </li><li> Öncesi eğitim 1 hafta önce itibaren, günlük fareler tartmak ve deney boyunca kendi özgür-beslenme vücut ağırlığının% 80 ile% 85 korumak için standart pelet yemi ile onları beslemek. </li><li> Öncesi eğitim oturumları başına kadar sukroz topakları alışmakta evlerine kafesi standart pelet yemi ek olarak fare başına sekiz sakkaroz pelet ile günlük sağlayın. </li></ol> 4. Cihaz ve öncesi eğitime Alışma <ol><li> Yeri sgıda dağıtıcıları her tepsiye aparatı altı bölmeleri, ve mevduat bir pelet her birinin merkezi haline fare başına ix sukroz pelet. </li><li> Aygıtı içine bir kafeste bütün fareler yerleştir ve bunların serbest 30 dakika boyunca açık tüm kapı ile aparatı araştırmak için olanak sağlar. </li><li> 1 günden habitüasyon sonra, fareler, günlük ön-eğitimi tabi tutulur. Bütün kapılar kapalı ve pelet alanı A1 içine yiyecek tepsisi, yerde fare yatırılır ile. Fare pelet veya 5 dakika geçtikten tüketir ise, alanda A2 fare aktarmak ve yeniden öncesi eğitim başlar. Bu eğitim günde beş defa tekrarlanan ve fareler peletlerin% 80'den fazlasını tüketmek kadar devam edilir. </li><li> Öncesi eğitimler tamamlandıktan sonra, fareler zorla değişmesinde görev veya sağ-sol ayrımı görevi ya tabi tutulur. </li></ol> 5.. Zorla münavebe görev <ol><li> Zorla münavebe görevi, her araştırma bir zorunlu seçim vadede fol oluşurbir özgür seçim tarafından işletilmektedir izlendi. </li><li> Görevin başlaması için uygulama programı (Görüntü TM) çalıştırın ve başlangıç ​​kutusu (bölge S1) bir fare koyun. </li><li> Başlat düğmesini tıklatın ve bir zorunlu seçim çalışma başlar. Bu dönemde, başlangıç ​​kutusu (kapı s2) ve alan A1 (kapı a1) veya alanda A2 (kapı a2) ya kapıları açılır ve bir sükroz pelet otomatik kapı açıkken alanının gıda tepsi teslim edilir . Fare alanına girmek ve pelet tüketmeye izin verilir. Fare pelet yiyen, fare anda kalmasını kolu (kapı p1 veya p2 ya) ile gıda tepsi yakınında Kapı açıldığında. Sonra, fare başlangıç ​​kutusu komşu kapısı (s1 veya s3 ya), yaklaşır ve kapıyı p1 veya p2 ya kapalı ve kapı s1 (veya S3) fare başlangıç ​​kutusuna dönmek böylece açıldı. Fare 30 sn içinde pelet yemek için başarısız olursa, yanıt bir "atlandığını Hata" olarak kaydedilir. Sonra, pelet otomatik gıda tepsi ve t çıkarılırfareler (p1 veya p2 ya) kaldığı kolunun o kapısı açıldı ve sonra fare başlangıç ​​kutusuna dönebilirsiniz. </li><li> Force-choice vadede ardından, serbest seçim çalışma otomatik olarak başlar. Kapı s2 ve kapılar a1 ve a2 hem de açıldı. Fare iki kolu arasında bir seçim için izin verilir. Fare bunu zorunlu seçim vadede seçim yapmak zorunda olduğunu tersi kol girerse, onun yanıtı "Doğru" olarak kabul ve fare bir sükroz pelet alır. Fare 30 saniye içinde pelet yemeye başarısız olursa, yanıt bir "atlandığını hatası" olarak kaydedilir ve pellet otomatik gıda tepsi kaldırılır. Bu zorunlu seçim görev ziyaret gibi fare aynı kola giderse, fare bir ceza ("Hata" yanıtı) olarak 10 sn alanı içine hapsedilmiştir. Sonra, p1 kapıları (veya s1) ve p2 (veya S3) açılır ve fare başlangıç ​​kutusuna dönebilirsiniz. </li><li> Bir fare başına bir oturumda 10 ardışık denemeler tabi tutulurgün (kesim süresi 50 dk). Kontrol farelerde bir oturumda% 80 doğru yanıt bir grup ortalamasını yakalamak için günlük eğitilmiştir. Doğru yanıtın grubu ortalama her grupta bir oturumda her bir farenin% doğru yanıt ortalaması alınarak hesaplanır. </li><li> , - 30 -, 10 - Kontrol ve / veya deneysel fareler kriteri için eğitilmiş sonra, daha fazla 3 takarak gecikmiş münavebe görev farelerde test edebilirsiniz, ya da zorunlu seçmeli ve serbest seçim arasında 60-s gecikmeler çalıştırır. </li><li> Her idmandan sonra kendi kafesine fareler dönün ve koku ipuçları dayalı bir önyargı önlemek için süper hipokloröz su (pH 6-7) ile cihazı temizleyin. </li></ol> 6. Sağ-sol ayrımı görev <ol><li> Sağ-sol ayrımı görevi, farenin her 10 veya 20 denemeler ücretsiz bir seçim çalışma verilir. Bir sukroz pelet zaman yani silah birinde, hedefe kol gıda tepsi teslim edilir. Fareler hedefe kol girmek için öğrenmek zorunda. Hedefi konumukol çalışma ve oturumlar boyunca sabittir, kontrol ve deney fareleri üzerinde gevşetilebilir. </li><li> Görevin başlaması için uygulama programı (Görüntü TM) çalıştırın ve başlangıç ​​kutusu (bölge S1) içine bir fare koyun. </li><li> Başlat düğmesini tıklatın ve bir serbest seçim çalışma başlar. Bu dönemde, s2 kapı ve kapı a1 ve a2 hem de açıldı ve bir pelet dağıtıcı otomatik olarak hedefe kolunun gıda tepsiye bir pelet teslim edilir. Fare serbestçe sağ ve sol kolları arasında seçim için izin verilir. Fare golü kolu girdiğinde, doğru bir cevap olarak mütalaa edilmektedir. Fare saçma veya 30 saniye geçtikten sonra, kapı p1 (veya p2) yerse açıldı. Fare alan P1 (veya P2) geçerek başlangıç ​​kutusu yaklaştığında, kapı s1 (veya S3) fare başlangıç ​​kutusuna dönmek böylece açıldı. </li><li> Bir fare genellikle günde bir seans (kesim süresi, 50 dakika) içinde 10-20 üst üste denemeler tabi tutulur. Kontrol farelerin% 80 corr bir grup ortalamasını yakalamak için günlük eğitilmişlerdirbir oturumda yanıt vb. Doğru yanıtın grubu ortalama her grupta bir oturumda her bir farenin% doğru yanıt ortalaması alınarak hesaplanır. </li><li> Fareler kriter ulaşmak sonra, (yani ters, oturumlar arasında birkaç haftalık bir gecikme ekleyerek tutma bellek ve tekrar öğrenmek değerlendirmek veya tersine ödül koyarak davranışsal esneklik değerlendirmek için ya farelere önce unbaited kol ek seans verebilir gerektiği gibi,) öğrenme. </li><li> Her idmandan sonra kendi kafesine fareler dönün ve koku ipuçları dayalı bir önyargı önlemek için süper hipokloröz su (pH 6-7) ile cihazı temizleyin. </li></ol> 7. Görüntü analizi <ol><li> T-labirent aparatında Davranışlar bir bilgisayara bağlı ve görüntü TIFF formatında saklanan bir video kamera ile kayıt altına alınmaktadır. Davranışsal verileri (Görüntü TM) satın alınması ve analiz edilmesi için kullanılan uygulama kamuya Görüntü J programı (tarafından geliştirilen dayanmaktadırWayne Ruh Sağlığı Ulusal Enstitüsü Rasband ve mevcut <a hef="http://rsb.info.nih.gov/ij/">http://rsb.info.nih.gov/ij/</a> Tsuyoshi Miyakawa (O'Hara &amp; Co, Tokyo, Japonya