RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in <em>C. elegans</em>

Katherine K. Beifuss; Tina L. Gumienny

doi:10.3791/3442

Içinde Postembryonic Fenotiplerin Belirleme RNAi Tarama C. elegans

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

Içinde Postembryonic Fenotiplerin Belirleme RNAi Tarama C. elegans

Full Text

17,784 Views

09:40 min

February 13, 2012

DOI: 10.3791/3442-v

Katherine K. Beifuss¹, Tina L. Gumienny¹

¹Department of Molecular and Cellular Medicine,Texas A&M University System Health Science Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Biz protein ekspresyonu ve lokalizasyonu postembryonic düzenleyiciler tanımlamak için duyarlı bir yöntem tarif

Bu prosedürün amacı, RNAi bazlı bir genomik ekran ve floresan etiketli proteinler kullanarak C zarafetinde protein ekspresyonu ve lokalizasyonunun embriyonik sonrası düzenleyicilerini tanımlamaktır. Uygun tarama suşu oluşturulduktan sonra, bir RNAi kütüphanesi seçilir. Prosedürün ilk adımı, kütüphane klonlarını bakterilere paketlemektir.

Bakteriler daha sonra seçilir, büyütülür ve aşamalı c elegance nematodlarına beslenir. Nematodların 72 saat boyunca büyümesine izin verdikten sonra, ilgilenilen fenotipteki değişiklikler gözlenir. Sonuçta, saldırıya uğrayan proteinin ekspresyonu veya hücre altı lokalizasyonundaki değişiklikler floresan mikroskobu ile görselleştirilir.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos