Name: Aşamalı-oranı Farelerde Palatable Yüksek yağ ve yüksek şeker Gıda tepki (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 16 s
Description: Öğrenin farelerde yüksek yağ ve şeker içeren gıdaların ödüllendirici etkilerini aşamalı oran operant koşullama göreviyle nasıl değerlendirilir. Bu yöntem, obezite araştırmalarında gıda motivasyonunu ve ödül mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu proje, Doğa Bilimleri ve Mühendislik Araştırma Kanada Konseyi (355.881) ve Yenilik Kanada Vakfı hibe ile desteklenmiştir.

* En önemli adımlar. 1. Ekipman ve Yazılım <ol><li> Eğitim ve test bir gıda yuvası her iki tarafında (bkz. Tablo 1) yerleştirilmiş iki ultra hafif, katlanabilir kolları 1 ile donatılmış fare edimsel odalarında yapılır. Bir uyarıcı ışık her kolu üzerinde bulunan ve kafesin üstünde bir evde ışık yoktur. A pelet dağıtıcı odasının dışında yer alır. Her odası havalandırma fanı olan bir ses-azaltıcı kabin içinde yer alır. Chambers, &quot;Akıllı Kontrol&quot; arayüzü kabine ile MedPC IV yazılımına sahip bir PC bilgisayara bağlanır. </li></ol> Not: ultra-hafif kolları bulunmayan zaman burun açıkta fare çalışmaları için edimsel yanıt olarak kullanılması tavsiye edilir. Ancak, mevcut her iki seçeneği ile biz bu burun açıkta tepkiler olabilir b verilen motivasyon daha güvenilir bir tedbir olarak ultra-hafif kolları seçimi öneririme keşif koklama tarafından tetiklenen. <ol start="2"><li> Edimsel görevleri çalıştırmak için kullanılan MedPC programları, bir kullanıcı sağlanan programlama kılavuzu yardımı ile öğrenebilirsiniz Medstate notasyon kod yazılmıştır. Programlama mevcut kodları değiştirmek veya benzersiz bir deney parametreleri oluşturmak için kullanıcı için esneklik sağlar. Bazı kodlar Med Associates &quot;Medstate Notasyonu Repository&quot; ücretsiz olarak temin edilebilir <a href="http://www.mednr.com" target="_blank">http://www.mednr.com</a> . Ek kodlar Med Associates satın alınabilir. </li></ol> 2. Fare aklimasyonu ve Gıda Kısıtlama <ol><li> Varış fareleri üzerinde olan bir ters 12 saat aydınlık / karanlık döngüsüne alışmak için en az 10 gün boyunca grubu yerleştirilmiştir ve standart bir yem ve suya ad libitum erişim sağlanır. Bizim durumumuzda bu Charles River (St Sabit, QC) satın yetişkin C57BL / 6 farelerde kullanın. Tüm fare manipülasyonlar ve davranışsal deneyler karanlık döngüsü sırasında yapılır. Tüm prohayvanların kullanımını içeren prosedürler CRCHUM Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylandı. </li><li> Fareler daha sonra tek başına-muhafaza ve gıda kısıtlı (günlük besin alımının% 70) ulaşana kadar% 90-95 serbest besleme kolu-basın yanıt iktisap kolaylaştırmak için vücut ağırlıkları. Edilir Fareler oturumun sona ermesinden sonra evde kafes içinde gıda günlük kota verilmiştir. % 5-10 kilo kaybı ulaştıktan sonra, tahsis edilen günlük besin eğitim süresinin geri kalanı için düşük vücut ağırlıkları stabilize etmek için ayarlanır. Sonra fareler (aşağıya bakınız) onlar bir ad libitum yemleme programı geri konur satın kriterleri ulaşmış. Fareler hakkında 3-4 gün içinde kaybolur vücut ağırlığı yeniden. </li><li> Fareler ilk antrenman öncesinde 3 gün boyunca test odasında ele alınır. 