Name: TSSB, Nöral Hematolojik ve Davranış Bağlantılı Revealing için Hayvan Modelinde Biyobelirteçler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-10-10T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: Öğrenin sıçan modelinde TSSB biyobelirteçlerini, periferik kan ve beyin dokusu arasındaki korelasyonları inceleyerek. Bu yöntem travma sonrası stres bozukluğunun nörobiyolojik mekanizmalarını anlamak için araştırmacılara yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma CDMRP, USUHS Hibeler G188LE, G188MG ve G188QC (HL) ve Travmatik Stres Çalışmaları USUHS Merkezi tarafından desteklenmiştir.

<ol><li>Adrien, J., Dugovic, C., Martin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep-wakefulness+patterns+in+the+helpless+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Sleep-wakefulness patterns in the helpless rat.</a> Physiol. Behav. 49, 257-262 (1991).</li>
<li>Bai, X., Wu, J., Zhang, Q., Alesci, S., Manoli, I., Blackman, M. R., Chrousos, G. P., Goldstein, A. L., Rennert, O. M., Su, Y. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Third-generation+human+mitochondria-focused+cDNA+microarray+and+its+bioinformatic+tools+for+analysis+of+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Third-generation human mitochondria-focused cDNA microarray and its bioinformatic tools for analysis of gene expression.</a> Biotechniques. 42, 365-375 (2007).</li>
<li>Blaszczyk, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Startle+response+to+short+acoustic+stimuli+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurobiol.+Exp.+%28Wars.%29%22%5BJournal%5D)">Startle response to short acoustic stimuli in rats.</a> Acta Neurobiol. Exp. (Wars.). 63, 25-30 (2003).</li>
<li>Braga, M. F., roniadou-Anderjaska, V., Manion, S. T., Hough, C. J., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+impairs+alpha%281A%29+adrenoceptor-mediated+noradrenergic+facilitation+of+GABAergic+transmission+in+the+basolateral+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Stress impairs alpha(1A) adrenoceptor-mediated noradrenergic facilitation of GABAergic transmission in the basolateral amygdala.</a> Neuropsychopharmacology. 29, 45-58 (2004).</li>
<li>Bremner, J. D., Vythilingam, M., Vermetten, E., Anderson, G., Newcomer, J. W., Charney, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+glucocorticoids+on+declarative+memory+function+in+major+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Effects of glucocorticoids on declarative memory function in major depression.</a> Biol. Psychiatry. 55, 811-815 (2004).</li>
<li>Garrick, T., Morrow, N., Eth, S., Marciano, D., Shalev, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychophysiologic+parameters+of+traumatic+stress+disorder+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Psychophysiologic parameters of traumatic stress disorder in rats.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 821, 533-537 (1997).</li>
<li>Garrick, T., Morrow, N., Shalev, A. Y., Eth, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-induced+enhancement+of+auditory+startle%3A+an+animal+model+of+posttraumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Stress-induced enhancement of auditory startle: an animal model of posttraumatic stress disorder.</a> Psychiatry. 64, 346-354 (2001).</li>
<li>Hsiao, Y. H., Su, Y. A., Tsai, H. D., Mason, J. T., Chou, M. C., Man, Y. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+invasiveness+and+aggressiveness+in+breast+epithelia+with+cytoplasmic+p63+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Biol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Increased invasiveness and aggressiveness in breast epithelia with cytoplasmic p63 expression.</a> Int. J. Biol. Sci. 6, 428-442 (2010).</li>