kullanılabilir) tarafından güncellenmiştir). </li><li> Görüntü TM programı otomatik olarak bir oturum tamamlamak için doğru yanıt yüzdesi için metin dosyaları, gecikme süresi (sn) üretir, uzaktan oturumu sırasında seyahat ve oturum ihmal hataların sayısı. Ayrıca, bir fare, ham konum verileri ve her vadede ham yanıtı veri (Doğru, eksiklik veya hata) izi görüntüleri üretilir ve kaydedilir. </li></ol> 8. İstatistiksel Analiz Iki yönlü (DENEYSEL DURUMU (örneğin, GENOTİP) x OTURUM veya DENEYSEL DURUMU x DELAY) varyans tekrarlanan ölçümlerin analizi, her davranış verileri analiz edin. 9. Temsilcisi Sonuçlar Ma - α-CaMKII + / T-labirent performanslı bir örneğile fareler ve yabani tip kontrolü littermates (C57BL/6J arka plan) (eski 11-18 hafta, n zorla arda veya sağ-sol ayrımı görev için grup başına = 10) Şekil 2-4 de gösterilmiştir. Fareler kafes arkadaşları 2,3 yönelik saldırganlık düzeyi yüksek gösterirler, hem de mutant ve kontrol farelerde tek başına sütten kesildikten sonra plastik bir kafes (22.7 x 32.3 x 12.7 cm) yerleştirildiler - α-CaMKII + / çünkü. Deneyler Fujita Sağlık Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmıştır. Zorla ardalanması görevde, kontrol fareleri giderek doğru seçim yapmayı öğrenir ve genellikle 2 ile 1 hafta (Şekil 2A) bir ortalama% 80 doğru yanıt kriteri ulaşabilirsiniz. Ve daha kısa gecikme (GENOTİP: F (1,18) = 8.88: - Kontrol farelerle karşılaştırıldığında, α-CaMKII + / fareler doğru yanıt anlamlı olarak düşük yüzdesi (F (1,18) = 29.04, p &lt;0.0001 GENOTİP) gösterdi , p = 0.008; GENOTİP x OTURUM: F (9.162) = 2.24, p = 0,0218) ve kısa d gezdiistance (GENOTİP: F (1,18) = 8.67, p = 0,0086; GENOTİP x OTURUM: F (9.162) = 3.19, p = 0.0014) kontrol fareleri (Şekil 2A, B ve C) 'den. Genotip anlamlı etkisi ihmal hataları (Şekil 2D) tespit edildi. ; GECİKME F (1,18) = 38,781, p &lt;0.0001: - Ayrıca, gecikmiş değişmesinde görev, α-CaMKII + / doğru seçim yüzdeleri farelerde herhangi bir gecikme süresi (GENOTİP yabani tip farelere göre daha düşüktü : F (3,54) = 8,074, p = 0.0002; GENOTİP x GECİKME: F (3,54) = 0.223, p = 0.88; Şekil 3). Bu sonuçlar mutantlar mutant farelerde α-CaMKII eksikliği çalışan bir bellek kaybı uyardığını düşündüren, daha hızlı kontrollere göre görevi gerçekleştirmek olabilir ancak farelere kıyasla bozulmuş bir performans sergiledik göstermektedir. Sağ-sol ayrımı görevi, α-CaMKII doğru seçim yüzdeleri + / - mutantlar yavaş yavaş farelerde (Şekil 4A) kontrol etmek için benzer oturumları arasında arttı. Ayrıca, ne zaman 1 aylık gecikme oturumlar arasında yerleştirildi, Mutant ve kontrol fareler arasında doğru yüzde olarak anlamlı farklılıklar bulunmuştur. Zorla münavebe görevi olduğu gibi, α-CaMKII + / - mutant bir oturum tamamlamak için anlamlı olarak kısa bir gecikme olduğu görülmüştür (GENOTİP: F (1,18) = 12.12, p = 0.0027) ve kısa mesafe (GENOTİP bir oturum sırasında cihazı yolculuk : F (1,18) = 25.08, p &lt;0.0001; GENOTİP x OTURUM: F (15.270) eğitimleri boyunca kontrol fareleri (Şekil 4B ve C) den = 2.83, p = 0.0004). Bu veriler, bu görevi ile değerlendirilen α-CaMKII eksikliği doz başvuru bellek etkilemediği işaret etmektedir. F (5,90) =:; GENOTİP x OTURUM F (1,18) = 10.92, p = 0.0039: - ters-öğrenme oturumları ise, α-CaMKII + / mutantlar doğru yanıt önemli ölçüde daha düşük oranda (GENOTİP gösterdi kontrol farelere göre daha Şekil 4D) = 17,12, p = 0.0006:; 5.54, p = 0.0002 Şekil 4A) ve daha fazla ihmal hataları (F (1,18 GENOTİP) vardı. Mutant fareler davranışsal esneklik azaldığı - Bu bulgular α-CaMKII + / öneririz. &lt;p class = "jove_content"&gt; <img src="/files/ftp_upload/3300/3300fig1.jpg" alt="Şekil 1"> Şekil 1. Zorla Değişime ve sağ-sol ayrımı görevler için (A) T-labirent cihazları. Şekil Takao ve ark. (2008) çağırılır. (B) görüntü cihazı monte edilmiş bir CCD kamera tarafından ele geçirildi. T-labirent sürgülü kapılar (s3, a1, a2, p1, p2, s1, s2) tarafından 6 alanların (A1, A2 S2, S1, P1, P2) içine kapalı bölümlenmiş. Ses geçirmez bir odada aparatı ve ekstra-labirent kuyrukları (C) Yapılandırma ve yönlendirme. İki aparatları gibi odanın bir kapı gibi bir ses geçirmez bir odada duvar ve nesneler, doğru aynı yöne bakacak şekilde yerleştirilir, floresan tavan ışıkları, odanın duvarları, aparatlarının CCD kamera, ve rafları fare karşılamak için kafesleri ayarlanır. <img src="/files/ftp_upload/3300/3300fig2.jpg" alt="Şekil 2"> Şekil 2. T-labirent arda görev zorladı. Fareler sessio başına 10 günlük deneme aldın. Doğru cevaplar (A) yüzde Veri, (B) gecikme (sn), (C) uzaklık (cm) gitti ve iki seans, her blok için standart hataları aracı olarak temsil eksikliğini (D) numarasını, vardı iki yönlü tekrarlayan ölçümler ANOVA ile analiz. α-CaMKII + / - farelerin doğru cevaplar daha düşük bir oranda (p &lt;0.0001) ve daha kısa gecikme (p = 0.008) gösterdi ve oturumlar boyunca kontrol fareler daha kısa mesafede (p = 0,0086) gitti. <img src="/files/ftp_upload/3300/3300fig3.jpg" alt="Şekil 3"> Şekil 3. T-labirent 3 gecikmeler, 10, 30, ve 60 sn ile münavebe görev zorladı. Yaklaşık 24 saat son antrenmandan sonra, farelerin beş gecikme oturumları tabi tutuldu. Her gecikme için doğru cevapların yüzdesi standart hataları aracı olarak temsil edilir ve iki yönlü tekrarlayan ölçümler ANOVA ile analiz edildi. α-CaMKII + / - farelerde herhangi bir gecikme de kontrol farelere göre daha doğru cevaplar daha düşük bir yüzdesini gösterdisüresi (p &lt;0.0001). <img src="/files/ftp_upload/3300/3300fig4.jpg" alt="Şekil 4"> 4. T-labirent sağ-sol ayrımı görev Şekil. Fareler bir oturumda günlük 10 veya 20 denemeler aldı. Doğru cevaplar (A) yüzde Veri, (B) gecikme (sn), (C) uzaklık (cm) gitti, ve (D) ihmal hata sayısı 20 çalışmaların her blok için standart hataları aracı olarak temsil edilir, hangi iki yönlü tekrarlayan ölçümler ANOVA ile analiz edildi. Mutant ve kontrol farelerde - 1 ay son antrenmandan sonra ilk eğitim ve tekrar öğrenmek oturumları sırasında, doğru cevapların yüzdesi önemli α-CaMKII + / arasında fark yoktu. Mutant fareler, bununla birlikte, ters öğrenme seans (p = 0,0039) sırasında daha doğru kontrol farelerin tepkileri bir önemli ölçüde düşük bir yüzdesi gözlendi.

