Name: Nitrik Oksit Biyoaktivite içlin Analitik Teknikler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-06-18T12:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 28 s
Description: Öğrenin, biyolojik örneklerde nitrik oksit metabolitlerini doğru bir şekilde tespit etmek için kan örneklerinin hemen işlenmesi ve aort halkaları kullanılarak endotelyal fonksiyonun değerlendirilmesi yöntemlerini. Bu teknik, hastalık biyobelirteçleri olarak NO metabolitlerinin araştırılmasına katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar Hong Jiang, doktora teşekkür etmek istiyorum ve Deepa Parathasarthy, MPH, teknik yardım için BDS.

1. Tam Kan Toplama <ol><li> İnsanlarda veya NEM / EDTA içeren tüplerde deney hayvanları gelen venöz kan toplayın. </li><li> Hemen 7 dakika rcf (göreceli merkezkaç kuvveti) plazma ve kırmızı kan hücre pelletini hazırlamak için 14.300 bir tezgah üstü santrifüj kan aşağı doğru döndürün. </li><li> Yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC) ve chemilüminesan algılama (CLD) analizi için plazma örnekleri hazırlayın. HPLC: Plazma, çökelti plazma proteinlerine 10 dakika 13,200 rpm&#39;de vorteks ve santrifüj soğuk metanol 1:1 hacim ekleyin. HPLC analizi için supernatant toplamak. CLD: kısım özellikle tahlil nitrozo için Sulfanilamide ve cıva klorid ile örnek ve preincubate. </li><li> HPLC ve CLD analizi için kırmızı hücre pelletini hazırlayın. HPLC: 10 mM Milli Ekonomi Modeli&#39;nde, 2.5 mM EDTA ve ferrisiyanür 10 mM içeren bir hipotonik lizis çözüm ekle 01:04 kırmızı hücre pelet. Vortex iyice ve sonra 1:1 metanol, girdap ve centrif ekleyinÇökelti proteine ​​10 dakika süreyle 13.200 rpm uge. HPLC analizi için supernatant toplamak. CLD. 10 mM EDTA, 2.5 mM EDTA ve 10 mM ferrisiyanür ihtiva eden bir çözeltiye hipotonik lizis 01:04 kırmızı hücre peleti ekleyin. Tablet örnekleri nitrozo belirli tespiti için Sulfanilamide ve cıva klorid içeren tüplere. </li></ol> 2. Doku Ekstraksiyon ve Hazırlık <ol><li> NO metabolitlerinin doku seviyelerini belirlemek için, yukarıda tarif edildiği gibi örneği hazırlamak için kan serbest doku hasat etmek için gerekli olan ilk. Tam kan değişimi sol ventrikül apeks yoluyla fizyolojik tampon beslerken tarafından gerçekleştirilecektir. Tüm kan kaldırıldıktan sonra, ilgi dokular olabilir. </li><li> Doku örnekleri homojenize ve HPLC ile analiz CLD için yukarıda tarif edildiği gibi örnekler hazırlanır. </li></ol> 3. Endotel Fonksiyon için Aort Yüzük İzolasyonu Doku Organ Banyosu <ol><li> Fareler Anest olacaktırartık duyarlı tutam dizilmek ve cerrahi öncesi servikal dislokasyon geçmesi kadar dietil eter ile hetized. Bir torakotomi torasik ve abdominal aorta göstermek için yapılır. Bir 25 gauge şırınga sol ventrikül apeksi içine yerleştirilir ve oksijenli Krebs Henseleit tamponu ile kan serbest perfüze edilmiştir. </li><li> Sağ atrium kan için bir çıkış sağlamak için kesilir. Abdominal aort kaldırıldı ve adventisyanın temizlenecektir. </li><li> Halkalar 2 mm uzunluğunda parçalara kesilmiş ve fizyolojik bir tampon çözeltisi içinde kalmış bir dört-kanallı doku organ banyosu (DMT 720MO, AD Araçlar) üzerine monte edilecektir. </li><li> Damar halkaları 37 ° C&#39;de oksijenli Krebs tampon (95% O 2 ve% 5 CO2) ile 10 ml organ banyosu içinde tutulur Bir gram öngermeli her aort halkası (önceki deneylerde belirlendiği gibi uygun vazomotor işlev için uygun başlangıç ​​gerilimi) üzerine yerleştirilir. Sekiz kanallı sekizlik köprü (Powerlab) ve veri toplama yazılımı (Grafik sürüm 5.2.2) birBütün kuvvet ölçümleri kaydetmek için kullanılır yeniden. </li><li> Yüzüklerin her organ banyosunda tampon 80 dakika her 20 dakikada değişti için dengelenmesi için izin verilir. 