10-15 (HFHS) yüksek yağlı ve yüksek şeker topakları edimsel performan gıda neophobia potansiyel etkisini önlemek için ev kafesin içine yerleştirilir eğitim başlamadan önce günce. Biz 20 mg HFHS, tozsuz, hassas gıda pelet (ayrıca 14 mg kullanılabilir) yağ olarak% 48.9 Kcal içeren (Bio Serv, Frenchtown, NJ) kullanın. </li></ol> 3. Edimsel Eğitim <ol><li> Fareler başlangıçta sabit bir oranı (FR), tek bir kolu basın yuvasına bir gıda pelet teslim elicits sayede -1 takviye programa kola basın için eğitilmiştir. Sadece bir kolu &quot;aktif&quot; (gıda ödül teslim tetikleme) ve sağ ve sol kolları tahsisi fareler arasındaki gevşetilebilir olarak belirlenmiştir. Bu, FR1 programı (FR1/TO-5) en az bir 5 saniyelik zaman aşımı süresi (TO) eklemek için önemli olan sırasında ek kolu-basarak bir gıda pelet teslim yol açmaz. Bu İÇİN dönemi deneyci onların fare modeli için gerekli görürse, gıda pelet tüketmeye fareler için zaman, ancak daha uzun zaman Muhalifler kullanılabilir sağlar. Her FR antrenmandan 1 saat veya 50 pelet teslim edilmiştir sürer. </li><li> * Toplama Kriterleri: &lt;/ Strong&gt; yanıt gıda muhafaza edimsel iktisap belirlemek için kullanılan ölçütleri içermektedir: (1) aktif cevapları ve ödülleri en az sayıda kazandı; (2) aktif ve aktif olmayan kolları arasında ayrım ölçüsü, ve (3) arasında-oturumu performans dengesi. Aktif ve inaktif kolu için ≥ 3:1 ayrımcılık sergileyen ve üst üste üç seans üzerinden oturum başına ≥ 20 ödülleri elde Fareler satın kriterleri 10 ulaşmak için kabul edilir. Biz C57BL6 farelerin çoğunluğu (~% 75) eğitim hakkında 7-10 gün satın kriterlerine ulaşmak için gerekli olduğunu gözlemledim. Bu zamana kadar satın alma kriterleri ulaşamayan Fareler ek bir 5-7 gün daha ileri eğitime tabi tutulurlar. Ekstra 5. eğitimi gündüz hiçbir ilerleme olduğunda Biz test (olguların ~% 5) fareleri dahil değildir. Bu bozulmuş edimsel edinimi bazı farmakolojik ve genetik müdahalelerin bir sonucu olabilir ve bu nedenle belgelendirilmesi gerekir akılda tutmak önemlidir. &lt;/ Li&gt; <li> ≥ 20 pelet elde izleyen üç seans sonra, program 5 aktif kolu presler gıda pelet teslim tetiklemek hangi FR5/TO-5 saniye artar. FR5 programında eğitim üç gün sürer. </li><li> * Farelerin daha sonra takviye ilerici oranı (PR) programında eğitilmiştir. PR test sırasında yanıt oranı çizelgesi aşağıdaki formül (en yakın tam sayıya yuvarlanır) kullanarak Richardson ve Roberts (1996) 