Name: Retina Bölüm morfometrik Analizleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 33 s
Description: Öğrenin retinanın morfometrik analiz yöntemlerini; iç çekirdek tabakası kalınlığı ölçümü, retinal ganglion hücre sayımı ve boyut analizi. Bu teknikler nörodejeneratif hastalıklarda görsel bilgi iletimini anlamak için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu laboratuvarda göz araştırma çalışmaları Amerikan Sağlık Yardımcısı Vakfı, Açelya (1972) Bağış Fonu ve HKU Küçük Projeler Fonu (20097176185) tarafından desteklenmektedir.

1. Araçlar Mikroskop, Nikon Stereo Araştırmacı, MBF Bioscience - MicroBrightField, Inc 2. Hazırlık <ol><li> Herhangi bir morfometrik analiz çalışmaya başlamadan önce, her bir retina örneği 4 mikron kalınlığında kesitler ve H &amp; E boyama uğrar. </li><li> Üst periferal bölgesi, üst merkezi bölge, düşük periferal bölgeye ve alt merkezi bölge - retina bölümünde 4 bölgeye ayrılmaktadır. </li><li> Bölgelerde tanımladıktan sonra, her bölgenin bir görüntü Nikon parlak ışını mikroskop altında 10x40 büyütülerek elde edilir. </li><li> Şimdi, retinanın morfometri analiz etmek için hazırız. </li></ol> 3. INL kalınlığı ölçümü <ol><li> Her bir bölge içinde INL kalınlığının dört ölçümün ölçüldü. Dört satır INL dış sınırına kontur başlangıca dik çizilecektir. </li><li>Stereo Investigator adlı yazılımı açın ve Ana Araç Çubuğu ile 40x Lens seçin. </li><li> Sekmesinde "File" altında "Resim Aç" seçeneğini seçin. Analiz etmek istediğiniz bir arzu retina bölgenin bir görüntü seçin. </li><li> Ana Araç Çubuğu Açılan liste kutusundan kontur çizgisi türünü seçin ve "Auto Move" düğmesine basın. </li><li> Sağ izleme penceresinde tıklatın ve "Basit tıklayın İzleme" seçeneğini seçin. </li><li> INL iç sınırı boyunca kontur çizgi çizin. </li><li> Çizim yapılır, sağ izleme penceresinde tıklatın ve "Open End Kontur" seçeneğini seçin. </li><li> Işaretleyici Araç çubuğunda bir işaretleyici seçin ve kavşak noktalarında işaretleri ekleyebilirsiniz. </li><li> Tüm işaretleri ekledikten sonra, Marker Araç Çubuğu de işaretleyici simgesi kaldırın. </li><li> Belirteçlerin birinin merkezinde bir imleç yerleştirin. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3377/3377fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 1"><ol start="11"><li> "Hızlı SeçAraçlar "" sekmesi altında "Açı ölçün. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3377/3377fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 2"><ol start="12"><li> Sağ izleme penceresinde tıklayın ve "Sürekli" seçeneğini kaldırın. </li><li> Birinci çizgi parçasının bir uç için seçilen işaretleyici bitişik olan bir işaretleyici, merkezinde tıklaması ile bir açı ölçün. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3377/3377fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 3"><ol start="14"><li> Ardından, ilgili belirteç merkezine fareyi tekrar tıklayın. </li><li> INL dış sınırına lastik bant hattı uzatın. </li><li> 90 ° ulaşılana kadar açısını ayarlayın. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3377/3377fig4.jpg" alt="Şekil 4" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 4"><ol start="17"><li> Istenilen konumda sol tıklayın. Bir açı ölçümü gösteren bir iletişim kutusu tıklayın hemen sonra açılacaktır. </li><li> BasınYine fare tutarak "Enter" tuşuna. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3377/3377fig5.jpg" alt="Şekil 5" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 5"><ol start="19"><li> Bir çizgi bir ucundan itibaren yeni seçilen sonuna kadar çekilir, böylece izleme penceresinin tıklayın bırakılır. </li><li> Sağ izleme penceresinde tıklayın ve "Open End Kontur" seçeneğini seçin. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3377/3377fig6.jpg" alt="Şekil 6" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Şekil 6"><ol start="21"><li> Daha önce tarif edildiği gibi aynı şekilde farklı pozisyonlarda diğer çizgi çizer. </li><li> Bütün çizgiler çizdikten sonra, düzenleme modunu seçin ve buna göre 4 çizgi parçaları yeniden adlandırın. </li><li> Dört ölçümleri "Kontur Ölçme" butonuna basarak elde edilebilir. </li><li> Bu 4 ölçüm seçin ve "Panoya Kopyala" tıklayarak bir tabloya yapıştırabilirsiniz. </li><li> Sekmesini seçin "Dosya" nın altında "Farklı Kaydet". Izleme verileri bir veri dosyası olarak kaydedilebilir. </li></ol><ol><li> Sekmesinde "File" altında "Resim Aç" seçeneğini seçin. Analiz etmek istediğiniz bir arzu retina bölgenin bir görüntü seçin. </li><li> Ana Araç Çubuğu Açılan liste kutusundan kontur çizgisi türünü seçin. </li><li> Sinir lifi tabakası (NFL) sınır boyunca bir kontur çizgi çizin. </li><li> Seçeneği "End Open Çevresi" ile izleme End. </li><li> Her sonunda bir hattın ucunda marker ucuna yakın konumda başka bir ekleyin. </li><li> Işaretleyici Araç çubuğunda işaretleyici simgesi kaldırın. </li><li> Ucunda belirteçlerin merkezinde bir imleci yerleştirin. </li><li> Sekmesinde "Araçlar" altında "Hızlı Measure Angle" seçeneğini seçin. </li><li> Sağ izleme penceresinde tıklayın ve "Sürekli" seçeneğini kaldırın. </li><li> Lastik bant hatları ayarlayın ve 90 ° lik bir açı ölçer. </li><li> Bir iletişim kutusu kadar uzattı sonra "Enter" tuşuna basın. </li><li> Sol tıklama tyeni bir satır dik ucundan uzatılabilir böylece o pencere izleme. </li><li> Bir başka ucunda aynı şekilde yeni bir çizgi çizin. </li><li> İki sınırları RGCs sayısı sayılır, içinde oluşturulur. </li><li> Hücre dokunuşlar sayılmaz bir dışlama çizgisi olarak bir sınırı seçin. </li><li> Işaretleyici bir türünü seçin ve her canlı hücre bir takın. </li><li> Ölü hücreleri için bir belirteç başka bir türü seçin. </li><li> Yerleştirilen işaretleri her tür sayısı işaretleyici Araç çubuğunda buna göre işaretleyici simgesi yanında görüntülenir. </li><li> Düzenleme modunu seçin ve kontur temel almak. Sağ izleme penceresinde tıklatın ve hat yeniden adlandırın. </li><li> Kontur taban uzunluğu "Kontur Ölçme" butonuna basarak elde edilebilir. </li><li> Hücrelerin sayısının daha sonra uzunluğunun mm başına ifade edilebilir. </li><li> Sekmesini seçin "Dosya" nın altında "Farklı Kaydet".izleme ve marker veriler bir veri dosyası olarak kaydedilebilir. </li></ol> 5.. Bir RGC hücre hücre boyutu Ölçme <ol><li> Sekmesinde "File" altında "Resim Aç" seçeneğini seçin. Analiz etmek istediğiniz bir arzu retina bölgenin bir görüntü seçin. </li><li> Canlı bir hücreye Zoom ve Ana Araç Çubuğu Açılan liste kutusundan kontur çizgisi türünü seçin. </li><li> Hücrenin çevresi boyunca bir kontur çizgi çizmek. </li><li> Sonunda ilgili olarak, sağ izleme penceresini tıklatın ve "End yakın kontur" seçeneğini seçin. </li><li> Hücre alanı Kontur Ölçüm iletişim kutusundaki Alan kalemi altında gösterilir. </li></ol>