80 dk için dengeleme sonra, 1 uM fenilefrin submaksimal kasılması için, her bir halka eklenir. </li><li> Stabilize edildikten sonra, bu tür asetilkolin olarak endotelial agonist damar gevşemesi NO üretimini ve derecesi belirlemek üzere eklenir. Asetilkolin için doz yanıt sonra, hamamlar nitrik oksit, düz kas yanıt belirlemek için ve% 100 rahatlama için bir değer almak için nitroprussid dışsal kaynağı ile yıkanır ve recontracted ve daha sonra ele alınacaktır. </li><li> NO temizleyiciler açıkça damar rahatlama ve NO inhibisyonu serbest göstermek için banyo eklenebilir. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar ENO-20 özel HPLC kullanımı, nitrit ve nitrat spesifik ve duyarlı, yüksek verimlilik yöntemi kullanımı kolay sağlarbiyolojik matrisler. Algılama ve orijinal bir kromatogramıdır ilkesine Şekil 1 &#39;de gösterilmiştir. Bu yöntem, nitrit ve nitrat belirlenmesi için herhangi bir biyolojik numune için kullanılabilir. NO metabolitlerinin CLD tabanlı algılama NO moleküler kaynağını belirlemek için bir kimyasal derivitization adım gerektirir. Kemilüminesans detektörü için eşzamanlı oksidatif denitrosation ve indirgeyici denitrosation için deney düzeneği Şekil 2 &#39;de gösterilmiştir. Sağda Reaksiyon kabı PBS pH 7.4 &#39;de 800mm ferrisiyanür ile doldurulur ve sol tepkime kabına redüksiyon denitrosation için asetik asit (Şekil 2A) potasyum iyodür / iyot karışımı ile doldurulur. Tüm kurulum Şekil 2B &#39;de gösterilmiştir. Şekil 3 grubunun spesifik denitrosation nitrit algılamak ve sayısal olarak deneyler, nitrozo, nitrozaminler gibi nitrosil heme ürünler göstermektedir. Bu yöntem, daha önce tarif olmuşturyatak ve 4,5 doğrulandı. Bu önemli biyokimyasal analizler kolayca endotel deney hayvanlarında NO üretimini belirlemek için izole aort halkaları üzerinde fonksiyonel çalışmalar ile korele edilebilir. Bu klasik farmakolojik deney kolayca ve doğru endotel fonksiyonu ve üretim NO değerlendirebilir. Gibi asetilkolin gibi endotelyal agonistlere damar reaktivitesi Ölçme doğrudan sonra deney hayvanlarının kan ve doku tespit biyokimyasal belirteçler ile korele edilebilir endotelyal NO üretimini belirleyebilirsiniz. Asetilkolin için bir doz-yanıt tipik bir temsilini Şekil 4 &#39;de gösterilmiştir. Normal endotel fonksiyonu ile sağlıklı kontrol fareleri rahatlatarak asetilkolin yanıt. Endotel disfonksiyonu ile Fare (hiperkolesterolemik fareler) aynı uyarana NO üretimi azalır dolayı daha az rahatlama gösterir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3722/3722fig1.jpg" /> Incirure 1. ENO-20 ve örnek kromatogram tarafından nitrit ve nitrat saptama ilkesi. Nitrit ve nitrat için algılama ENO-20 yöntemi (Üst) Şematik. (Alt) 10 pmol nitrit ve nitrat standart chromotogram ENO-20 (nitrit ve nitrat 100 nM çözümü 100 ul) enjekte edildi. 100 ul her bir enjeksiyon hacmi ile anyon için 1 nM duyarlılığı. Proteini veya renkli türleri ile hiçbir müdahale. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3722/3722fig2.jpg" /> Tasfiye nitrik oksit gaz gaz faz algılama ile iyodür / iyot testi kullanılarak ferrisiyanür ve indirgeyici denitrosation tarafından hem oksidatif denitrosation kullanarak Şekil 2. CLD deney düzeneği. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3722/3722fig3.jpg" /> Şekil 3. (Panel A) grubu belirli Chemic ile örnek preinkübasyon tarafından indirgeyici denitrosation tayininde nitrit Kemilüminesans algılama, RSNO, RNNOal reaktifler. Pik alanlarının Çıkarma nitrit ve RSNOs algılanmasını sağlar. Ferrisiyanür oksidatif denitrosation çözeltisi kullanılarak nitrosil heme türlerinin (panel B) Chemiluminescent tespiti. Bu yöntem, RSNOs (GSNO ya SNO-albümini), ya da RNNO (NO-pirolidin ve N-nitrozo-albümini) ile bir çapraz reaktivitesi olan NO-heme ürünler için özel. <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3722/3722fig4.jpg" /> Şekil 4. Izole aort halkaları üzerinde ex vivo organ banyosu sonra HPLC ve CLD tarafından tespit biyokimyasal belirteçler ile korele edilebilir endotelyal NO üretimini doğrudan bir ölçü sağlar. Bu rakam NO üretiminin azalması nedeniyle endotel disfonksiyonu ile farelerde azalmış rahatlama gösterir.