11&#39;e göre hesaplanır: = [5 e (R * 0.2)] - 5 R gıda zaten kazanılan ödülleri artı 1 sayısı (yani, sonraki güçlendiricidir) eşit olduğu. Böylece, bir gıda mükâfat sırayla aşağıdaki kazanmak için gerekli yanıtların sayısı: 1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25, 32, 40, 50, 62, 77, 95 ve benzerleri. Tamamlanan son oranın kesim noktasıdır. </li><li> Bir PR oturumu 1 saat en fazla sürer. Oturumun sona ermesi herhangi bir 10 dakikalık sürenin sonuçları kolu basın başarısızlık. Perforödülleri sayısı en az 3 gün üst üste ≤% 10 1 saatlik oturumda sapma kazanılan zaman donatı PR zamanlamaya mance sağlam sayılır. </li></ol> 4. Aşamalı Oranı Test ve Doğrulama <ol><li> Doğrulamak için PR görev yanıt edimsel gıda muhafaza, bir gıda ödül modüle bilinen kesme yanıt şu manipülasyonlar değerlendirebilir. Yürütmek için nispeten kolay bir test gıda için fare motivasyon durumu artırmak ve böylece kesme artacak gıda yoksunluğu olduğunu. Istikrarlı, temel performans elde edilinceye kadar Fareler ilk ad libitum besleme bir dönemde PR görev test edilmelidir. Son &quot;temel&quot; günlük gıda ertesi günü evde kafes kaldırılır ve fareler daha sonra 24 saat hızlı başladıktan sonra PR görev test edilmektedir. </li><li> Ayrıca leptinin anorektik hormonunun periferik uygulanması kesme noktası üzerinde ters bir etkiye sahip olup olmadığı araştırıldıeşikleri. (AF Parlow, National Hormone ve Peptid Program, NIDDK) leptin steril PBS içinde eritildi. PR testi bir gün PBS bir IP enjeksiyonu takiben ve sonra leptin (5 mg / kg), ertesi gün enjeksiyonu takiben gerçekleştirildi. Leptin PR testinden önce bir saat enjekte edildi. Breakpoints eşleştirilmiş t-testi (GraphPad Prism) kullanılarak karşılaştırıldı. </li></ol> 5.. Temsilcisi Sonuçlar Donatı bir PR programı yanıt kesme modüle gıda yoksunluğu yeteneğini test ederken, biz Şekil 1&#39;de gösterildiği gibi önemli kırılma noktalarını artırmak için bekliyoruz. Bu deneyde yiyecek yoksunluğu bir 24 saatlik dönemde, böylece gıda yoksunluğu gıda ödüllendirici etkisini artırır düşündüren serbest besleme bazal durumda elde edilenlere göre kesme bir ~ 3.6 kat artış sağladılar. T anorectic hormonunun aksine, periferik uygulanması leptin (5 mg / kg, ip) bir saat önceTestler, Şekil 2&#39;de gösterildiği gibi yanıt kesme azaltılması gerekir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig1.jpg" /> Şekil 1. Açlık gıda faydalı etkileri arttırır. Bir 24 saat hızlı anlamlı farelerde takviye ilerleyici bir oranı (PR) programı (n = 4) kesme noktaları artmıştır. Ortalama ± SEM; * p &lt;.05. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3754/3754fig2.jpg" /> Şekil 2. Leptin farelerde gıda ödül azalır. Periferal leptin idaresi (5 mg / kg) farelere (n = 4) PR kesme tepkisi eşik azalmıştır. Ortalama ± SEM; * p &lt;0.05.

