Aşamalı-oranı Farelerde Palatable Yüksek yağ ve yüksek şeker Gıda tepki

Bu rapor detayları farelerin yüksek yağlı yiyecek ödüllendirici etkisini ölçmek için kullanılan protokol ilerici bir oranı edimsel koşullanma görev kullanarak.

Aşağıdaki deneyin amacı, fareleri aşamalı bir oran takviye programı kullanarak gıda güdümlü bir görevde eğitmek ve test etmektir. Bu, farelerin Ad Liam gıda alımının% 60 ila 70'ini sınırladığı ve vücut ağırlığında% beş ila% 10'luk istikrarlı bir azalma ile elde edilen ilk mama ile elde edilir. Gıdayla motive edilmiş kol basma davranışının edinimini geliştirmek için, fareler daha sonra bir otomatik şekillendirme prosedürü kullanarak, sabit oranlı olanda yüksek yağlı, yüksek şekerli bir gıda ödülü için kaldıraç presi için eğitilir.

Miser daha sonra, sabit oranlı beş de dahil olmak üzere daha karmaşık pekiştirme programlarında yiyeceğe yanıt vermek üzere eğitildi ve son olarak yiyeceğin ödüllendirici etkilerinin güvenilir bir ölçüsünü sağlayan aşamalı oran görevi üzerinde eğitim aldı. Daha sonra, ilerleyici oran çizelgesinde stabil performanstan sonra, bu fareler ya 12 ila 24 saat boyunca gıdadan mahrum bırakılır ya da ilerici oran takviye programında gıda ile motive edilen davranıştaki değişiklikleri doğrulamak için intraperitoneal retiklik ajan enjeksiyonu yapılır. Bu deneyin sonuçları, gıda yoksunluğunun gıda güdümlü davranışı artırdığını, buna karşın retik hormon leptin uygulamasının yüksek yağ ve yüksek şekerli gıda ödülleri için gıda güdümlü davranışı azalttığını göstermektedir.

Üst koşullandırma görevleri, farklı uyaranların ve davranışların ödüllendirici ve motive edici etkilerini değerlendirmek için yararlı bir araç sağlar. Progresif oran görevi, kötüye kullanım ilacının ve gıda gibi doğal ödüllerin ödüllendirici etkisini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan, iyi doğrulanmış bir pekiştirme programıdır, ancak kırmızı çalışmalarda daha yaygın olarak kullanılmasına rağmen, progresif oran opera görevlerinin farelere uygulanması, genetik olarak tasarlanmış fare modellerinin artan nesliyle giderek daha önemli hale gelmiştir. Özellikle, obezite araştırmalarında fare modellerinin kullanılması ve lezzetli kalorili gıdaların ödüllendirici etkilerinin aşırı yeme ve obeziteye önemli ölçüde katkıda bulunduğunun kabul edilmesi, farelerde gıda ödülünün ölçülmesi ihtiyacını vurgulamıştır.

Burada, fareleri lezzetli yüksek yağlı, yüksek şekerli bir gıda için karaciğer presine eğitmek ve test etmek için kullanılan yöntemleri, başlamadan önce aşamalı bir takviye programında açıklıyor ve tartışıyoruz. Protokol, hayvanların kullanımını içeren tüm prosedürlerin kurumsal hayvan bakımı tarafından onaylanmasını sağlar. Kullanım komitesinde, gerekirse açık karanlık döngüsünün karanlık fazında test edilmesi önerilir.

Fareleri yedi ila 10 gün boyunca ters ışık karanlık döngüsüne alıştırın. Bu noktada, farelerin bu 10 günlük alışma süresini takiben standart yemek ve suya ad libitum erişimi sağlanır. Fareler tek başlarına barındırılır ve serbest beslenen vücut ağırlıklarının %90 ila 95'ine ulaşana kadar ad libitum gıda alımının %60 ila 70'ini sağlayarak mama kısıtlanır.

Bu, fareleri günlük olarak tartmak için izin presinin edinilmesini kolaylaştırır. % beş ila 10 kilo kaybına ulaşıldığında, tahsis edilen günlük yiyecek, ilk antrenman seansından üç gün önce antrenman süresinin geri kalanında daha düşük vücut ağırlıklarını stabilize edecek şekilde ayarlanır, fareleri ev kafeslerinde test odasına taşıyın, ardından her fareyi teker teker kafesinden çıkarın, ve fareyi iki ila üç dakika tutun. Kullandıktan sonra, fareyi ev kafesine geri koyun, fareleri odaya alıştırın ve eğitimin başlamasından bir gün önce arka arkaya üç gün boyunca elleçleyin.

Yiyeceklerin potansiyel etkisini önlemek için 10 ila 15 yüksek yağlı yüksek şeker peleti ev kafesine yerleştirilir. Edimsel performans üzerine neo fobi, burada yağ olarak %49 katil içeren 20 miligram yüksek yağlı, yüksek şekerli, tozsuz hassas gıda peletleri kullanılmaktadır. Her fare işlem odası, havalandırma fanlı bir ses azaltma kabini içine yerleştirilmiştir.

Fare işlem odaları, yiyecek kabının her iki tarafına yerleştirilmiş iki adet ultra hafif geri çekilebilir kol ile donatılmıştır. Her kolun üzerinde bir uyarı ışığı bulunur ve kafesin üst kısmında bir ev ışığı vardır. Temyiz dağıtıcısı, odanın dışında bulunur.

Odalar, akıllı bir kontrol arayüz kabini aracılığıyla Med PC four yazılımına sahip bir PC bilgisayara bağlanır. Fareler ameliyat odasına sokulur. İlk eğitim paradigması, tek bir kol presinin bir gıda peletinin hazneye verilmesini sağladığı sabit oranlı bir takviye programından oluşur.