<ol><li>Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-Methyl-D-Aspartate+%28NMDA%29%C3%A2%E2%82%AC%E2%80%9CInduced+Apoptosis+in+Rat+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)â€“Induced Apoptosis in Rat Retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).</li>
<li>Lam, T. T., Abler, A. S., Tso, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+and+caspases+after+ischemia-reperfusion+injury+in+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Apoptosis and caspases after ischemia-reperfusion injury in rat retina.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 40, 967-975 (1999).</li>
<li>Luo, X. G., Chiu, K., Lau, H. S., Lee, V. W. H., Yung, K. K. L., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Selective+Vulnerability+of+Retinal+Ganglion+Cells+in+Rat+Chronic+Ocular+Hypertension+Model+at+Early+Phase%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">The Selective Vulnerability of Retinal Ganglion Cells in Rat Chronic Ocular Hypertension Model at Early Phase.</a> Cellular and Molecular Neurobiology. 29 (8), 1143-1151 (2009).</li>
<li>Han, Y. S., Chung, I. Y., Park, J. M., Yu, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+citicoline+on+retinal+cell+damage+induced+by+kainic+acid+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of citicoline on retinal cell damage induced by kainic acid in rats.</a> Korean J. Ophthalmol. 19, 219-226 (2005).</li>
<li>Hernandez, M., Urcola, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+ganglion+cell+neuroprotection+in+a+rat+model+of+glaucoma+following+brimonidine%2C+latanoprost+or+combined+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal ganglion cell neuroprotection in a rat model of glaucoma following brimonidine, latanoprost or combined treatments.</a> Exp. Eye Res. 86, 798-806 (2008).</li>
<li>Chan, H. C., Chang, R. C. C., Ip, A. K. C., Chiu, K., Yuen, W. H., Zee, S. Y., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+Lycium+barbarum+Lynn+on+protecting+retinal+ganglion+cells+in+an+ocular+hypertension+model+of+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of Lycium barbarum Lynn on protecting retinal ganglion cells in an ocular hypertension model of glaucoma.</a> Experimental Neurology. 203, 269-273 (2007).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

1. Daha doğru bir kalınlığı ölçümü nasıl elde edilir? Bu butonu "Zoom" e tıklayarak görüntüyü büyütmek ve izleme penceresinde sol tıklama yapabilirsiniz. INL sınır açıkça görülebilir. Çizginin ucu INL dış sınırında değilse, biz Düzenleme modu altında çizgi ayarlayabilirsiniz. Ilgili satırı alıp sonra sağ izleme penceresi tıklayın ve "Seçilmiş Kontur Nokta Ekle". Eklenen noktası aynı hat boyunca olmalıdır sırada bir nokta dış sınırında eklenebilir. Daha sonra, orijinal noktası silmek için olan v...

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/video/3377">Morphometric Analyses of Retinal Sections</a>. There was an error with an author's name.

Erratum: Morphometric Analyses of Retinal Sections

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Tip </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> Stereo Investigator </td><td> MBF Bioscience Analiz Yazılımı </td><td> MicroBright Alan </td><td></td></tr><tr><td> Mikroskop </td><td> Olympus BX51 </td><td> Olympus Corporation </td><td> BX51 </td></tr></tbody></table>