<li>Jiang, X., Xing, G., Yang, C., Verma, A., Zhang, L., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+Impairs+5-HT%282A%29+Receptor-Mediated+Serotonergic+Facilitation+of+GABA+Release+in+Juvenile+Rat+Basolateral+Amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Stress Impairs 5-HT(2A) Receptor-Mediated Serotonergic Facilitation of GABA Release in Juvenile Rat Basolateral Amygdala.</a> Neuropsychopharmacology. , (2008).</li>
<li>Jiang, X., Zhang, Z. J., Zhang, S., Gamble, E. H., Jia, M., Ursano, R. J., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5-HT2A+receptor+antagonism+by+MDL+11%2C939+during+inescapable+stress+prevents+subsequent+exaggeration+of+acoustic+startle+response+and+reduced+body+weight+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">5-HT2A receptor antagonism by MDL 11,939 during inescapable stress prevents subsequent exaggeration of acoustic startle response and reduced body weight in rats.</a> J. Psychopharmacol. , (2009).</li>
<li>Maher, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+deprivation%3A+are+you+a+victim%5BTitle%5D)+AND+%22AAOHN.+J%22%5BJournal%5D)">Sleep deprivation: are you a victim.</a> AAOHN. J. 54, 548(2006).</li>
<li>Maier, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+the+stressor+environment+prevents+the+temporal+dissipation+of+behavioral+depression%2Flearned+helplessness%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Exposure to the stressor environment prevents the temporal dissipation of behavioral depression/learned helplessness.</a> Biol. Psychiatry. 49, 763-773 (2001).</li>
<li>North, C. S., Suris, A. M., Davis, M., Smith, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+validation+of+the+diagnosis+of+posttraumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Toward validation of the diagnosis of posttraumatic stress disorder.</a> Am. J. Psychiatry. 166, 34-41 (2009).</li>
<li>Orr, S. P., Metzger, L. J., Pitman, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychophysiology+of+post-traumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Psychiatr.+Clin.+North+Am%22%5BJournal%5D)">Psychophysiology of post-traumatic stress disorder.</a> Psychiatr. Clin. North Am. 25, 271-293 (2002).</li>
<li>Orr, S. P., Roth, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychophysiological+assessment%3A+clinical+applications+for+PTSD%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Affect.+Disord%22%5BJournal%5D)">Psychophysiological assessment: clinical applications for PTSD.</a> J. Affect. Disord. 61, 225-240 (2000).</li>
<li>Pitman, R. K., Orr, S. P., Shalev, A. Y., Metzger, L. J., Mellman, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychophysiological+alterations+in+post-traumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Clin.+Neuropsychiatry%22%5BJournal%5D)">Psychophysiological alterations in post-traumatic stress disorder.</a> Semin. Clin. Neuropsychiatry. 4, 234-241 (1999).</li>
<li>Servatius, R. J., Ottenweller, J. E., Natelson, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+startle+sensitization+distinguishes+rats+exposed+to+one+or+three+stress+sessions%3A+Further+evidence+toward+an+animal+model+of+PTSD%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Delayed startle sensitization distinguishes rats exposed to one or three stress sessions: Further evidence toward an animal model of PTSD.</a> Biological Psychiatry. 38, 539-546 (1995).</li>