Yalnızca bir kol aktif olarak belirlenmiştir ve bir yiyecek ödülünün dağıtımını tetikler. Sağ ve sol kolların tahsisi fareler arasında dengelenir. Eğitim, aynı zamanda bir şekillendirme prosedürü gerektirir, bu sayede kolun presleme davranışını geliştirmek için ezilmiş gıda peletleri kol üzerine yerleştirilir.

Bu ilk eğitim sırasında, aktif bir kol tepkisi yiyecek ödülünün verilmesini tetikler ve kol basma ile yiyecek dağıtımı arasında herhangi bir gecikme olmaz. Fareler kola beş saniye basmayı öğrendikten sonra, ek presleme izninin bir topak verilmesiyle sonuçlanmadığı zaman aşımı başlatılır. Zaman aşımı süresi, farelerin peleti tüketmesine izin verir.

Aktif kola basılarak zaman aşımı süresinden sonra gerekirse daha uzun zaman aşımı süreleri kullanılabilir. Bir kez daha, her sabit oran bir beş saniye içinde bir gıda peletinin salınmasına neden olur. Zaman aşımı eğitim seansı bir saat sürer veya 50 pelet teslim edildiğinde

Opera ve eğitim, yiyecek elde edilene kadar yedi ila 10 gün boyunca devam eder, opera ve yanıt veren fareler, aktif ve aktif olmayan kol için üçe bir veya daha fazla ayrımcılık sergiler ve seans başına 20'ye eşit veya daha fazla ödül alır. Art arda üç oturumdan fazla oturumun edinme kriterlerine ulaştığı kabul edilir. Yedi ila 10 günlük süre içinde edinme kriterlerine ulaşmayan fareler, beş ila yedi gün daha ileri eğitime tabi tutulur.

Beşinci eğitim gününe kadar herhangi bir ilerleme olmaması durumunda fareler testten çıkarılır. Bozulmuş edimsel edinimin belirli farmakolojik ve genetik müdahalelerin bir sonucu olabileceğini ve bu nedenle belgelenmesi gerektiğini akılda tutmak önemlidir. 20'ye eşit veya daha fazla pelet elde etmek için art arda üç seansın ardından, program, beş aktif izin presinin gıda peletinin dağıtımını tetiklediği FR beş T oh beş saniye protokolüne yükseltildi.

FR beş T oh beş saniye programında eğitim, yanıt stabil olana kadar yaklaşık üç ila beş gün sürer. Meister daha sonra aşamalı oran takviye programında eğitim aldı. PR testi sırasındaki yanıt oranı programı, Richardson ve Roberts'a göre hesaplanabilir, burada R, halihazırda kazanılmış olan yiyecek ödüllerinin sayısına artı bir eşittir.

Bu nedenle, bir yiyecek ödülü kazanmak için gereken yanıt sayısı, 1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50, 62, 77, 95 vb. sırayı takip eder. Tamamlanan son oran kırılma noktasıdır. PR seansı en fazla bir saat sürer: herhangi bir 10 dakikalık süre içinde kola basılmaması.

Oturumun sonlandırılmasına neden olur. Bir saatlik bir oturumda kazanılan ödül sayısı, PR görevinde gıda bakımı yapılan edimsel yanıtı doğrulamak için en az üç ardışık gün boyunca en fazla %20 oranında saptığında, takviye PR programındaki performans sabit kabul edilir, gıda ödülünü modüle ettiği bilinen manipülasyonları takiben kırılma noktası yanıtı değerlendirilir. Yapılması nispeten kolay bir test, farenin yiyecek için motivasyon durumunu artıracak ve böylece kırılma noktalarını artıracak olan yiyecek yoksunluğudur.

Fareler ilk olarak, son temel günden sonraki gün stabil temel performans elde edilene kadar bir ad liberton besleme periyodu sırasında PR görevinde test edilir. Yiyecekler ev kafesinden çıkarılır ve fareler daha sonra orucun başlamasından 12 ila 24 saat sonra PR görevinde test edilir veya kırılma noktası eşikleri üzerinde zıt bir etkiyi araştırmak için, antik hormonun periferik uygulaması test edilebilir. Leptin PR testi, bir gün PBS'nin IP enjeksiyonunu takiben ve daha sonra ertesi gün kilogram leptin başına beş miligram enjeksiyonundan sonra gerçekleştirilir.

Leptin, burada görüldüğü gibi PR testinden bir saat önce enjekte edilir. Oruç tutmak, yiyeceklerin ödüllendirici etkilerini 24 saatlik bir oruç tutarak, burada görüldüğü gibi farelerde ilerleyici bir oran takviye programında önemli ölçüde artan kırılma noktalarını artırır. Periferik leptin uygulaması kırılma noktası yanıt eşiklerini azalttığı için leptin farelerde gıda ödülünü azaltır Bu prosedürü denerken, gıda alımının edimsel yanıtın alınmasının düzenli eğitim ve bir gıda kısıtlama rejimi uygulayarak farenin motivasyon durumunu artırarak önemli ölçüde arttığını hatırlamak önemlidir.

Ek olarak, farelerin daha karmaşık programlara geçmeden önce bir takviye programında nispeten kararlı yanıt vermesini sağlamak, test sırasında değişken performansı en aza indirmenin anahtarıdır. Obezite ve obezite ile ilişkili hastalıklar, ilgili molekülleri ve nöral yolları tanımlamanın aciliyetini artıran büyüyen bir sorundur. Progresif oran çizelgesi, nörobiyolojik, genetik veya farmakolojik manipülasyonların gıdanın ödüllendirici etkileri üzerindeki etkisini ölçmek için değerli bir araçtır.