<ol><li>Fulton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetite+and+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Neuroendocrinol%22%5BJournal%5D)">Appetite and reward.</a> Front. Neuroendocrinol. 31, 85-103 (2010).</li>
<li>Zheng, H., Lenard, N. R., Shin, A. C., Berthoud, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Appetite+control+and+energy+balance+regulation+in+the+modern+world%3A+reward-driven+brain+overrides+repletion+signals%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+Obesity%22%5BJournal%5D)">Appetite control and energy balance regulation in the modern world: reward-driven brain overrides repletion signals.</a> International journal of Obesity. 33, Suppl 2. S8-S13 (2009).</li>
<li>Skinner, B. F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSkinner%2C+BF+%22The+Behavior+of+Organisms%3A+An+Experimental+Analysis%22">The Behavior of Organisms: An Experimental Analysis</a>. , Appelton-Century. (1938).</li>
<li>Hodos, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+as+a+measure+of+reward+strength%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio as a measure of reward strength.</a> Science. 134, 943-944 (1961).</li>
<li>Hodos, W., Kalman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+increment+size+and+reinforcer+volume+on+progressive+ratio+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Anal.+Behav%22%5BJournal%5D)">Effects of increment size and reinforcer volume on progressive ratio performance.</a> J. Exp. Anal. Behav. 6, 387-392 (1963).</li>
<li>Stafford, D., LeSage, M. G., Glowa, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive-ratio+schedules+of+drug+delivery+in+the+analysis+of+drug+self-administration%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Progressive-ratio schedules of drug delivery in the analysis of drug self-administration: a review.</a> Psychopharmacology. , 139-169 (1998).</li>
<li>Glass, M. J., O'Hare, E., Cleary, J. P., Billington, C. J., Levine, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+naloxone+on+food-motivated+behavior+in+the+obese+Zucker+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">The effect of naloxone on food-motivated behavior in the obese Zucker rat.</a> Psychopharmacology (Berl). 141, 378-384 (1999).</li>
<li>Brennan, K., Roberts, D. C., Anisman, H., Merali, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Individual+differences+in+sucrose+consumption+in+the+rat%3A+motivational+and+neurochemical+correlates+of+hedonia%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Individual differences in sucrose consumption in the rat: motivational and neurochemical correlates of hedonia.</a> Psychopharmacology (Berl). 157, 269-276 (2001).</li>
<li>Vaughan, C., Moore, M., Haskell-Luevano, C., Rowland, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food+motivated+behavior+of+melanocortin-4+receptor+knockout+mice+under+a+progressive+ratio+schedule%5BTitle%5D)+AND+%22Peptides%22%5BJournal%5D)">Food motivated behavior of melanocortin-4 receptor knockout mice under a progressive ratio schedule.</a> Peptides. 27, 2829-2835 (2006).</li>
<li>Haluk, D. M., Wickman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+study+design+variables+and+their+impact+on+food-maintained+operant+responding+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of study design variables and their impact on food-maintained operant responding in mice.</a> Behav. Brain Res. 207, 394-401 (2010).</li>
<li>Richardson, N. R., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+schedules+in+drug+self-administration+studies+in+rats%3A+a+method+to+evaluate+reinforcing+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio schedules in drug self-administration studies in rats: a method to evaluate reinforcing efficacy.</a> J. Neurosci. Methods. 66, 1-11 (1996).</li>
<li>Jewett, D. C., Cleary, J., Levine, A. S., Schaal, D. W., Thompson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neuropeptide+Y%2C+insulin%2C+2-deoxyglucose%2C+and+food+deprivation+on+food-motivated+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Effects of neuropeptide Y, insulin, 2-deoxyglucose, and food deprivation on food-motivated behavior.</a> Psychopharmacology (Berl). 120, 267-271 (1995).</li>
<li>Fulton, S., Woodside, B., Shizgal, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+brain+reward+circuitry+by+leptin%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Modulation of brain reward circuitry by leptin.</a> Science. 287, 125-128 (2000).</li>