<li>Su, Y. A., Zhang, Q., Su, D. M., Tang, M. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+Mitochondrion-Neuron+Focused+Microarray+%28rMNChip%29+and+Bioinformatics+Tools+for+Rapid+Identification+of+Differential+Pathways+in+Brain+Tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Biol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Rat Mitochondrion-Neuron Focused Microarray (rMNChip) and Bioinformatics Tools for Rapid Identification of Differential Pathways in Brain Tissues.</a> Int. J. Biol. Sci. 7, 308-322 (2011).</li>
<li>Su, D. M., Zhang, Q., Wang, X., He, P., Zhu, Y. J., Zhao, J., Rennert, O. M., Su, Y. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+types+of+human+malignant+melanoma+cell+lines+revealed+by+expression+patterns+of+mitochondrial+and+survival-apoptosis+genes%3A+implications+for+malignant+melanoma+therapy.+Mol%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Two types of human malignant melanoma cell lines revealed by expression patterns of mitochondrial and survival-apoptosis genes: implications for malignant melanoma therapy. Mol.</a> Cancer Ther. , (2009).</li>
<li>Identification of stress-responsive genes, canonical pathways, molecular networks and drug targets in brain tissues of human and animals for systems-biology study of post-traumatic stress disorder. Su, Y. A., Li, H., He, P., Webster, M. J., Zhang, Q., Zhang, L., Wang, X., Su, D. M., Ursano, R. J., Rennert, O. M. The DOD Congressionally Directed Medical Research Programs, the third Military Health Research Forum (MHRF), August 31 - September 3, 2009, Hallmark Crown Center, Kansas City, Missouri, , (2009).</li>
<li>Su, Y. A., Wu, J., Zhang, L., Zhang, Q., Su, D. M., He, P., Wang, B. D., Li, H., Webster, M. J., Rennert, O. M., Ursano, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysregulated+mitochondrial+genes+and+networks+with+drug+targets+in+postmortem+brain+of+patients+with+posttraumatic+stress+disorder+%28PTSD%29+revealed+by+human+mitochondria-focused+cDNA+microarrays%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J+Biol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Dysregulated mitochondrial genes and networks with drug targets in postmortem brain of patients with posttraumatic stress disorder (PTSD) revealed by human mitochondria-focused cDNA microarrays.</a> Int. J Biol. Sci. 4, 223-235 (2008).</li>
<li>Su, Y. A., Yang, J., Tao, L., Nguyen, H., He, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Undetectable+and+Decreased+Expression+of+KIAA1949+%28Phostensin%29+Encoded+on+Chromosome+6p21.33+in+Human+Breast+Cancers+Revealed+by+Transcriptome+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Undetectable and Decreased Expression of KIAA1949 (Phostensin) Encoded on Chromosome 6p21.33 in Human Breast Cancers Revealed by Transcriptome Analysis.</a> J. Cancer. 1, 38-50 (2010).</li>
<li>Yehuda, R., Yang, R. K., Buchsbaum, M. S., Golier, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+cortisol+negative+feedback+inhibition+as+examined+using+the+ACTH+response+to+cortisol+administration+in+PTSD%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Alterations in cortisol negative feedback inhibition as examined using the ACTH response to cortisol administration in PTSD.</a> Psychoneuroendocrinology. 31, 447-451 (2006).</li>
<li>Zhang, Q., Wu, J., Nguyen, A., Wang, B. D., He, P., Laurent, G. S., Rennert, O. M., Su, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanism+underlying+differential+apoptosis+between+human+melanoma+cell+lines+UACC903+and+UACC903%28%2B6%29+revealed+by+mitochondria-focused+cDNA+microarrays%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanism underlying differential apoptosis between human melanoma cell lines UACC903 and UACC903(+6) revealed by mitochondria-focused cDNA microarrays.</a> Apoptosis. 13, 993-1004 (2008).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