retina bölüm morfometrik analizleri

Morphometric Analyses of Retinal Sections

Retinal bölümlerin morfo analizleri retinal hastalıklar inceleyerek kullanılmıştır. Örnekler için, nöronal hücrelerde önemli ölçüde N-metil-D-aspartat ile sıçan modelinde retina ganglion hücre tabakası (RGCL) kayboldu (NMDA) eksitotoksisite 1, retinal iskemi-reperfüzyon yaralanması 2 ve glokom 3-indüklenen. INL ve iç pleksiform tabakası azaltılması (IPL) kainik asit-aracılı glutamat eksitotoksi 4 maruz sıçan gözünde sitikolin tedavisi ile tersine döndü kalınlıkta. RGC yoğunluğu ve soma boyutlarda Alterasyon göziçi basınç 3,5,6 gözlerde farklı ilaç tedavileri ile gözlenmiştir. Bu nedenle, retina morphometries analiz objektif yöntemlerle sahip retinal patolojiler ve tedavi stratejilerinin etkinliğini değerlendirmek büyük önem olabilir. Retina yapısı çoklu katmanlar ve nöronlar exi birkaç farklı olduğunuretinada st. Gibi farklı katmanlardan hücre sayısı, hücre boyutu ve kalınlığı gibi retina morfometrik parametreler hücre kültür sistemi daha karmaşıktır. Erken, bu parametrelerin diğer ticari görüntüleme yazılımı kullanılarak tespit edilebilir. Değerleri göreceli değerinin normalde, ve kesin bir değere değişen daha doğru hesaplama gerekebilir. Ayrıca, hücre boyutu ve morfolojisi izleme, özellikle kronik glokom modeli, doğru ve istatistik analiz için yeterince hassas olmayabilir. Bu protokolde kullanılan ölçümler daha hassas ve kolay bir şekilde sağlanmaktadır. Ve hücre çizgisi ve büyüklüğü mutlak uzunluğu, doğrudan veya diğer dosyaları kopyalanacak kolay kaydedilmiştir. Örneğin, INL yılında iç ve dış en çekirdeklerin marjı takip ve kalınlığını ölçmek için 90 derecelik bir açı çizmek için yazılım kullanarak bir çizgi oluşturdu. Yazılım yardımı olmadan, belki eğik çizgi ve retina kalınlığı değişen olabilir ikenBireysel gözlemciler arasında tekrarlanabilir olmayabilir. Buna ek olarak, RGCs sayısını ve ayrıca yoğunluğu belirlenebilir. Bu protokol başarıyla, retinanın özellikleri miktarlarının değişkenliği azalır minimal değişiklikler tespit hassasiyetini artırır. Bu video retina bölümleri morfometrik analizler üç tip gösterecektir. Bunlar, INL kalınlığının ölçülmesi RGCs sayısı miktarının ve mutlak değerinin RGCs boyutları ölçüm içerir. Bu üç analizleri Stereo Araştırıcı (- MicroBrightField, Inc MBF Bioscience) ile gerçekleştirilir. Tekniği morfometrik analizler için basit ama bilimsel bir platform sunabilir.

Bu video retina ganglion hücrelerinin sayısı (RGCs) ve niceleme RGCs boyutları ölçülerek, iç nükleer tabaka kalınlığı ölçümü de retinanın morfometrik analizler, üç tip gösterir. Tekniği morfometrik analizler için basit ama bilimsel bir platform sunabilir.

Retina Bölüm morfometrik Analizleri

Retinal kesitlerin morfometrik analizleri, retinal hastalıkların incelenmesinde kullanılmıştır. Örneğin, ...'da nöronal hücrelerde anlamlı bir kayıp görülmüştür.

Merhaba, ben Hong Kong Üniversitesi Anatomi Bölümü, Nörodejeneratif Hastalıklar laboratuvarından Regina. Bugün size retinal kesitlerin progresyon analizinin nasıl yapılacağını göstereceğim. Başlamadan önce, retinal numune kesitleri mikrostatta hazırlanmış ve H&E boyamasından geçirilmiş olmalıdır.Ardından, retinal kesit dört bölgeye ayrılır. Bu bölgeler; üst periferik bölge, üst merkezi bölge, alt merkezi bölge ve alt periferik bölgedir. Bölgeler tanımlandıktan sonra, her bir bölgenin görüntüsü decor parlak alan mikroskobunda 10 kat 40 büyütmede alınır.Şimdi retinal morfometrik bilgileri analiz etmeye hazırız. Bu oturumda, iç nükleer tabakanın retinal kalınlığının nasıl ölçüleceği gösterilecektir. Thorough Investigator adlı yazılımı açın.40 tipi seçin, ardından ana araç çubuğundan görüntü aç seçeneğini belirleyin. Dosya sekmesi altında, analiz etmek istediğiniz retinal bölgenin görüntüsünü seçin. Ana araç çubuğundaki açılır menüden kontur hattı tipini seçin.Otomatik hareketin açık olduğundan emin olun. Yakınlaştırma butonuna tıklayarak görüntüyü büyütebilirsiniz. Görüntüleme boyutunu küçültmek için uzaklaştırma butonunu kullanabilirsiniz.İzleme ve numune, hareket düğmelerine tıklana

morphometric-analyses-of-retinal-sections

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Insan dışı primat gelişimi ve yaşlanma anlamak için önemli bir translasyonel türüdür. Primat retinanın anatomik organizasyonu, insanlarda normal ve patolojik durumları önemli bilgiler verebilir.

Beyin Ağ Geçidi: Primate Göz Diseksiyon

Retina önemli benzerlikler beyinle paylaşır ve böylece damarlara ve beyinde nöronal yapısında olmayan invaziv çalışmaya benzersiz bir pencereyi temsil eder. Bu iletişim kuralı demans retina görüntüleme teknikleri kullanarak çalışma yöntemi açıklanır. Bu yöntem potansiyel olarak demans tanı ve risk değerlendirmesine yardımcı olabilir.