<li>Figlewicz, D. P., Bennett, J. L., Naleid, A. M., Davis, C., Grimm, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraventricular+insulin+and+leptin+decrease+sucrose+self-administration+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Intraventricular insulin and leptin decrease sucrose self-administration in rats.</a> Physiol. Behav. 89, 611-616 (2006).</li>
</ol>

Üretim ve bu video-makale Ücretsiz Erişim Med Associates, Inc tarafından desteklenmektedir

Edimsel Koşullanma görevleri gıda motivasyonel özelliklerinde değişiklikleri değerlendirmek için etkili bir araç sağlar. Gıda senin için kolu basına yazıda izni eğitim farelerde ve istikrarlı bir şekilde ayrıntılı deneysel prosedürleri donatı bir PR zamanlamaya tepki. Tüketilen gıdanın miktarı ölçülerek gıda alımını etkileyen tüm faktörler gıda ödüllendirici etkisini modüle değil beri çaba tabanlı tepki önlemleri aynı okuma sağlamaz. Örneğin, sıçanlarda periferik 2-deoksiglukoz yönetimi tarafından kullanılabilecek glukoz tüketen tüketilen serbestçe mevcut gıda miktarını artırır ama gıda için 12 PR görev mola noktaları değiştirmek için başarısız olur. Yanıt PR kesme ayrıca gıda ödülleri kalitesini değişiklikleri yansıtabilir. Örneğin, mola noktaları olumlu tatlı tadı 8 aşağıdaki şekilde sakaroz artışı için motivasyon gösteren sukroz konsantrasyonu ile ilişkilidir </s&gt; kadar. İşte biz bu 24 saat gıda yoksunluğu önemli ölçüde farelerde HFHS gıda için PR kesme artırır göstermektedir. Bunun aksine olarak, leptin anorectic hormonunun periferik uygulanması önemli ölçüde farelerde HFHS yiyecek için noktalarını azaldığı bulunmuştur. Bu bulgular sıçanlarda 12-14 gıda yoksunluğu ve ödül eşikleri üzerinde leptin daha önce bildirilen eylemleri ile uyumludur. Bu protokol kullanılarak zaman akılda tutulması gereken önemli olduğunu edinimi gıda muhafaza yanıt edimsel önemli ölçüde düzenli eğitim (her 1-2 gün) ve bir yiyecek kısıtlaması rejimi uygulayarak fare motivasyonel devlet artırarak geliştirilmiştir. Ayrıca, farelerde daha karmaşık programları (örneğin, FR1 için FR5) için test sırasında değişken performans aza indirmek için önemli olan geçmeden önce takviye zamanında yanıt nispeten istikrarlı sergilerler sağlamak. Bu adımların uygulanması rağmen bazı değişkenliği elde etmek anormal değildirÖzellikle farklı fareler arasında. Bu nedenle, son derece tabi değişkenliği üzerinden kaldırmak mümkün olduğunda bir süre içinde-konular (tekrarlanan ölçümler) tasarım kullanılması önerilir. Içinde-konu testi stabil genetik modifikasyon (örn., nakavt karşı kontrol fareleri) araştırmak için mümkün olmasa da bu ilaçlar, lezyon veya akut (örneğin, optogenetic) genetik manipülasyon etkisini incelemek için kullanılabilir. Şişmanlık ve obezite ile ilişkili hastalıklar dahil molekülleri ve nöral yolları tanımlamak için aciliyet arttı büyüyen bir sorun vardır. Biriken deliller, gıda özlem beynin ödül devrelerini önemli rolü vurgulamaktadır kalori alımı ve kilo artışı. PR görev gıda ödüllendirici etkileri, nörobiyolojik genetik veya farmakolojik manipülasyonlar etkisini ölçmek için değerli bir araçtır.

<html><table border="1"><tbody><tr><td> Madde </td><td> Katalog Numarası </td><td> Şirket </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Fare edimsel odaları </td><td> ENV-009A </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td> Med Associates Inc PO Box 319 St Albans, Vermont 05.478, Amerika Birleşik Devletleri Telefon: (802) 527-2343 </td></tr><tr><td> 8 inputs/16 giriş Akıllı Kontrol Bağlantı Paneli </td><td> SG-716B </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Çekilebilir Ultra hafif Fare kolu </td><td> ENV-312 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Pelet Dispenser </td><td> ENV-203 </td><td>. Med-associates.com / &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; Med Associates, Inc </td><td></td></tr><tr><td> Evi Işık </td><td> ENV-215 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Stimulus Işık </td><td> ENV-221 </td><td> <a href="http://www.med-associates.com/" target="_blank">Med Associates, Inc</a> </td><td></td></tr><tr><td> Tozsuz Hassas 20 mg yüksek yağlı ve yüksek şeker pelet </td><td> F-06.649 </td><td> Bio-Serv </td><td> Bio-Serv Bir 8th Street, Suite 1 Frenchtown, NJ 08825, USA Telefon: (800) -996-9908 </td></tr></tbody></table> Tablo 1. Özel ekipman ve malzeme.