TSSB tanısı potansiyel denekler tarafından bildirilen kendi kendine psikiyatrik belirtiler (DSM IV) dayanmaktadır. Hiç iyi tanımlanmış biyolojik anda potansiyel TSSB hastalarının patofizyolojik durumu erişmek için kullanılabilir. TSSB yaşamı travmatik olaylar tehdit ve ana psikiyatrik belirtilerin ilk olaylardan sonra aylar ve hatta yıllarca kurtulan hayatında bugünkü kalır kışkırttığı bir hastalıktır. TSSB olan hastalarda ortaya en belirgin ve inatçı belirtileri hipervijilans, gecikmiş aşırı irkilme tepkisi 14, 15, 16 ve HPA ekseninin belirgin bir uzlaşma vardır. Travmatik stres 24 kesildikten sonra, insanlarda bu belirtiler kalır, ya da üç aylık bir gecikme ile görünür. 150 gram ağırlığındaki sıçanlarda kaçınılmaz kuyruk şok modeli (ITS) - TSSB biyomarkeri çalışmaları için Bizim şimdiki model sağduyuya ve üç sürekli gün (40, 2 mA tailshocks 2 saatlik oturumlar) için tekrarlanır kuyruk şoklara kullanır. Bu ITS modeli vardırönemli ölçüde PTSD 17 patofizyolojisi, 7, 4, 10 taklit etmek için gösterilmiştir. Bizim laboratuvar ve diğer laboratuarları sıçanlarda stres ITS modeli TSSB vakalarında 17, 7, 10, 9 bulunanlara benzer davranışsal ve nörobiyolojik değişiklikler neden olduğunu doğruladılar. Özellikle, bu gerilmiş sıçanlar (1) ile karşılaştırıldığında insanlarda sıçan yaşamının sıkıştırılmış zaman ölçeği belirli bir stres bırakıldıktan sonra birkaç gün görünen bir gecikmeli ve aşırı irkilme yanıtı, TSSB hastada semptomların 1-3 ay geciktirme ile karşılık gelen gösterirler (DSM-IV-TR TSSB Criterian D / E 13), (2) gonadotropin (HPA) arasında uzlaşma gösteren birçok (10) gün, ve (3) engelli vücut ağırlık artışı için geliştirilmiş plazma kortikosteron (CORT) sonrası stres TSSB metabolik düzenleme disfonksiyon karşılık bırakma. Tilki koku, yırtıcı maruz kalma veya potentiation irkilme tepkisi, exhi korktuğu literatürde hiçbir kanıt yokturBiraz bu kalıcı davranışsal ve nöroendokrin fenotipleri TSSB ile ilişkili. Tek bir stres oturumu (1DS) maruz Sıçanlar geçici sergiledik, ama 3DS sıçanlar 17 tarafından görüntülenen kalıcı anormallikler mevcut deney 3DS ve 1DS sıçan 4, 7, ve stresör kesildikten sonra 10 gün irkilme tepkisi göre değil. Önceki çalışmaları ile uyumlu olarak, sıçanlarda artmış bazal plazma CORT seviyeleri ilk gün sonrası stres 17 sergiledi vurguladı. Bu CORT miktar 1DS grubundaki sıçanlardan daha 3DS sıçanlarda CORT daha yüksek seviyeleri ile bir stres poz sayısını duyarlı idi. Irkilme sensitizasyon sadece 3DS sıçanlara 10 gün sonrası stres, belirgin olur, oysa irkilme yanıtı için olduğu gibi, 1DS sıçanlar, bir aşırı irkilme yanıtı 7 gün sonrası stres, sergilerler. Böylece, tetikleyici kesilmesinden sonra bir aşırı irkilme yanıtı ortaya gerilme oturum poz sayısı ile ilgili olduğu görülmektedir. 3DS stresli modeli görünüyorTSSB belirtileri ve stres bırakılmasını takiben zamanlama ile ilişkili anahtar ölçülebilir davranışsal fenotipleri ile ilişkili biyobelirteçlerin değişmiş ifadesini anlamak için yararlı olabilir. Genomik sonuçlar büyük ölçüde TSSB dahil kompleks ve multifaktöryel nörolojik bozukluklar, altta yatan moleküler mekanizmalar sistemleri-biyolojik çalışma ve anlaşılmasını kolaylaştıracak diferansiyel yolları, gen ve protein belirteçler, tespit etmek rMNChip ve biyoinformatik araçlar uygulamak için prensip kanıtı sundu. Bizim paradigma bilişsel ve TSSB daha karmaşık davranışsal yönleri dalmak değil, biz ITS modeli 1 o değişmiş uyku alışkanlıkları zorluk düşme ve uykuda kalmak ve TSSB hastalarında 11 (DSM-IV-TR TSSB kabuslar karşılık unutmayın Kriter D 13), ve kaçış / kaçınma ITS modeli öğrenme ve iştahlı görevin öğrenme eksiklikleri <supYoksul konsantrasyonları ve TSSB 5 (DSM-IV-TR TSSB Kriterleri C 13) hafıza noksanlığı&gt; 12 karşılık gelir. Şimdiki model TSSB karakteristik anahtar semptomları ile ilişkilidir ve merkezi, mekanistik biyobelirteçler, hastaların alınabilir TSSB periferik biyobelirteçleri arasında ilişki için iyi bir model, yapamam 6. sağlar.