<ol><li>Kelm, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+metabolism+and+breakdown%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide metabolism and breakdown.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1411, 273-289 (1999).</li>
<li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetycholine%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetycholine.</a> Nature. 288, 373-376 (1980).</li>
<li>Ignarro, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelium-derived+relaxing+factor+produced+and+released+from+artery+and+vein+is+nitric+oxide%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Endothelium-derived relaxing factor produced and released from artery and vein is nitric oxide.</a> Proc. Natl. Acad Sci. U.S.A. 84, 9265-9269 (1987).</li>
<li>Feelisch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concomitant+S-%2C+N-%2C+and+heme-nitrosylation+in+biological+tissues+and+fluids%3A+implications+for+the+fate+of+NO+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Concomitant S-, N-, and heme-nitrosylation in biological tissues and fluids: implications for the fate of NO in vivo.</a> FASEB J. 16, 1775-1785 (2002).</li>
<li>Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+nitric+oxide+levels+in+the+red+cell%3A+validation+of+tri-iodide-based+chemiluminescence+with+acid-sulfanilamide+pretreatment%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Measurement of nitric oxide levels in the red cell: validation of tri-iodide-based chemiluminescence with acid-sulfanilamide pretreatment.</a> J. Biol. Chem. 281, 26994-27002 (2006).</li>
<li>Angelo, M., Singel, D. J., Stamler, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+S-nitrosothiol+%28SNO%29+synthase+function+of+hemoglobin+that+utilizes+nitrite+as+a+substrate%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">An S-nitrosothiol (SNO) synthase function of hemoglobin that utilizes nitrite as a substrate.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 8366-8371 (2006).</li>
<li>Bryan, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bound+NO+in+human+red+blood+cells%3A+fact+or+artifact%5BTitle%5D)+AND+%22Nitric+Oxide%22%5BJournal%5D)">Bound NO in human red blood cells: fact or artifact.</a> Nitric Oxide. 10, 221-228 (2004).</li>
<li>Feelisch, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Processing+of+Nitrite+in+Hypoxia%3A+An+Intricate+Interplay+of+Nitric+Oxide-Generating+and+-Scavenging+Systems%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Tissue Processing of Nitrite in Hypoxia: An Intricate Interplay of Nitric Oxide-Generating and -Scavenging Systems.</a> J. Biol. Chem. 283, 33927-33934 (2008).</li>
<li>Bryan, N. S., Grisham, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+detect+nitric+oxide+and+its+metabolites+in+biological+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic.+Biol.+Med%22%5BJournal%5D)">Methods to detect nitric oxide and its metabolites in biological samples.</a> Free Radic. Biol. Med. 43, 645-657 (2007).</li>
<li>Lundberg, J. O., Weitzberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NO+generation+from+inorganic+nitrate+and+nitrite%3A+Role+in+physiology%2C+nutrition+and+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Pharm.+Res%22%5BJournal%5D)">NO generation from inorganic nitrate and nitrite: Role in physiology, nutrition and therapeutics.</a> Arch. Pharm. Res. 32, 1119-1126 (2009).</li>
<li>Lundberg, J. O., Weitzberg, E., Gladwin, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nitrate-nitrite-nitric+oxide+pathway+in+physiology+and+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Drug.+Discov%22%5BJournal%5D)">The nitrate-nitrite-nitric oxide pathway in physiology and therapeutics.</a> Nat. Rev. Drug. Discov. 7, 156-157 (2008).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Yöntemleri çoklu biyolojik bölümlerinde ilgili NO metabolitlerinin ölçümü için burada açıklanan endotelde NO fonksiyonel ölçümleri ile korele edilebilir sağlık ve hastalık NO biyoloji parmak izi için izin verecektir. Bu yöntemler, yüksek verimlilik için uyum potansiyeli olan basit örnek hazırlama gerektirir. Bu moleküllerin miktarı nispi hastalığın deneysel modellerinde ve insan hastalarda bile seri örnekleri arasında bir sayı, NO üretimini ve metabolik akıbeti anlamak yardımcı olabilir. Yapay numune hazırlama sırasında...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> N-etilmaleimid </td><td> Thermo Scientific </td><td> 23030 </td></tr><tr><td> EDTA </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> E7889 </td></tr><tr><td> Potasyum ferrisiyanürle </td><td> Fluka </td><td> 60299 </td></tr><tr><td> HPLC </td><td> EICOM Corp </td><td> ENO-20 </td></tr><tr><td> Otomatik Numune </td><td> Alcott </td><td></td></tr><tr><td> DMT Myograph </td><td> AD Aletleri </td><td></td></tr><tr><td> PowerLab </td><td> AD Aletleri </td><td></td></tr><tr><td> Chemiluminescent </td><td> EcoPhysics </td><td> CLD 88Y </td></tr><tr><td> Santrifüj </td><td> Eppendorf </td><td> 5415D </td></tr><tr><td> Asetilkolin </td><td> Sigma-Aldrich</td><td> A6625 </td></tr><tr><td> R-(-) fenilefrin </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P6126 </td></tr></tbody></table>