<ol><li>Takao, K., Toyama, K., Nakanishi, K., Hattori, S., Takamura, H., Takeda, M., Miyakawa, T., Hashimoto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+long-term+memory+retention+and+working+memory+in+sdy+mutant+mice+with+a+deletion+in+Dtnbp1%2C+a+susceptibility+gene+for+schizophrenia%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Brain%22%5BJournal%5D)">Impaired long-term memory retention and working memory in sdy mutant mice with a deletion in Dtnbp1, a susceptibility gene for schizophrenia.</a> Mol. Brain. 1, 11-11 (2008).</li>
<li>Chen, C., Rainnie, D. G., Greene, R. W., Tonegawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+fear+response+and+aggressive+behavior+in+mutant+mice+deficient+for+alpha-calcium-calmodulin+kinase+II%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Abnormal fear response and aggressive behavior in mutant mice deficient for alpha-calcium-calmodulin kinase II.</a> Science. 266, 291-294 (1994).</li>
<li>Yamasaki, N., Maekawa, M., Kobayashi, K., Kajii, Y., Maeda, J., Soma, M., Takao, K., Tanda, K., Ohira, K., Toyama, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-CaMKII+deficiency+causes+immature+dentate+gyrus%2C+a+novel+candidate+endophenotype+of+psychiatric+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Brain%22%5BJournal%5D)">Alpha-CaMKII deficiency causes immature dentate gyrus, a novel candidate endophenotype of psychiatric disorders.</a> Mol. Brain. 1, 6-6 (2008).</li>
<li>Aultman, J. M., Moghaddam, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+contributions+of+glutamate+and+dopamine+receptors+to+temporal+aspects+of+rodent+working+memory+using+a+clinically+relevant+task%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Distinct contributions of glutamate and dopamine receptors to temporal aspects of rodent working memory using a clinically relevant task.</a> Psychopharmacology. 153, 353-364 (2001).</li>
<li>Papaleo, F., Yang, F., Garcia, S., Chen, J., Lu, B., Crawley, J. N., Weinberger, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysbindin-1+modulates+prefrontal+cortical+activity+and+schizophrenia-like+behaviors+via+dopamine%2FD2+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Dysbindin-1 modulates prefrontal cortical activity and schizophrenia-like behaviors via dopamine/D2 pathways.</a> Molecular Psychiatry. , 1-14 (2010).</li>
<li>Douglas, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cues+for+spontaneous+alternation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Cues for spontaneous alternation.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 62, 171-183 (1966).</li>
<li>Dudchenko, P. A., Davidson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rats+use+a+sense+of+direction+to+alternate+on+T-mazes+located+in+adjacent+rooms%5BTitle%5D)+AND+%22Anim.+Cogn%22%5BJournal%5D)">Rats use a sense of direction to alternate on T-mazes located in adjacent rooms.</a> Anim. Cogn. 5, 115-118 (2002).</li>
<li>Dudchenko, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+the+tasks+used+to+test+working+memory+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">An overview of the tasks used to test working memory in rodents.</a> Neurosci Biobehav. Rev. 28, 699-709 (2004).</li>
<li>Gerlai, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+continuous+alternation+task+in+T-maze+detects+hippocampal+dysfunction+in+mice%3A+A+strain+comparison+and+lesion+study%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">A new continuous alternation task in T-maze detects hippocampal dysfunction in mice: A strain comparison and lesion study.</a> Behav. Brain. Res. 95, 91-101 (1998).</li>
<li>Wood, E. R., Dudchenko, P. A., Robitsek, R. J., Eichenbaum, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+neurons+encode+information+about+different+types+of+memory+episodes+occurring+in+the+same+location%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Hippocampal neurons encode information about different types of memory episodes occurring in the same location.</a> Neuron. 27, 623-633 (2000).</li>
<li>Lee, I., Griffin, A. L., Zilli, E. A., Eichenbaum, H., Hasselmo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gradual+translocation+of+spatial+correlates+of+neuronal+firing+in+the+hippocampus+toward+prospective+reward+locations%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Gradual translocation of spatial correlates of neuronal firing in the hippocampus toward prospective reward locations.</a> Neuron. 51, 639-650 (2006).</li>
<li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+mouse+behavior%3A+interactions+with+laboratory+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284, 1670-1672 (1999).</li>
<li>Wahlsten, D., Metten, P., Phillips, T. J., Boehm, S. L., Burkhart-Kasch, S., Dorow, J., Doerksen, S., Downing, C., Fogarty, J., Rodd-Henricks, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+data+from+different+labs%3A+lessons+from+studies+of+gene-environment+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Different data from different labs: lessons from studies of gene-environment interaction.</a> J. Neurobiol. 54, 283-311 (2003).</li>
<li>Matsuo, N., Yamasaki, N., Ohira, K., Takao, K., Toyama, K., Eguchi, M., Yamaguchi, S., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+activity+changes+underlying+the+working+memory+deficit+in+alpha-CaMKII+heterozygous+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neural activity changes underlying the working memory deficit in alpha-CaMKII heterozygous knockout mice.</a> Front Behav. Neurosci. 3, 20-20 (2009).</li>
<li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders%3A+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.+Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann. N. Y. Acad. Sci. 1086, 144-159 (2006).</li>
<li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+brain-behavior+phenotypying+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Res%22%5BJournal%5D)">Impact of brain-behavior phenotypying of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci. Res. 58, 124-132 (2007).</li>
<li>Ikeda, M., Hikita, T., Taya, S., Uraguchi-Asaki, J., Toyo-oka, K., Wynshaw-Boris, A., Ujike, H., Inada, T., Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+YWHAE%2C+a+gene+encoding+14-3-3epsilon%2C+as+a+possible+susceptibility+gene+for+schizophrenia%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Identification of YWHAE, a gene encoding 14-3-3epsilon, as a possible susceptibility gene for schizophrenia.</a> Hum. Mol. Genet. 17, 3212-3222 (2008).</li>
<li>Nakatani, J., Tamada, K., Hatanaka, F., Ise, S., Ohta, H., Inoue, K., Tomonaga, S., Watanabe, Y., Chung, Y. J., Banerjee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+behavior+in+a+chromosome-engineered+mouse+model+for+human+15q11-13+duplication+seen+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Abnormal behavior in a chromosome-engineered mouse model for human 15q11-13 duplication seen in autism.</a> Cell. 137, 1235-1246 (2009).</li>
<li>Hashimoto-Gotoh, T., Iwabe, N., Tsujimura, A., Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KF-1+Ubiquitin+Ligase%3A+An+Anxiety+Suppressor%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">KF-1 Ubiquitin Ligase: An Anxiety Suppressor.</a> Front. Neurosci. 3, 15-24 (2009).</li>
<li>Ohno, M., Hiraoka, Y., Matsuoka, T., Tomimoto, H., Takao, K., Miyakawa, T., Oshima, N., Kiyonari, H., Kimura, T., Kita, T., Nishi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nardilysin+regulates+axonal+maturation+and+myelination+in+the+central+and+peripheral+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Nardilysin regulates axonal maturation and myelination in the central and peripheral nervous system.</a> Nat. Neurosci. 12, 1506-1513 (2009).</li>
<li>Tanaka, H., Ma, J., Tanaka, K. F., Takao, K., Komada, M., Tanda, K., Suzuki, A., Ishibashi, T., Baba, H., Isa, T., Shigemoto, R., Ono, K., Miyakawa, T., Ikenaka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+with+altered+myelin+proteolipid+protein+gene+expression+display+cognitive+deficits+accompanied+by+abnormal+neuron-glia+interactions+and+decreased+conduction+velocities%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mice with altered myelin proteolipid protein gene expression display cognitive deficits accompanied by abnormal neuron-glia interactions and decreased conduction velocities.</a> J. Neurosci. 29, 8363-8371 (2009).</li>
<li>Sagata, N., Iwaki, A., Aramaki, T., Takao, K., Kura, S., Tsuzuki, T., Kawakami, R., Ito, I., Kitamura, T., Sugiyama, H., Miyakawa, T., Fukumaki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+behavioural+study+of+GluR4+knockout+mice%3A+implication+in+cognitive+function%5BTitle%5D)+AND+%22Genes.+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Comprehensive behavioural study of GluR4 knockout mice: implication in cognitive function.</a> Genes. Brain Behav. 9, 899-909 (2010).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