tssb, nöral hematolojik ve davranış bağlantılı revealing için hayvan modelinde biyobelirteçler

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Travma Sonrası Stres Bozukluğu patofizyolojisi evrimi temsil biyolojik tanımlanması (TSSB) objektif tanı için değil, aynı zamanda travma terapötik etkinlik ve esnekliğinin değerlendirilmesi için değil sadece, hayati önem taşımaktadır. Yürütülen araştırma konuları &#39;kan, tükürük, idrar ve postmortem beyin dokularından biyolojik örnekler kullanarak travmatik stres kaynaklı proteinler, transcriptomes, genomik varyansları ve genetik modülatörleri dahil TSSB için biyobelirteçler, tespit yöneliktir. Ancak, TSSB psikiyatrik belirtiler ile ilişkili değişmiş beyin fonksiyonları ile periferik veya postmortem örneklerin içinde bu biyobelirteç moleküllerin korelasyon çözümlenmemiş kalır. Burada, böylece mekanik ve pathogno olan TSSB merkezi biyomarkerların gerekli ilişki, sağlanması, periferik kan ve orta beyin biyolojik yanı sıra, davranışsal fenotip hem de toplanmış ve ölçülebileceği TSSB&#39;nin bir hayvan modeli mevcutcarlosclint ancak hangi olabilir, periferik biyolojik ve davranışsal fenotipleri ile, insanlardan toplanan edilemez. Sıçanlarda kaçınılmaz kuyruk şok modeli (ITS) - TSSB Bizim hayvan modeli kısıtlama ve üç sürekli gün boyunca tekrarlanan kuyruk şoklara kullanır. Bu ITS modeli TSSB 17, 7, 4, 10 patofizyolojisi taklit eder. Biz ve diğerleri ITS modeli TSSB vakalarında 17, 7, 10, 9 bulunanlara benzer davranışsal ve nörobiyolojik değişiklikler neden olduğunu doğruladılar. Özellikle, bu gerilmiş sıçanlar (1) ile karşılaştırıldığında insanlarda sıçan yaşamının sıkıştırılmış zaman ölçeği belirli bir stres bırakıldıktan sonra birkaç gün görünen bir gecikmeli ve aşırı irkilme yanıtı, TSSB hastada semptomların 1-3 ay geciktirme ile karşılık gelen gösterirler (DSM-IV-TR PTSD Criterian D / E 13), (2) artmış plasma gonadotropin (HPA) arasında bir uzlaşma gösteren birkaç gün boyunca kortikosteron (CORT), ve (3) gecikmiş boMetabolik regülasyon disfonksiyonu gösteren stres kesilmesinden sonra dy kilo. Bu model için kullanılan deneysel paradigmalar şunlardır: akustik irkilme tepkisi (ASR) ve vücut kitle grafik ölçümü ile tayin sıçan (1) öğrenilmiş çaresizlik paradigma; bölgeler ve çekirdekleri içine sıçan beyin (2) mikrodisseksiyon; ( CORT kan düzeyleri için 3) enzim-linked immunosorbent assay (ELISA), (4), bir gen mikroarray artı ilgili biyoinformatik araçlar 18. RMNChip adlandırılan bu mikroarray, özellikle TSSB dahil olduğu varsayılan nöronal biyoenerjetik ele şekilde sıçan mitokondriyal ve mitokondri ile ilgili nükleer genler üzerinde duruluyor.

Biz TSSB hastalarının karakteristik nöroendokrin fonksiyonlarda kalıcı değişikliklere ve gecikmiş uzun vadeli, abartılı bir korku tepkisi, ortaya travma sonrası stres bozukluğu (TSSB) bir sıçan modelinde tarif. Hayvan modeli ve burada tarif edilen yöntemler, fakat mekanistik çevresel beyaz kan hücrelerindeki biyolojik olan hastalarda ölçülemez beyin çekirdeklerinde biyo, kutu arasında ilişki için yararlıdır.

TSSB, Nöral Hematolojik ve Davranış Bağlantılı Revealing için Hayvan Modelinde Biyobelirteçler

Travma Sonrası Stres Bozukluğu'nun (TSSB) patofizyolojik evrimini temsil eden biyobelirteçlerin tanımlanması, yalnızca ... için değil, aynı zamanda ...