nitrik oksit biyoaktivite içlin analitik teknikler

Analytical Techniques for Assaying Nitric Oxide Bioactivity

Nitrik oksit (NO) biyolojik sistemler (kan dolaşımında, 1 saniyeden az) 1 derece kısa ömürlü bir iki atomlu serbest radikaldir. NO dahil olmak üzere temel işlevleri düzenleyen, vücudumuzda üretilen en önemli sinyal molekülleri biri olarak ancak kan basıncı, bağışıklık yanıtı ve sinirsel iletişim düzenleme ile sınırlı değildir olabilir. Bu nedenle biyolojik matrisler onun doğru tespiti ve miktar tayini sağlık ve hastalık NO rolünü anlamak için önemlidir. NO gibi kısa bir fizyolojik yarı ömrü ile, NO biyokimya reaksiyon ürünlerinin tespiti için alternatif stratejiler geliştirilmiştir. Çoklu biyolojik bölümlerinde ilgili NO metabolitleri miktarının in vivo açısından NO üretimini, biyoyararlanım ve metabolizması ile değerli bilgiler sağlar. Sadece kan veya plazma gibi tek bir bölme örnekleme her zaman tüm bo doğru bir değerlendirme sağlamak olmayabilirözellikle dokularda, NO durumu dy. Deney hayvanlarında seçin dokuları ile kan karşılaştırmak için yeteneği kadar sağlık ve hastalık NO biyobelirteçlerin tanısal ve prognostik programı gibi temel bilim ve klinik tıp arasındaki uçurumu yardımcı olacaktır. Bu nedenle, belirli ilgi dokulara plazma ya da kan NO durumu ekstrapolasyon artık geçerli bir yaklaşımdır. Sonuç olarak, metotları geliştirmiş ve in vivo deneysel hayvan birden bölümlerinde NO ve NO ile ilgili ürünler / metabolitlerinin saptanması ve miktarının izin hangi geçerliliği devam etmektedir. Ve nitrat (NO 3 -) - nitrit (NO 2) nihai oksidasyona çözünür guanil siklaz (SGC) aktivasyonu NO sentaz tarafından üretim NO biyokimya kurulan paradigması sadece in vivo NO etkilerini bir parçasını temsil edebilir. S-nitrosothi oluşturmak üzere proteini tiyoller, ikincil aminler, ve metaller ile NO ve NO-türevi metabolitlerinin etkileşimiols (RSNOs), N-nitrozaminler (RNNOs) ve nitrosil heme-sırasıyla NO cGMP bağımsız etkilerini temsil eder ve NO SGC aktivasyonu gibi fizyolojik olasılığı kadar önemlidir. Fizyolojisi NO gerçek bir anlayış aynı anda birden fazla bölmeli örnekleme in vivo deneyler türetilmiştir. Nitrik oksit (NO) metodolojisi YOK biyokimya ile ilgili pek çok tartışma ve tartışma karmaşık ve çoğu zaman kafa karıştırıcı bilim ve odak noktasıdır. Yeteneğimizi özellikle üzerine NO menteşeleri içeren yeni mekanizmalar ve sinyal yollarının aydınlatılması, seçici ve hassas tespit ve NO ile ilgili tüm kompleks biyolojik matrisler NO ürünleri ve metabolitleri ölçmek. Burada, bir HPLC ile nitrit ve nitrat hızlı ve duyarlı analiz yöntemi gibi NO moleküler kaynak yanı sıra ile ex vivo olarak belirlemek için kimyasal derivitazation ile in vitro ozon bazlı chemiluminescence kullanarak biyolojik örnekler serbest NO algılanmasıorgan banyosu kasılmaların kâğıda çizilmesi.

