29 Ocak 2012
Zorla yüzmeye testi kemirgenlerde potansiyel antidepresan etkinliğini değerlendirmek için deneysel bir yaklaşım olarak onaylanmıştır. Deneysel hayvan, su ve kaçış ilgili hareketlilik davranış bir tank yerleştirilir rakamlarla gösterir. Bu testin fare sürümü için ortak prosedürler açıklanmıştır.
Fare zorunlu yüzme testi, antidepresan etkinliğini öngörmek için kullanılan yaygın bir testtir. Bu video, zorunlu yüzme testinin fare versiyonunun prosedürlerini göstermektedir. Fare versiyonu, sarma (wrap) versiyonundan farklıdır ve birbirinin yerine kullanılmamalıdır.
Zorunlu yüzme testinde, fareler suyla doldurulmuş bir tanka yerleştirilir. Fare altı dakika boyunca tankta kalır. Bu süre zarfında deneğin davranışları kaydedilir.
Altı dakikalık test süresinin sonunda, denek sudan çıkarılır. Test tamamlandıktan sonra, görsel kayıtlar bir bilgisayara veya video monitörüne aktarılır. Analiz için gözlemci, farenin altı dakikalık oturumun son dört dakikası boyunca mücadele ederek geçirdiği süreyi ölçer.
Antidepresan ilaçlar, mücadele ederek geçirilen süreyi artırır. Bu durum, hareketsizlik sürelerinin kısalmasıyla kendini gösterir. Merhaba, ben Maryland Üniversitesi Tıp Fakültesi'ndeki Dr. Todd Gould laboratuvarından Sean.
Merhaba, ben aynı laboratuvardan Chantelle. Bu videoda, Zorunlu Yüzme Testi'nin fare versiyonunun nasıl uygulandığını ve puanlandığını göstereceğiz. Fare zorunlu yüzme testi, antidepresan tedavilerin potansiyel etkinliğini değerlendirmek için kullanılır.
Öyleyse başlayalım, değil mi? Pleksiglas gibi dayanıklı bir malzemeden yapılmış şeffaf silindirik tanklar kullanıyoruz; tank boyutları, farelerin kaçmasını ve ayaklarının veya kuyruklarının tabana değmesini önleyecek şekilde seçilir. Tankı önceden belirlenmiş ve işaretlenmiş seviyeye kadar musluk suyuyla doldurun, su sıcaklığını ayarlayın.
Sıcaklık 23 ile 25 santigrat derece arasında olmalıdır. Su tankları video kaydına uygun şekilde düzenlenmelidir. Laboratuvarımızda, zorunlu yüzme testini tanklar arasında aynı anda dört ila beş denek ile gerçekleştiriyoruz.
Deneklerin birbirini görmesini önlemek için bölmeler yerleştiriyoruz. Bu bölmeler aynı zamanda fareler için arka plan kontrastı sağlar. Albino fareler için siyah renk, video kayıtları için iyi bir kontrast sağlar.
Koyu renkli fare suşları için beyaz veya krem rengi bir arka plan uygundur. Deneye başlamadan önce beyaz gürültü makinesini çalıştırın. Sesin çok yüksek olmadığından emin olun.
Sadece aralıklı gürültüleri maskelemelidir. Denekleri deney odasına getirin. Alıştırma için bu süre genellikle en az bir saattir.
Deney odasındaki koşullar sabit tutulmalı; gürültüden, ışık seviyesi değişikliklerinden ve diğer olası aksaklıklardan arındırılmış olmalıdır. Alıştırma süresi sona erdiğinde teste başlanabilir. Oturum adının kaydedilmesi önemlidir. İlk olarak, fareleri kuyruklarından tutun ve nazikçe tankın içine yerleştirin.
Hayvanların su yüzeyine değdiklerinde kendilerini yönlendirebilmeleri için bu işlemin yavaşça yapılması önemlidir. Altı dakikalık test süresinin sonunda, hayvanların tanımlanmasını videoya kaydedin ve kaydı durdurun. Fareleri başlatılma sırasına göre çıkarın ve kafese geri koymadan önce kağıt havluyla nazikçe kurulayın.