Bu prosedürün genel amacı, bir PTSD hayvan modeli oluşturmaktır. Bu işlem, hayvanın fiziksel olarak strese sokulması ve ardından beslenme davranışının ve irkilme tepkisinin karakterize edilmesiyle gerçekleştirilir. Ayrıca, dolaşımdaki kortizol seviyelerinin ölçümü için bir prosedür de gösterilmektedir.Nihayetinde, beyaz kan hücreleri ve travmaya maruz kalmış hayvanlar tarafından sunulan biyobelirteçler, aynı biyobelirteçlerin beyin dokusundaki ekspresyonu ile ilişkilendirilebilir. Bu nedenle, söz konusu model PTSD çalışmaları için yeni yollar açmaktadır. PTSD benzeri sendromu olan bir hayvan modeli kullanmaktayız. Bu hayvan modelini kullanmak, PTSD'nin nörobiyolojik mekanizmalarını araştırmamıza olanak tanır; bu hayvan modelinde ortaya çıkan nörobiyolojik belirteçlerin sendrom veya PTSD ile ilişkili olduğu gösterilmiştir.Savaş travmasına maruz kalan askerlerin belki üçte birinde aşırı korku, agresiflik veya diğer sıkıntı semptomları gelişecektir. Tam olarak anlamadığımız nedenlerle, bu en savunmasız askerleri, onlara daha fazla destek olabilmek için henüz savaşa girmeden önce, mümkün olan en erken aşamada tespit edecek yöntemler belirlememiz gerekmektedir. Travma sonrası stres bozukluğunun temel bileşenlerinden biri, bazen irkilme olarak adlandırılan hiper uyarılmışlık ve korku yanıtıdır.Hem insanlarda hem de hayvan modellerimizde meydana gelen bu özel yanıtı anlamak, bu bozukluğa dair bilgimizi geliştirmemize yardımcı olacaktır. Dr. Lee'nin laboratuvarı, bu abartılı korku yanıtının hayvan modellerini anlamaya odaklanmıştır. Benim çalışmam ise PTSD biyobelirteçleri üzerinedir.Bu PTSD biyobelirteçleri, hastalardan alınan periferik beyaz kan hücrelerinden ve ölüm sonrası beyin dokusundan elde edilmiştir. Biyobelirteçlerin yaşayan beyinlerle korele edilmesi gerekmektedir. Bu korelasyon yalnızca bir PTSD hayvan modelinde gerçekleştirilebilir.Duygular, beynin farklı bölgeleri tarafından farklı şekillerde kapsanır. Bir PTSD hayvan modeline sahip olmak, beynin bu farklı bölgelerinin çıkarılmasını mümkün kılar. Biyobelirteçlerin bağımsız keşfi için, ağırlıkları 150 ile 200 gram arasında olan 32 erkek albino bra dolly sıçan seçin.Her hayvan, deneyden önceki üç gün, deney sırasındaki üç gün ve deneyden sonraki üç gün boyunca çevresel koşulların tutarlı tutulmasına titizlikle dikkat edilerek ayrı ayrı barındırılmalıdır. Her hayvanın vücut ağırlığının yanı sıra yiyecek ve su tüketimi kaydedilmeli, tüm hayvanlar hayvan tesisine ve akustik irkilme odasına alıştırılmalıdır. Deneyden önceki üç gün boyunca, her hayvanın deneyin başladığı günden bir gün önce, herhangi bir ek uyaran olmaksızın günde beş dakika irkilme odasında vakit geçirmesine izin verilir. Akustik irkilme yanıtının bazal ölçümü yapılır.Ardından, 32 hayvanı üç test günü boyunca kontrol ve deney grupları olarak kullanılacak iki normalize gruba ayırmak için bazal yanıt ve ağırlık değerleri kullanılır. Deney grubuna stres uygulanır. Günlük stres, sabah saatlerinde kısıtlama ve kuyruk şokları ile verilir.Ardından, hissedilir ancak ağrısız bir akım düzeyi belirlemek için, elektrot jelini kullanarak bir elektrodu sıçanın kuyruğuna bağlayın ve elektrot klipsini kuyruğun kan dolaşımını etkilemeyecek şekilde sabitleyin. Dr. Lee, başlangıçta elektrodu sıçanın kuyruğundan daha hassas olan kendi parmağına yerleştirmiş ve akımı, ağrılı veya zarar verici olmayacak ancak itici bir düzeyde ayarlamıştır. Üç günlük stres testinden sonraki yedinci, 14. ve 21. günlerde.Akustik irkilme yanıtı, ses yalıtımlı