Nitrik oksit (NO) endojen üretimi biyolojik fonksiyonları çok çeşitli düzenler. Bu NO dayalı sinyal bozulması veya düzensizliği birçok insan hastalıkları dahil olduğu giderek daha açık hale gelmektedir. Yöntem NO metabolitleri insan hastalığı için yeni tanısal veya prognostik biyolojik sağlayabilir ilgili ölçmek için.

Nitrik Oksit Biyoaktivite içlin Analitik Teknikler

Nitrik oksit (NO), biyolojik sistemlerde ömrü son derece kısa olan (dolaşımdaki kanda 1 saniyeden az) iki atomlu bir serbest radikaldir1. NO ...

Aşağıdaki deneyin genel amacı, biyolojik örneklerdeki nitrik oksit metabolitlerinin nasıl doğru ve spesifik bir şekilde tespit edileceğini göstermektir. Bu, öncelikle metabolit kaybını veya artefakt oluşumunu önlemek için kan örneklerinin toplama işleminin hemen ardından işlenmesiyle gerçekleştirilir. Eş zamanlı olarak, hipoksik bir ortamın nitrik oksit metabolitleri üzerindeki etkilerini minimize etmek amacıyla hızlı ve verimli bir doku hasadı yapılır.Endotelyal fonksiyonlarını değerlendirmek amacıyla aort halkaları toplanır ve bir organ banyosuna asılır. Ayrıca, dokudaki nitrat seviyelerini, nitrit seviyelerini, nitrotiyollerin ve diğer nitroya doygun ürünlerin bağıl seviyelerini nicelleştirmek için biyokimyasal analizler kullanılır. Bu analizler kullanılarak, deney ve kontrol hayvanlarının uygun bir karşılaştırması, nitrik oksit üretimi ve metabolizması hakkında değerli bilgiler sağlayabilir.Bu çoklu sistem yaklaşımını tekil yöntemlere veya analizlere tercih etmenin temel avantajı, birden fazla organ sisteminde nitrik oksit biyokimyasının daha geniş bir tablosunun çizilmesine olanak tanımasıdır. Böylece, bu metabolitlerden hangilerinin prognostik veya tanısal fayda sağlayabilece

analytical-techniques-for-assaying-nitric-oxide-bioactivity

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

İnflamatuar hücre sinyal molekülü nitrik oksit (NO) seviyeleri yaygın olarak Griess reaktifi kullanılarak test edilir. Bu protokolde, NO'nun salgılanmasını basit, ölçülebilir ve yüksek oranda tekrarlanabilir bir yöntemle tespit etmek için canlı Drosophila beyin dokusu kullanılarak modifiye edilmiş bir Griess testi oluşturduk.

Drosophila Nöroinflamatuar Yanıtında Nitrik Oksit Düzeylerinin Yeni Tüm Doku Kantitatif Testi

Bu yazıda floresan boya tr yüz eşzamanlı algılama ve hücre içi nitrik oksit görselleştirme (NO) ve süperoksit anyon (O 2 diaminofluorescein-2 diasetat (DAF-2DA) ve dihydroethidium (DHE) kullanarak adapte nispeten kolay bir yöntem tarif .- ) sırasıyla, taze bir obezite fare modelinin sağlam aorta izole edilmiştir.

Bozulmamış Arterlerin endotel katmanı Nitrik Oksit ve Süperoksit En Yüz Algılama

Nitrik oksit (NO) vasküler homeostazda önemli bir sinyal molekülüdür. NO in vivo üretimi, doğrudan ölçüm için çok düşüktür. Kemilüminesans, öncüllerini ve oksidasyon ürünlerini, nitrit ve nitratı ölçerek NO döngüsü hakkında yararlı bilgiler sağlar. Vücut dokularında ve sıvılarında nitrit/nitrat tayini anlatılmaktadır.