T-labirent kullanarak Zorla Değişime ve sağ-sol ayrımı görevleri 4,5 kemirgenlerde, sırasıyla, çalışma ve başvuru bellek değerlendirmek için yoğun olarak kullanılmaktadır. T-labirent görevleri, bu kemirgenler gibi ekstra labirent ipuçları, oda ipuçlarının yapılandırma, labirentin yönlendirme ve benzeri gibi mekansal ve mekansal olmayan ipuçları dayalı görevleri gerçekleştirmek için farklı stratejileri kullanabilirsiniz bilinmektedir 6,7,8. Bir oda ve istikrarı, olmaması ya da odadaki ipuçlarını kutuplaştırıcı varlığında labirentin Oryantasyon ve odadaki ipuçlarını görmek için kemirgenler yeteneği stratejileri etkileyebilir. Böylece araştırmacılar, bir deney ve davranışsal verilerin yorumlanması yürüten bir odada cihaz ve kuyrukları yapılandırma ve yönelimi dikkate almak gerekir. Laboratuarımızda, böyle bir odanın kapı, tavan floresan ışıkları, odanın duvarları, CCD kameraları gibi ses geçirmez bir odada ve set nesneleri bir duvar, doğru aynı yöne bakan iki aparat yerleştirinfareler için ekstra labirent mekan hissi (Şekil 1C bakınız) olarak hizmet edebilir fare kafesleri yerleştirmek için aparatlar ve raflar,. Birçok durumda, T-labirent testler elle aşağıdaki gibi bir insan deneyi tarafından yapılmıştır: her denemede, deneyi gıda tepsi üzerinde bir sükroz pelet yerleştirir ve test başlatmak için aygıtın giyotini kapı açar. Sonra bir fare ya silah girdiğinde, deneyci kapıları, kayıtları fare davranışını kapanır ve kol elle başlangıç ​​kutusuna fare aktarır. Fare genotip ya da deneysel koşulu ile etkileşim taşıma olası karıştırıcı değişkenler T-labirent performansı etkileyebilir. Son on yıl içinde, başlangıç ​​kutusuna geri hedefi kolundan konunun elle transfer içermeyen sürekli bir değişim görev için modifiye T-labirent testi kullanılmıştır. 9-11 bile cihaz, test protokolleri ve birçok çevresel değişkenler şiddetle sta, eşitlendiği,ndardized davranış testleri her zaman farklı laboratuvarlarda 12,13 benzer sonuçlar üretemezler. Testinin yapılması Özgül denemecileri her laboratuar için benzersiz olabilir ve ayrıca farelerin davranışlarını etkileyebilir. Ek olarak, insan deneyi genellikle, bir sükroz pelet misplacing açılması ya da deneme numarası ve zaman tutma izleme diğer kapı yanı sıra, hatalar kapatılması gibi hataları, yapmak eğilimindedir. Karıştırıcı değişkenler ve insan hataları meydana etkisini azaltmak için, biz geliştirdik ve Görüntü TM programı ile bir video izleme sistemi tarafından kontrol edilen otomatik T-labirent cihazı kullandık. Geliştirilmiş T-labirent aparatı da kapılar zemine inmek için tasarlanmıştır, çünkü bize T-labirent performansı sırasında mikrodiyaliz, elektrofizyoloji ve optogenetics teknikleri kullanmasına izin avantajları vardır. Böylece, otomatik cihaz çalışma ve kemirgenlerde başvuru bellek nörobiyolojisinin çalışmalarını kolaylaştırmak açısından yararlı bir araçtır. Bir oturumda denemeler bir dizi otomatik ve ardışık yürütme etkinleştirmek için, bizim protokoller bazı potansiyel dezavantajları var. Örneğin, zorla değişmesinde görevi, zaman fareler için A1 veya A2, potansiyel olarak kendi performansı etkileyebilecek gelen S1 geri dönmek için. Kalan P1 veya P2 alanında kendisini uzamsal bir işaret ve bir zorunlu seçim vadede her iki alanda uzun veya kısa süreli bir hafıza yük değiştiremezsiniz olabilir çünkü, ancak, ciddi bir sorun olmayabilir. Bir diğer potansiyel sorun yerine uzaysal çalışma belleği, kullanılabilir, fareler tarafından yapılan koku parkuru. Ancak, birkaç denemeleri sonra, koku izi üzerine birden çok kez olabilir ve ipuçları olarak kullanılacaktır zor olacaktı. Ayrıca, sol-ışık ayrımcılık görevi, koku izi ardışık çalışmalar boyunca bir ödül yerini bulmak için fareler koku ipuçları olarak hizmet verebilir. Ipuçları potansiyel bir sorun olabilir ki, bir oturumda çalışmalar boyunca öğrenme ve hafıza sürecini etkileyebilir. Bununla birlikte,farelerde bir oturumda ilk deneme koku izi stratejisi kullanamaz ve böylece ilk çalışmalarda performansları koku izi stratejisinin bir potansiyel kullanımı yoksun bir göstergesi olarak hizmet verecek. Olarak temsil sonuçlar gösterildiği gibi, kontrol C57BL/6J farelerin tepkileri yüzde doğru yavaş yavaş hem de görev seans boyunca artmıştır. Bulgular C57BL/6J farelerde T-labirent modifiye otomatik olarak doğru seçimler yapmak öğrenebilirsiniz onaylayın. Bu çalışmada, farelere (Şekil 2A bakınız) kapsamlı eğitim sonrasında daha fazla değil hatta% 80 civarında doğru seçimler kaldı ve. Performansı daha yüksek seviyeye ulaşmak için onlar gibi eğitimleri boyunca bazı hatalar ihmal gösteren tutmak olduğunu düşünürsek, motivasyonlarını fareler için çok yüksek olmayabilir. Zorla münavebe görevi, α-CaMKII + / - farelerde kontrol farelere göre daha doğru cevaplar daha düşük bir yüzdesini gösterdi. Böylece, mutant farelerde bu ta kontrol farelerinden göre bozulmuş performans göstermiştirsk. Bu sonuç, α-CaMKII eksikliği çalışma belleğinde açıklarının neden ve otomatik T-labirent aparatında zorla münavebe görevi doğru algılar o başkaca bir kanıt, sekiz kol radial labirent testinde 2,14 elde önceki bulgularla tutarlı mutant farelerin bellek kusuru çalışıyor. Sağ-sol ayrımı görevi, sonuçlar α-CaMKII eksikliği doz başvuru bellek etkilemediği işaret etmektedir. Ters-öğrenme seans sonuçlar &#39;de gösterildiği gibi, ancak, α-CaMKII eksikliği davranışsal esneklik azaltabilir. Mutant fareler, tersine öğrenme oturumları sırasında kontrolü farelere göre daha fazla ihmal hataları görüntülenir. Ihmal hataları sayısındaki artış ödül ile ilişkili olduğu kol öğrenme fırsatı azaltabilir. Bu nedenle, gecikmiş öğrenme edinimi ilk oturumları sırasında ihmal hataları sayısındaki artışa bağlı olabilir, ancak engellilerin ters l olabilirkazanç. Bir başka olasılık mutantlar ihmal hataları neden ve yönetici fonksiyonlarını etkileyebilir kuralları, değişim ile karışabilir olmasıdır. Böylece, makul bir sonuç çıkarmak, ihmal hataları da çok doğru bir seçim yüzdesi olarak muayene edilmelidir. Görüntü TM programı gecikme ve mesafe için ek sonuçlar doğru yanıt yüzdesi ve ihmal hatası sayısının yanı sıra bir oturum tamamlamak için gitti üretir. Gecikme ve mesafe farklılıkları bir oturum tamamlamak için gitti İlişkin lokomotor aktivite düzeyi, seçim silah dürtüsel eğilimi, görevi gerçekleştirmek için motivasyonu, alışkanlık düzeyinde görev, farklı öğrenme strateji ve vb bir fark olarak yorumlanabilir temsilcisi sonuçları, α-CaMKII + / - fareler daha kısa gecikme ve kontrol grubuna göre daha kısa seyahat mesafesi gösterdi. Aslında, α CaMKII + / - Farelerde t göre bir hyperlocomotor aktivite gösterdio fareler 3 denetlemek ve bu fenotipin endekslerinde farklılıklar temelini olabilir. Laboratuarımızda, biz genler, beyin ve davranış 15,16 ilişkisini aydınlatmak için otomatik cihaz kullanarak genetiğiyle oynanmış farelerin ve bir T-labirent testinde wild-tip kontrol fareleri fazla 36 suşlar değerlendirdik. Biz fazla 1200 farelerin ham veriyi büyük bir dizi elde edilmiştir, ve mutant farelerin 3,16-22 birkaç soylarda T-labirent performansı için verileri bildirdin. Zaten araştırma makalesi yayınlanan suşların veri bir kamu veritabanı (: URL olarak &quot;Fare Davranış Fenotip Veritabanı&quot; dahildir <a href="http://www.mouse-phenotype.org/" target="_blank">http://www.mouse-phenotype.org/~~V</a> ). Bazı çalışmalar mutant Dtnbp1 1, Nrd1 20, 21 ya da Plp1 genleri olan farelerin bellek kusuru çalışma olduğu gösterilmiştir. Böylece, otomatik sahip T-labirent görevler için standart protokolaparatı mutant ve yabani tip kontrol farelerinden arasındaki bellek işlevi üzerindeki etkileri genetik tespiti için de uygundur. Davranışsal test protokolleri, standart çoğaltılır ve laboratuvarlar boyunca karşılaştırıldığında sonuçlar olması gerekir. Geliştirilmiş T-labirent aparatı laboratuvarlar boyunca kullanılan protokol standardizasyonu katkıda bulunabilir test prosedürlerinin otomasyon, yol açar. Bu video madde de gösterildiği gibi, cihazlar ve programın mevcut versiyonu, siyah veya agouti farelerde test etmek için izin, ancak albino olmayan farelerin olabilir. Şimdi, Albino farelerde test mümkün kılmak üzere sisteminin değiştirilmiş bir versiyonu üretmektedir. Sistem kapılar zemin altında aşağı gitmek için tasarlanmış bu yana vivo mikrodiyaliz, in vivo elektrofizyolojide ve optogenetics deneyler, T-labirent testi sırasında yapılabilir bir avantajı vardır. Örneğin, bazı araştırmacılar silah seçimi sırasında hipokampus nöron elektrofizyolojik özelliklerini araştırmak için deneyebilirsinizcihazın bazı iyileştirmeler kapı ve pelet kaldırma mekanizmasını tahrik gelen elektriksel gürültü en aza indirmek için gerekli olabilir ancak. Birlikte ele alındığında, T-labirent modifiye otomatik cihazlar kullanılarak değişim ve sağ-sol ayrımı görevleri çalışma ve başvuru bellek ve farelerde davranışsal esneklik değerlendirmek için kullanışlıdır zorladı.

t-labirent zorla değişim ve Çalışma ve fareler referans bellek değerlendirilmesi için sağ-sol ayrımcılık görevler

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

Zorla değişim ve T-labirent kullanarak sağ-sol ayrımı görevleri yaygın kemirgenlerde, sırasıyla, çalışma ve başvuru bellek değerlendirmek için kullanılmaktadır. Laboratuarımızda, bu cihazların otomatik sürümünü kullanarak genetiğiyle oynanmış farelerin 30&#39;dan fazla suşlarında bellek iki tür değerlendirildi. Burada, bir video izleme sistemi ve bir film formatında protokolleri ile bir bilgisayar tarafından işletilen modifiye T-labirent cihazları sunuyoruz. T-labirent aparat otomatik olarak aşağı doğru açabilir kapı, bir başlangıç ​​kutusu ile her biri, bir T-şekilli alley, kutunun otomatik bir tarafında pelet dağıtıcılar ile iki kutular, ve iki L-şekilli alleys sürgü tarafından kapalı bölümlenmiş pistleri oluşmaktadır . Fareler fare davranışı üzerinde deneyci işleme etkileri hariç başlangıç ​​kutusuna dönmek böylece Her L şeklindeki sokak başlangıç ​​kutusuna bağlanmıştır. Bu aygıt aynı zamanda, bir avantaja sahiptir in vivo, in vivo elektrofizyolojide mikrodiyaliz, ve optogenetics Technkapılar zemine inmek için tasarlanmış oldukları iques T-labirent performansı sırasında yapılabilir. Sekiz kollu radyal labirent görev bellek kusuru çalışma göstermek için rapor edilir fareler, - bu film yazıda otomatik cihaz ve α-CaMKII + / T-labirent performansı kullanarak T-labirent görevleri açıklar. Fareler çalışan bir bellek kaybı, ancak başvuru bellek hiçbir bozulma saptandı, ve protokol geçerliliğini destekleyen sekiz kollu radyal labirent görev kullanarak önceki bulgularla tutarlıdır - Bizim veri α-CaMKII + / belirtti. Ayrıca, veri mutantlar α-CaMKII eksikliği azalmış davranışsal esneklik neden düşündüren, tersine öğrenme açıkları sergileme eğiliminde olduğunu göstermektedir. Böylece, otomatik olarak modifiye aparatı kullanılarak T-labirent testi çalışma ve referans bellek ve farelerde davranışsal esneklik değerlendirmek için yararlıdır.

Bu makale, farelerde öğrenme ve hafıza işlevleri değerlendirmek için bir değiştirilmiş otomatik bir aparat kullanılarak T-labirent test protokolü sunar.

T-labirent Zorla Değişim ve Çalışma ve Fareler Referans Bellek değerlendirilmesi için sağ-sol Ayrımcılık Görevler

T-maze kullanılarak gerçekleştirilen zorunlu alternasyon ve sol-sağ ayrım görevleri, sırasıyla çalışma ve referans belleğini değerlendirmek için ...'da yaygın olarak kullanılmıştır.