bir oda içerisindeki ağırlığa duyarlı platformlardan oluşan kalibre edilmiş bir sistem kullanılarak ölçülür. Sistem ilk kurulduğunda, bir gerinim ölçer olan dönüştürücünün kalibre edilmesi gerekir; bunun için bağlayıcı DC moduna getirilir, böylece bağlayıcının çıktısı platformdan gelen girdiyi doğrudan takip eder ve çıktı, platform üzerindeki statik ağırlıklara göre kalibre edilir. Test aşamasında ise dönüştürücü, AC bağlama moduna getirilir.Böylece, irkilme tepkisini gösteren tek hızlı kuvvet değişimi çıktı olarak alınır. Test, rastgele bir sırayla sekiz kez uygulanan altı tip uyaran içerir. Bu uyaranlar arasında, ön uyaranlı veya ön uyaransız 100 desibel ton ve ön uyaranlı veya ön uyaransız 110 desibel ton yer almaktadır.Yalnızca ön uyaranlar ve sıfır desibel kontrolü için denemeler arası aralıklar 15 ile 25 saniye arasında rastgele atanır. Hayvanın hareketleri, sekiz denemenin her birinde irkilmeyi tetikleyen uyarının başlangıcından sonraki 200 milisaniye içinde meydana gelen maksimum tepki olarak kaydedilir. Altı uyarının her biri için maksimum değer kaydedilir.İrkilme tepkisi verileri, hayvanın aynı gün ölçülen vücut ağırlığına bölünür. Bu nedenle tüketim verileri ve vücut ağırlığı, yedi farklı günde ölçülür. Stres sonrası birinci, 14., 21. ve 30. günlerdeki stres testlerinden sonra, hafif izofluran anestezisi altında kuyruk veninden heparinli tüplere kan alınır ve analiz aşamasına kadar dondurulur. Plazma kortizol seviyelerini analiz etmek için aktif bir RAC core Eliza kullanın.Mikrotitrasyon şeritlerini işaretleyip sıçan çekirdek enzim konjuge çözeltisini karıştırarak deneyi hazırlayın. Hazırlık tamamlandığında, ELI A plakası kuyucuklarına 20 µL standart, kontrol ve bilinmeyen örnekleri pipetleyerek deneye başlayın. İkinci olarak, her kuyucuğa sadece beş ila 10 saniye boyunca 100 µL enzim konjuge çözeltisi ekleyin.Çözeltileri karıştırmak için plakaya hafifçe vurun. Üçüncü olarak, her kuyucuğa 100 µL sıçan çekirdek enzim konjugatı ekleyin ve plakayı oda sıcaklığında bir saat boyunca çalkalayarak inkübe edin. İnkübasyonun ardından, her kuyucuğu yıkama çözeltisi ile beş kez aspire etmek ve yıkamak için otomatik bir mikroplaka yıkayıcı kullanın.Ardından, plakayı emici bir malzeme üzerine ters çevirerek kurulayın. Sonrasında, yarı otomatik bir dağıtıcı kullanarak her kuyucuğa 100 µL TMB kromojen çözeltisi ekleyin. Son olarak, her kuyucuğa 100 µL durdurma çözeltisi ekleyin ve plakayı elinizle beş ila 10 saniye boyunca sallayın.Stres testinden sonra 30 dakika içerisinde veri toplama işlemine geçildi, kontrol ve deney grupları arasındaki yiyecek ve su tüketimi kaydedildi. Stres sonrası vücut ağırlığı ölçümleri, deney grubunda kontrollere kıyasla ağırlık artışının azaldığını ortaya koydu. Plazma örnekleri, hayvanlarda kortizol seviyelerinin yükseldiğini gösterdi.Stres testi sonucunda, deney hayvanlarının irkilme tepkisi kontrol grubuyla önemli ölçüde farklılık gösterdi. Biyobelirteç taraması, stresli hayvanlarda beyin dokusu ile beyaz kan hücresi ekspresyonu arasında, kontrol grubunda görülmeyen özgün korelasyonlar olduğunu ortaya çıkardı. Bu belirteçler, klinik değerlendirme ile birlikte sonraki deneyler için adaylar olarak kullanılacaktır.Nörobiyolojik ölçümler, gelecekte PTSD'nin patofizyolojik sürecini daha nesnel bir şekilde tanımlayacaktır. Bu hayvan modelinden biyobelirteçlerin keşfi, tanısal öneme sahip olacaktır. Ayrıca bu durum, PTSD'li hastalar için daha etkili farmakoterapi yöntemlerinin geliştirilmesini sağlayacaktır.