aşamalı-oranı farelerde palatable yüksek yağ ve yüksek şeker gıda tepki

Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

Yağ ve şeker bakımından zengin olan gıdalar belirgin obezite aşırı yeme ve tırmanan oranlarına katkıda bulunmaktadır. Lezzetli gıdaların tüketimi eylem-sonuç ilişkileri güçlendirir ve bu gıdaları elde yönelik gelecekteki davranışlarını pekiştiriyor ödüllendirici bir etkisi üretebilir. Enerji-yoğun yiyecek ödüllendirici etkisini overeating ve obezite gelişiminde derin bir rol oynadığını göstermiştir gıda ödül 1,2 düzenleyen genler, moleküller ve sinir devresi okuyor artan ilgi vardır. Farklı uyaranların ödüllendirici etkisi böyle edimsel koşullanma görevler 3 olarak elde etmek için çalışmaya istekli ölçerek ele alınabilir. Gıda ödül ölçü Edimsel model edinilen ve gıda alma yöneliktir gönüllü davranışsal tepkileri. Ödül gücü Yaygın olarak kullanılan bir ölçü ilerici oranı (PR) donatı planı olarak bilinen bir edimsel bir işlemdir. PR t 4,5sormak, bu konuda birbirini izleyen her ödül için edimsel tepkiler giderek artan sayıda yapmak için gereklidir. Hodos (1961) öncü çalışma son mükâfat elde etmek için yapılan yanıtların sayısı, mükâfat mukavemeti 4 indeksi olarak hizmet eder, kesme adlandırılan olduğunu göstermiştir. Tek başına cevap oranı ölçü değişiklikleri performans kapasitesi değişiklikler mükâfat gücü değişiklikler ayıramam ki edimsel işlemleri yaparken, PR programı türetilen kesme gıda ödüllendirici etkisini bir geçerliliği iyi önlemdir. PR görev sıçanlar (örneğin, 6-8) kötü muamele ve gıda ilaçların ödüllendirici etkisini değerlendirmek, ancak fare 9 daha az bir ölçüde yaygın şekilde kullanılmaktadır. Genetiğiyle oynanmış farelerin ve diyete bağlı obez fare modellerinin kullanımının artması farelerde gıda ödül davranışsal önlemleri taleplerini artırmıştır. Bu yazıda detaylı bir yüksek yağ için (kol-basın) cevap farelerin eğitmek için kullanılan malzemeler ve prosedürlerve takviye bir PR programı üzerinde yüksek şeker gıda topakları. Biz kesme tepki eşikleri takiben akut gıda yoksunluğu artırmak ve leptin anorektik hormonunun periferik uygulanması ile azaltmak ve böylece farelerde bu gıda-edimsel paradigma kullanımını geçerli göstermektedir.

Bu rapor detayları farelerin yüksek yağlı yiyecek ödüllendirici etkisini ölçmek için kullanılan protokol ilerici bir oranı edimsel koşullanma görev kullanarak.

Aşamalı-oranı Farelerde Palatable Yüksek yağ ve yüksek şeker Gıda tepki

Yağ ve şeker bakımından zengin gıdalar, aşırı yemeye ve artan obezite oranlarına önemli ölçüde katkıda bulunur. Lezzetli gıdaların tüketimi...