Takip sistemli modifiye edilmiş Otomatik takım arkadaşları uygulaması gösterilmektedir. Bu uygulama, 25 santimetre yüksekliğinde duvarlara sahip beyaz plastik raylar ile inşa edilmiştir. MA, A alanına doğru otomatik iplikle altı bölgeye ayrılmıştır. Bunlardan biri STA bölmesidir.S iki, takım arkadaşlarının benzerliğidir. A bir ve A iki sırasıyla sol ve sağ kolların altındaki alanlardır. P bir ve P iki alanları, farenin statik bölmeye dönebilmesi için A bir veya A iki alanlarından A bir alanına uzanan bağlantı pasajlarını karşılaştırır.Bu videoda bir gösterim olarak kapılar otomatik olarak aşağıya doğru açılmaktadır, kapılardan biri ise manuel olarak çalıştırılmaktadır. Bu geliştirilmiş operatörler, ekip arkadaşlarının performansı sırasında moleküler fizyoloji ve genetik tekniklerde INB mikro SSIS kullanmamıza olanak tanır. N, bir dağıtıcı ile dönemlik olarak, gıda ödülü olarak kullanılan çapraz dönemlerle birlikte kullanılır; gıda dağıtıcı şişesini ve ardından atık şişesini iter.Yem dağıtıcıdan yem tepsisine dökülen ve ardından arazi üzerine atılan peleti görebilirsiniz. Fare sensör tarafından algılanır ve bilgisayar tarafından kaydedilir. Uygulamada, video takip sisteminin programı peletleri otomatik olarak dağıtır, böylece oturum sonuna kadar herhangi bir işlem yapmanıza gerek kalmaz. CCD kamera, bilgisayar tarafından farenin davranışını görüntüyle kaydetmek için operatörün üzerine monte edilmiştir; apparatus %100 ışık düzeyinde aydınlatılmıştır.Appell'in, çevreyle ilgili başlangıçtaki etnik OID odalarını azaltmak için ses geçirmez bir oda kullanmasını önerdik; operasyon seansları günlük kütle ağırlıklarıyla bir hafta önce başlatıldı ve her fareye döneme alışması için bir skor hızı sağlandı ve standart CHO besleme periyoduyla deney boyunca serbest besleme ağırlığının %80 ila %85'ini korumak için plaka eğitimi verildi. Hedef ağırlığa ulaşıldıktan bir gün sonra, doğrudan oda ışığından kaçınmak için ilk denemenin başlangıcından en az 30 dakika önce, farelerin bulunduğu tüm kafesler ses geçirmez odaya taşındı. Güncel ışıklardan kaçınmak için kafesler üst rafa yerleştirilmemelidir.Fareleri operatörlere yerleştirmeden önce, ProAct Cues'a dayalı bir yanlılığı önlemek için süper hipokloröz suyu açarak operatörleri bir dil ile silmeniz gerekir. Bugün, her fare için merkezdeki altı yakın ruhu, altı Emir ile birlikte her bir yemek dağıtıcı tepsisine bir adet gelecek şekilde yerleştirin. Tüm fareleri tekli kafesler halinde Perus'a yerleştirin ve serbest kalmalarına izin verin.Perus'u tüm kapılar kapalıyken veya 30 dakika öncesinden inceleyin. Tahkimden bir gün sonra, fareler tüm kapılar kapalıyken ve peletler yem kanalına yerleştirilmiş haldeyken günlük kan çekim işlemine tabi tutulacaktır. Eğer fare beş dakika içinde peleti tüketirse, fareyi sol kola yerleştirin; aksi takdirde fareyi sağ kola aktarın ve ön eğitime yeniden başlayın. Bu eğitim prosedürü günde beş kez tekrarlanır ve fare peletleri tüketene kadar devam edilir.Dönemlerin %80'inden fazlasında fare statik bölmeye yerleştirilmiştir. Kapılar açılır ve fareye önce bir kola hızla girme seçeneği sunulur ve fare başlangıç bölmesine kendiliğinden döner. Ardından fareye gelecekte seçim yapma imkanı verilir.Şimdi dördüncü kolun karşısındaki kol ısırılır. Ardından, fare kendiliğinden statik kutuya döner ve prosedür tekrarlanır. Bu işlem, hem kontrol hem de deney fareleri için günde 10 kez tekrarlanır.Bu kriterle, ilk seçim ile tam seçim isimleri arasında 3, 10, 30 veya 60 saniyelik gecikmeler ekleyerek fareleri gecikmeli tutma görevinde daha ayrıntılı test edebilirsiniz. Bu; görevle ilgili bilgilerin, benzersiz fare kimliğinin, genotipinin, kulak delme deseninin ve elle uygulama programıyla elde edilen verilerin kaydedilmesi için hazırlanan bir çalışma sayfasıdır. Plug TM çevrimiçi giriş proje kimliğini seçin.Örneğin, ana hat adı giriş oturumu. Örneğin, test tarihi, C kamerası tarafından yakalanan görüntü ile formül gibi giriş parametreleri, kesme süresi ve operatör boyutu. Ardından deneme kimliği girilir.