Kemilüminesans Yöntemi kullanılarak biyolojik Malzemeleri, Nitrik Oksit Yolu&#39;ndaki nitrit ve nitrat, Metabolitler Ölçme

Önceki çalışmalar, atmosferik nitrojen oksitlerin nitrojen izotopik bileşiminin, çevredeki farklı kaynakların etkisini ayırt edebileceğini düşündürmektedir. Saatlik bir zaman çözünürlüğünde N izotopik analizi için atmosferik NOx'in yüksek toplama verimliliği için otomatik, mobil, alan tabanlı bir yöntem hakkında rapor veriyoruz.

Yüksek çözünürlüklü Mobil Toplama Sistemi NO Azot İzotop Analizi için, Otomatik<sub&gt; X</sub

Bu kağıt nitrik oksit (NO) Atlası İlaçlama Fumigasyon protokollerde açıklar. Fümigasyon chambers ile Hayır önce ultralow oksijen koşullarını oluşturmak için azot (N2) sifonu çektim enjekte edilir. Sonunda, odaları yok2etkilenmemek için ortam havası ürünlere maruz önce Hayır sulandırmak için N2 ile atılır.

Laboratuvar İlaçlama haşere kontrolü ile nitrik oksit gaz için prosedürleri

Burada, trombosit potansiyelini kullanmak son derece hassas nitrik oksit sensör kan olarak adrese bir iletişim kuralı mevcut. Nitrik oksit jeneratörler ilk trombosit hazırlık ve nitrit ve deoxygenated kırmızı kan hücreleri kullanımını açıklar.

Nitrik oksit VASP fosforilasyon ölçme tarafından kan trombosit tabanlı algılama

Nitrat ve nitrit seviyelerini ölçmek ve karşılaştırmak için sıçan iskelet kası dokusunun dört farklı kas grubunun homojenizasyonu için üç farklı yöntem için protokoller sunuyoruz. Ayrıca, doku numune büyüklüğünün homojenizasyon sonuçlarını etkileyip etkilemediğini araştırmak için farklı numune ağırlıklarını karşılaştırıyoruz.

Nitrat ve Nitrit Ölçümleri için Sıçan İskelet Kas Homojenatlarının Hazırlanması

Burada, nitrik oksit ve biyolojik olarak ilgili türevlerini, yüksek hassasiyete sahip kemilüminesans bazlı testler kullanarak tespit etmek için protokoller sunuyoruz.

Nitrik Oksit ve Türevlerinin Otoksidasyon ve Nitroslu Bileşiklerden Tespiti için Kemilüminesans Bazlı Testler

Bu protokol, hava-sıvı arayüzünde (ALI) farklılaşan hava yolu epitel kültürlerinde nitrit üretimini triyodid bazlı kemimilüminesans testi kullanılarak apikal sekresiyalarda nitrit ölçümünü sağlayan bir yöntemi tanımlar.

Hava sıvı arayüzünde farklılaşmış fare trakeal epitel hücre kültürlerinde nitrik oksit üretiminin ölçümü

Cerrahi renal kitle 5/6th kaldırarak Lewis sıçan kronik böbrek hastalığı (KBH) kurmak için bir iki aşamalı yöntemi açıklanmıştır. Cerrahi işlem kombinasyonu, NOS-inhibisyonu ve yüksek tuz diyeti nedensel mekanizmaları ve yeni tedavi yaklaşımları gelişimi çalışma izin, insan CKD benzeyen bir model yol açar.

Yüksek Tuz Diyet ve Lewis Rat Kronik Böbrek Hastalığı tetikleyebilecek Nitrik Oksit Sentaz inhibisyonu ile bağlantılı 5/6th nefrektomi

Öğrenin, biyolojik örneklerde nitrik oksit metabolitlerini doğru bir şekilde tespit etmek için kan örneklerinin hemen işlenmesi ve aort halkaları kullanılarak endotelyal fonksiyonun değerlendirilmesi yöntemlerini. Bu teknik, hastalık biyobelirteçleri olarak NO metabolitlerinin araştırılmasına katkı sağlar.

Nitrik Oksit Biyoaktivite içlin Analitik Teknikler

Daha fazla video keşfet