Tanklardaki su yeniden kullanılmamalıdır. Test işlemini tamamladığımıza göre, Zorunlu Yüzme testindeki davranışların puanlamasına geçelim. Değerlendirilen temel değişken, hayvanların deneme sırasında hareketsiz kaldıkları süredir.
Genellikle fare zorunlu yüzme testinde, toplam altı dakikalık oturumun son dört dakikası puanlanır. Bunun nedeni, çoğu farenin tedaviye bakılmaksızın testin erken aşamalarında sürekli mobil olmasıdır. Bu aktivite, olası tüm tedavi etkilerini gölgelemektedir.
Bu videoda görebileceğiniz üzere, fareler testin başlangıç aşamalarında oldukça aktiftir. Bu aktivite, her bir fare için geçen ilk iki dakikadan sonra azalacaktır. Hareketlilik, bir oyun konsolu ile kontrol edilen ekran üzerindeki bir kronometre ile ölçülmektedir.
Diğer kronometre 240 saniyeyi geri sayar. Test süresince mobilite, vücut dengesini sağlamak ve başı suyun üzerinde tutmak için gerekli olanlar dışındaki tüm hareketler olarak tanımlanır. Şimdi, bir denemenin örnek puanlamasını görelim.
Karışıklığı önlemek için öncelikle değerlendirilmeyen diğer farelerin üzerini örteriz. Fareler genellikle suyun üzerinde kolayca yüzerler. Ancak, vücutlarını dengelemek ve başlarını suyun üzerinde tutmak için yine de küçük hareketler sergilerler.
Bu davranışlar bir kaçma girişimi değildir ve mobilite olarak puanlanmamalıdır. Ayrıca, farelerde tek bir mobilite atağının ardından, esasen hareketsiz olmalarına rağmen, daha önce kazandıkları momentum sonucunda suyun içinde sürüklenmeye devam edebilirler; bu hareketler de mobilite olarak puanlanmamalıdır. Şimdi başka bir videoya geçelim.
Bu videodaki fare, ekranda belirtildiği gibi hem hareketlilik hem de hareketsizlik dönemleri sergilemektedir ve bir gözlemci hareketlilik süresini kaydedecektir. Teorik olarak hareketsizlik süresini doğrudan ölçmek mümkün olsa da, aktif hareketleri tespit etmek ve ölçmek, bu hareketlerin yokluğunu ölçmekten daha kolaydır. Geleneksel olarak hareketsizlik süresi rapor edilir.
Hareketsizlik süresi, hareketlilik süresinin 240 saniyeden çıkarılmasıyla belirlenir. Dördüncü yüzme testinin puanlanması çok fazla eğitim ve pratik gerektirir. Yüksek güvenilirlik seviyelerine ulaşmak için, dahili bir yaşam standardı oluşturmak ve her yeni gözlemciyi yüksek güvenilirlik seviyelerine ulaşana kadar eğitmek önemlidir.
Bu videoda, Zorunlu Yüzme testinin fare versiyonunu açıklıyoruz. Gelecekteki deneylerinizde başarılar dileriz.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Zorlamalı yüzme testi, kemirgenlerde potansiyel antidepresan etkinliğini değerlendirmek için doğrulanmış bir yöntemdir. Bu test, farelerin bir su tankına yerleştirilmesini ve kaçışla ilgili mobilite davranışlarının nicelendirilmesini içerir.
Fare zorunlu yüzme testi, antidepresan etkinliğini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan bir preklinik davranışsal analizdir; erken keşif aşamasında hedef doğrulamayı ve mekanistik risk azaltmayı destekleyen, kaçışla ilişkili mobiliteye dair nicel bir veri sağlar. Standardize edilmiş prosedürü, bileşiklerin depresyon benzeri durumlar üzerindeki etkilerinin tekrarlanabilir şekilde değerlendirilmesine olanak tanıyarak antidepresan geliştirme hattındaki önceliklendirme süreçlerinde "devam/dur" kararlarına temel oluşturur. Testin basitliği ve minimum ekipman gereksinimi, keşif iş akışları genelinde ölçeklenebilir uygulamayı kolaylaştırır.
Fare zorunlu yüzme testi, hedef doğrulama ile öncü bileşik belirleme aşamaları arasında köprü kuran bir keşif aşaması davranışsal testi olarak işlev görür ve preklinik etkinlik çalışmalarına geçmeden önce mekanistik bilgiler sağlar.