Örneğin, referans dosya adı için istasyon numarası veya bu görev ve isim açılır menüden seçilmeli, seçim numarası girilmeli, makine hatası için zaman sınırı ve ceza süresi belirlenmelidir. Ardından, yakalanan görüntüyle beraber parlaklık ve kontrast değerleri ayarlanarak özel kısa bir ikili görüntü oluşturulur. Son olarak, uygun ilgi bölgelerinin toplandığı kontrol edildikten sonra, program test edilmeye hazır hale getirilmesi için desen tamamlanabilir.Fareyi nazikçe tutun ve başlangıç bölmesine yerleştirin. Başlat düğmesine ve kuvvet seçeneğine tıklayın. Başlattıktan sonra, bağırsaklardaki canlı ve ikili görüntüleri ve lezyonları görebilirsiniz.Bu durumda, appellate bugün sağ koldayken ED alanındaydı, fare sayfaya girdi ve kapı açıktı. Tam seçimle başlayan süreç sol kola iletildi. Fare sol kola girdiği için yanıt doğru olarak işaretlendi.Yanıtlara ilişkin sonuçlar, monitörün altındaki ışık penceresinde görüntülenir. Burada, örnek canlı görüntüler geri oynatıldığında, yeşil dairelerin doğru yanıtları, sarı dairelerin ise hatalı yanıtları belirttiği görülmektedir. Bir fareye, günde bir oturumda ardışık 10 deneme uygulanır.Farelerin günlük eğitimi sonucunda, ortalama %80 doğru yanıt oranı, doğru yanıt gecikme süresi, oturumu tamamlama süresi, seviyeye olan mesafe ve hata sayısı program tarafından otomatik olarak hesaplanır. Her oturumdan sonra fare kendi kafesine geri bırakılır. Dispenser plakasını temizleyin ve plakaları bir kağıt havluyla silin; fabrika kesimlerinden kaynaklanan bir yanlılığı önlemek için suyu temizleyin. Kontrol ve deney fareleri için bu kriterler geçerlidir ve fareleri gecikmeli tutma görevinde daha fazla test etmek isterseniz, program ayarlarından gecikmeli dosyayı seçerek bir sonraki oturuma başlayabilirsiniz.Prosedür, konumlandırma görevine oldukça benzerdir; ancak sol veya sağ kolun aksine, bu işlem her zaman post-retansiyon görevi ve uygulama programındaki gibi gerçekleştirilir. Bu görev için referans dosya adını seçin ve açılır menüden fare adını belirleyin, fareyi başlangıç bölmesine yerleştirin. Başlat düğmesine tıklayın ve seçilen liderle işlemi başlatın.Bu durumda, seçilen kol her zaman Period ile eşleştirilir. Bir fare, günde bir oturumda genellikle art arda 10 ila 20 denemeye tabi tutulur. Fareler, ortalama %80 doğru yanıt kriterine ulaşana kadar günlük olarak eğitilir.Sonuçlar, farelerden sonra otomatik olarak hesaplanır. Bu kriterlere göre, tutma belleğini değerlendirmek için oturumlar arasına gecikme eklenerek veya davranışsal canlılığı değerlendirmek için farelerle ek oturumlar gerçekleştirilebilir. Denemeler ve oturumlar boyunca karaciğeri karşı kola taşıyarak, zorunlu otomasyon görevinde alfa karmaşık hetero M tarafından düzeltilen ve tip LI tarafından kontrol edilen bu süreci videoya alındı.Sonuçlar, mutantların çalışma belleğinin korunduğunu, ancak disk görevindeki performanslarının bozulduğunu göstermektedir; mutant fareler bu görevi yerine getirirken sorun yaşamışlardır. Buna rağmen, bir aylık bir gecikmeden sonra bile, basit öğrenmede herhangi bir bozulma göstermemişlerdir. Öte yandan, mutantlar performans bozukluğu sergilemişlerdir. Labirent Testi, çalışma ve referans belleğini değerlendirmek için en yaygın kullanılan davranışsal testlerden biridir.Kemirgenlerde, çeşitli avantajlar sunan test düzeneğini geliştirdik. İlk olarak, sürgülü kapılar otomatik olarak açılmakta ve fare, her denemeden sonra S kutusuna kendi başına girebilmektedir. MA'nın bu otomasyonu, ödül ve yiyecek dağıtıcısını manuel olarak çalıştırmak için gereken zamanı ve çabayı azaltmaktadır.Laboratuvarımızdaki bir deneyde, aynı anda dört ekip arkadaşı çalışabilmektedir. İkinci olarak, sürgülü kapılar aşağıya doğru açıldığı için cihaz; in vivo mikrodiyaliz, in vivo elektrofizyoloji veya in vivo optogenetik gibi baş kısmından kablolama gerektiren teknikleri kullanmamıza olanak tanır. Son olarak labirent, farenin geri gidememesi ve yalnızca ileriye veya diğer yönlere hareket edebilmesi için tasarlanmıştır; bu da farenin sorunsuz bir şekilde hareket etmesini sağlayabilir.Bu videoda, modifiye edilmiş otomatik takım arkadaşı aparatını ve protokollerimizi tanıttık; yanımda Dr. Hiro Pash var. Laboratuvarımızda Hirotaka, bu filmde modifiye edilmiş otomatik aparat kullanılarak gerçekleştirilen protokolleri uygulamalı olarak gösterecek. Hirotaka, bu geliştirilmiş aparatla yapılan takım arkadaşı testi hakkındaki ilk izlenimin neydi?İlk izlenimim, cihazın ve yazılım programının kullanımının çok kolay olduğu ve testin rahatlıkla gerçekleştirilebileceği yönündeydi. Sizce herkes bu operatörleri ve programı kullanabilir mi yoksa herhangi bir özel eğitim gerekir mi? Kısmen katılıyorum.Operatörleri kontrol etmeyi herkes öğrenebilir. Test prosedürlerini gerçekleştirmek için özel bir eğitim gerekmemektedir. Testi gerçekleştirirken dikkat edilmesi gereken ipuçları veya hususlar var mıdır?Evet. Vücut ağırlığını günlük olarak kontrol ederek, kütle ile verilen gıdaya yönelik motivasyonu korumaya özen gösteriyorum. Motivasyondaki bireysel farklılıklar, takım arkadaşlarının performansında varyasyonlara neden olabilir.