biomarkers-an-animal-model-for-revealing-neural-hematologic

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kan örnekleri, in vivo fizyolojik durumların veya hastalıkların biyobelirteçlerini değerlendirmek için yararlıdır. Burada, sıçandaki lateral kuyruk damarından kan örneği almak için metodolojiyi açıklıyoruz. Bu yöntem, minimum ağrı ve invazivlik ile hızlı numuneler sağlar.

Rat Yanal Kuyruk Ven gelen Kan Örnekleme

Burada sunulan davranış testleri amacı fonksiyonel açıkları Rat sonra travmatik beyin hasarı tespit etmektir. Dört belirli testleri içinde zaman zaman bir yıl sonra yaralanma uzanan belirli beyin bölgeleri hasar yansıtacak şekilde davranış açıkları tespit sunulmaktadır.

Travmatik beyin hasarı sonra Sıçanlarda algılama davranış açıkları

Burada fareler öngörülemeyen kronik hafif stres iletişim kuralı mevcut. Bu iletişim kuralı uzun vadeli bir depresif benzeri fenotip indükler ve davranışsal ve neuromolecular depresif benzeri açıkları ters içinde sözde antidepresanlar etkinliğini değerlendirmek için sağlar.

Anhedonia farelerde Inducing için öngörülemeyen kronik hafif stres Protokolü

Bu protokol yeni bir davranış testi açıklar-domuzların ev kalemindeki insan yaklaşımı testi-subconcussive travmatik beyin yaralanması sonrasında laboratuar domuzlarının fonksiyonel açıkları tespit etmek.

Laboratuvar için noninvaziv, kalem içi yaklaşım testi-domuzlar barındırılıyor

Bu protokol, hafif travmatik beyin hasarına nöroinflamatuar ve hemodinamik yanıtı karakterize etmek ve bu verileri kısmi en küçük kareler regresyonunu kullanarak çok değişkenli bir sistem analizinin bir parçası olarak entegre etmek için yöntemler sunmaktadır.

Travmatik Beyin Hasarına Nöroinflamatuar ve Hemodinamik Yanıtın Sistem Analizi

Burada, fareler kullanılarak tekrarlanan düşük yoğunluklu patlama maruziyetleri üretmek için yöntemler sunulmaktadır.

Farelerde Yüksek Derecede Tekrarlayan Düşük Seviyeli Patlama Maruziyetinin Modellenmesi

Bu protokol, kutunun altındaki bir sensörden hızlanma verilerini toplayarak ön darbe inhibisyonunu (PPI) değerlendirmek için mikrodenetleyici tabanlı bir davranış kutusu sunar. Bu veriler, davranışsal bozukluklar üzerine nörofizyoloji çalışmalarını ilerletmek için verileri nöronal aktivite ile senkronize etmek için ek bir yöntemle sosyal olarak izole edilmiş sıçanlarda duyusal geçit eksikliklerini değerlendirir.

Psikiyatrik Hayvan Modellerinde Prepulse İnhibisyonu ve Nöral Aktiviteyi Değerlendirmek için Davranışsal Bir Kutu Geliştirme

Langendorff aygıtını içeren çoğu çalışma, daha büyük memeliler için sistemlerin artan karmaşıklığı nedeniyle küçük hayvan modelleri kullanır. İnsanlar da dahil olmak üzere bir dizi türde kullanıma ve nispeten kolay veri toplamaya izin veren büyük hayvan modelleri için bir Langendorff sistemini tanımlıyoruz.

Büyük Hayvan Modelleri için bir İzole Çalışma Kalp Sistemi

GL261 glioma hücreleri, glioblastomun yararlı bir immünokompetan hayvan modelini sağlar. Bu protokolün amaçları, in vivo biyolüminesans görüntüleme kullanarak intrakraniyal tümör büyümesini izlemek için uygun teknikleri göstermek ve glioblastom tedavisi için tümör immünolojisi ve immünoterapötik yaklaşımları incelemek için lusiferaz ile modifiye edilmiş GL261 hücrelerinin faydasını doğrulamaktır.

Glioblastoma&#39;nın için bir Immünkompetan Hayvan Modeli Biyoparlaklık Görüntüleme

Beyin sarsıntısı, travmatik beyin hasarının en yaygın tipini sunar. Bu nedenle, hastalarda bir yaralanmanın önemli özelliklerini çoğaltan tekrarlayan bir sarsıntılı hayvan modeli, sarsıntıyı titiz, kontrollü ve verimli bir şekilde incelemek için bir araç sağlayabilir.

Farelerde Bir Tekrarlanan Concussive Kafa Travması Modeli

Öğrenin sıçan modelinde TSSB biyobelirteçlerini, periferik kan ve beyin dokusu arasındaki korelasyonları inceleyerek. Bu yöntem travma sonrası stres bozukluğunun nörobiyolojik mekanizmalarını anlamak için araştırmacılara yardımcı olur.

TSSB, Nöral Hematolojik ve Davranış Bağlantılı Revealing için Hayvan Modelinde Biyobelirteçler

Daha fazla video keşfet