Demans çalışması için retina Imaging'i kullanma

İnsan retina fovea, makula ve periferik retina gibi işlevsel ve tatlı farklı bölgelerinde oluşur. Burada, incelemek ve bu farklı retina bölgeler aşağı akım proteomik analiz için toplamak için punch biyopsi ve doku katmanları bir insan gözünün üzerinden el ile kaldırılması kullanarak bir yöntemi açıklanmaktadır.

İnsan Retina ve RPE koroid diseksiyon proteomik analizi için

Burada, retinal dejenerasyon, glokom, diyabetik retinopati ve miyopi modellerinde retinal ve oküler yapıları in vivo olarak görselleştirmek için spektral-alan optik koherens tomografinin (SD-OCT) kullanımını açıklamaktayız.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Kemirgen Modellerinde Oküler Hastalığın İn vivo Yapısal Değerlendirmeleri

Bu makalede, tüm mount retinal preparatları için iyi kurulmuş ve tekrarlanabilir bir lektin lekesi testi ve proliferatif ve proliferatif olmayan retinopatilerde sıklıkla değiştirilen vasküler parametrelerin nicel ölçümü için gerekli protokoller açıklanmaktadır.

Proliferatif Olmayan ve Proliferatif Retinopatilerle Farelerin Tüm Mount Retinalarında Vasküler Parametrelerin Nicelemesi

Burada, farelerde retinopatinin tanısını ve kantitatif ölçümünü kolaylaştırmak için optik koherens tomografi kullanan bir in vivo görüntüleme tekniğini tanımladık.

Optik Koherens Tomografinin Retinopatinin Bir Fare Modeline Uygulanması

İnsan gözünde retinal pigment epitelini (RPE) retinadan etkin bir şekilde ayırmak ve RPE'nin histolojik ve morfometrik analizleri için tüm RPE / koroid düzlüklerini üretmek için bir yöntem tanımladık.

Histolojik Analiz için İnsan Gözünden Retinal Pigment Epitel/Koroid Flatmount'larının Verimli ve Tutarlı Üretimi

Fare modelleri, retinal pigmentli epitelin (RPE) biyolojisini araştırmak için yararlı araçlar olabilir. Farelerin bir dizi RPE patolojisi geliştirebileceği tespit edilmiştir. Burada, ışık, iletim elektronu ve konfokal mikroskopi kullanarak farelerde RPE patolojilerini aydınlatmak ve ölçmek için bir fenotipleme protokolü tarif ediyoruz.

Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonunun Fare Modellerinde Retinal Pigmentli Epitel Patolojilerini Değerlendirme ve Ölçme Protokolü

Bu el yazması, kemirgen gözbebeklerinden slaytların histolojik olarak hazırlanması için bir protokol sunmaktadır. Önerilen yöntemle, iç retina ışık mikroskobu altında kolayca görüntülenebilir ve değerlendirilebilir. Prosedür, farelerin ve sıçanların gözbebekleri için sunulmuştur.

Retinayı değerlendirmek için sıçan ve fare gözbebeklerinin histolojik slaytlarının hazırlanması ve analizi

Retina, laminer yapısı boyunca karmaşık uzamsal organizasyon sergiler. Modern mekansal transkriptomik ve dizileme teknikleri, 20 μm kalınlığında doku kesitleri &lt; gerektirir ve bu da retinal araştırma uygulanabilirliklerini sınırlar. Bu taze dondurulmuş kriyoseksiyon yöntemi, düzlemsel uzamsal ilişkileri korurken fare retinasının ince yüz kesitlerini üretir ve laminalar arasında kapsamlı moleküler haritalama sağlar.

En yüz Yüksek Boyutlu Mekansal Moleküler Analiz için Fare Retinasının Kriyoseksiyonu

Öğrenin retinanın morfometrik analiz yöntemlerini; iç çekirdek tabakası kalınlığı ölçümü, retinal ganglion hücre sayımı ve boyut analizi. Bu teknikler nörodejeneratif hastalıklarda görsel bilgi iletimini anlamak için kullanılır.

Retina Bölüm morfometrik Analizleri

Daha fazla video keşfet