t-maze-forced-alternation-left-right-discrimination-tasks-for

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Lashley III labirent caydırıcı uyaran ya da görsel ipuçları dayanmaz bir rota-öğrenme görevi. Bu nedenle, özellikle yaşlanma fareler ya da başka stres dikkate, öğrenme ve hafıza değerlendirmek için son derece cazip bir seçenek.

Farelerde Lashley III Labirent Düşük stres Rota Öğrenme

Bu protokolün amacı kemirgenlerde uzamsal bilişi araştırmaktır. Çift H su labirenti, öğrenme, pekiştirme ve hafızanın farklı bileşenlerinin yanı sıra hafıza sistemlerinin etkileşimini aydınlatmak için özellikle yararlı olan yeni bir testtir.

Çift H Maze: Kemirgenler A Sağlam Davranış Öğrenme için test ve Hafıza

Dikkat seti değiştiren bilişsel anormallikler birçok psikiyatrik hastalığın temel bir özelliğidir. Burada, farelerde dikkat seti kaydırma yeteneklerinin, yürütücü işlevlerin ve diğer bilişsel yeteneklerin etkili bir şekilde incelenmesi için yeni bir otomatik sistemin geliştirilmesini sunuyoruz.

Fareler için bir Edimsel Intra- / Ekstra boyutlu Set-shift Görev

Bu iletişim kuralı fonksiyonel öğrenme/bellekte boğulma serebral iskemi kalp krizi kaynaklı değerlendirmek için değiştirilmiş bir T-maze açıklar.

Kardiyak Arrest sonra işlevsel hafıza sonuçları değerlendirmek için değiştirilmiş T-Maze kullanan

Bu iletişim kuralı Barnes labirent test dayalı davranış bir tahlil açıklar, nasıl içgüdüsel savunması çalışmaya eylemler kayma çevre bilgi tarafından değiştirilir.

Fareler içgüdüsel savunma sırasında kayma bellek rolünün araştırılması için davranışsal bir tahlil

Bu makalede biz icat ettik otomatik bir T-maze aparat tanıtır ve gecikme dayalı karar verme ve çaba dayalı karar verme ücretsiz hareketli Rodents analiz etmek için bu cihaz bir protokol dayalı.

Otomatik bir T-maze cihazları ve protokol dayalı karar vermede gecikme ve çaba tabanlı ücretsiz taşıma kemirgenler çözümlemek için

Bu iletişim kuralı kayma öğrenme ve hafıza Barnes labirent kullanarak ölçer. Roman bir sıkıntı küçük hanım paradigma lokomotor aktivite ve farelerde prosocial davranışını değerlendirmek için kullanılır.

Kayma öğrenme ve Barnes labirent ve sıkıntı içinde küçük hanım paradigmalar kullanılarak farelerde Prosocial davranış analiz

Motor becerileri, kapsamlı davranış testi dövülmesinin ruh — sosyal etkileşim, depresyon ve anksiyete gibi — ve biliş ateş ile ilgili davranış değişiklikleri farelerde tekrar tekrar değerlendirilmesi için tasarlanmıştır.

Motor becerileri, ruh hali ve biliş farelerde tekrar tekrar değerlendirilmesi için bir davranış Test pil

Mevcut protokol, kemirgenlerde mekansal navigasyon ve davranışsal fenotipleri test etmek için benzersiz bir sistem olan yeniden yapılandırılabilir bir labirenti tanımlamaktadır. Bu labirent sisteminin uyarlanabilirliği, çeşitli deneylerin tek bir fiziksel ortamda yürütülmesini sağlar. Yapısal yeniden düzenlemenin kolaylığı, güvenilir ve tekrarlanabilir deneysel sonuçlar üretir.

Kemirgenlerde Mekansal Navigasyon Testlerinin Yeniden Üretilebilirliğini Artırmak için Yeniden Yapılandırılabilir Bir Labirent Sistemi Kullanmak

Kemirgenler için yapılan davranış deneylerinin çoğu başlangıçta fareler için tasarlanmıştır. Sıçanlar ve fareler arasındaki davranışsal farklılıklar nedeniyle, bazen fareler için modifikasyonlar gerekebilir. Farelerde uzamsal çalışma belleğini test etmek için bir yöntem sunuyoruz ve çalışma belleği görevi sırasındaki stresi en aza indiriyoruz.

Yarı otomatik 8 kollu radyal labirentte fareler için iştah açıcı bir uzamsal çalışma belleği görevi, labirentteki korkulu hafıza ilişkisini azaltır

Öğrenin farelerde çalışma ve referans belleği değerlendirmek için otomatik T-labirent test protokolünü. Bu yöntem, davranışsal nörobilim araştırmalarında bilişsel fonksiyonları güvenilir şekilde ölçer.

T-labirent Zorla Değişim ve Çalışma ve Fareler Referans Bellek değerlendirilmesi için sağ-sol Ayrımcılık Görevler

Daha fazla video keşfet