Aşağıdaki deneyin amacı, fareleri progresif oranlı bir pekiştirme programı kullanarak gıdayla motive edilen bir görevde eğitmek ve test etmektir. Bu, öncelikle farelerin gıda alımlarının ad libitum düzeyinin %60 ila %70'ine düşürülerek vücut ağırlıklarında %5 ila %10'luk sabit bir azalma sağlanmasıyla gerçekleştirilir. Gıdayla motive edilen manivela basma davranışının kazanımını artırmak için fareler, ardından bir otomatik şekillendirme prosedürü kullanılarak sabit oran bir düzeninde, yüksek yağlı ve yüksek şekerli bir gıda ödülü için manivela basmaya eğitilir.Ardından fareler, sabit oran beş dahil olmak üzere daha karmaşık pekiştirme programlarına ve son olarak, gıdanın ödüllendirici etkilerinin güvenilir bir ölçümünü sağlayan progresif oran görevine yanıt vermeleri için eğitilmiştir. Daha sonra, progresif oran programındaki stabil performansın ardından, progresif oran pekiştirme programındaki gıdayla motive olan davranışlardaki değişimleri doğrulamak için bu fareler ya 12 ila 24 saat boyunca gıdadan yoksun bırakılmış ya da intraperitonal yolla retik ajanlar enjekte edilmiştir. Bu deneyin sonuçları, gıda yoksunluğunun gıdayla motive olan davranışı artırdığını, buna karşın retik hormon leptin uygulamalarının yüksek yağlı ve yüksek şekerli gıda ödülleri için gıdayla motive olan davranışı azalttığını göstermektedir.Üst koşullanma görevleri, farklı uyaranların ve davranışların ödüllendirici ve motivasyonel etkilerini değerlendirmek için kullanışlı bir araç sağlar. Progresif oran görevi, madde bağımlılığı ve gıda gibi doğal ödüllerin ödüllendirici etkisini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan, iyi valide edilmiş bir pekiştirme programıdır; her ne kadar sıçan çalışmalarında daha yaygın olarak kullanılsa da, genetik olarak modifiye edilmiş fare modellerinin artan üretimiyle birlikte progresif oran operant görevlerinin farelere uygulanması giderek daha önemli hale gelmiştir. Özellikle, obezite araştırmalarında fare modellerinin kullanımı ve lezzetli, kalorisi yüksek gıdaların ödüllendirici etkilerinin aşırı yemeye ve obeziteye önemli ölçüde katkıda bulunduğu gerçeğinin kabul edilmesi, farelerde gıda ödülünün ölçülmesi ihtiyacını vurgulamıştır.Burada, farelerin artan oranlı pekiştirme çizelgesiyle lezzetli, yüksek yağlı ve yüksek şekerli bir gıda için manivela basmaya eğitilmesi ve test edilmesi amacıyla kullanılan yöntemleri açıklıyor ve tartışıyoruz. Protokole başlamadan önce, hayvanların kullanımını içeren tüm prosedürlerin kurumsal hayvan bakım ve kullanım komitesi tarafından onaylandığından emin olun. Gerektiğinde, ışık-karanlık döngüsünün karanlık evresinde test yapılması önerilir.Fareleri yedi ila 10 gün boyunca ters ışık-karanlık döngüsüne alıştırın. Bu aşamada, farelere standart yem ve suya ad libitum erişim sağlanır. Bu 10 günlük alıştırma süresini takiben, fareler tekli olarak barındırılır ve serbest beslenme vücut ağırlıklarının %90 ila %95'ine ulaşana kadar ad libitum yem alımının %60 ila %70'i sağlanarak gıda kısıtlamasına tabi tutulur.Bu durum, farelerin günlük tartımını gerçekleştirerek kolu bırakma yanıtının kazanılmasını kolaylaştırır. Ağırlık kaybı %5 ila %10'a ulaştığında, eğitim döneminin geri kalanı boyunca daha düşük vücut ağırlıklarını stabilize etmek için günlük tahsis edilen yem miktarı ayarlanır. İlk eğitim oturumundan üç gün önce fareleri kendi kafeslerinde test odasına taşıyın, ardından her bir fareyi kafesinden tek tek çıkararak iki ila üç dakika boyunca tutun. Tutma işleminin ardından fareyi kendi kafesine geri koyun; fareleri, eğitimin başlangıcından önceki gün dahil olmak üzere ardışık üç gün boyunca odaya ve tutulma işlemine alıştırın.Yemle ilgili olası etkileri önlemek için ev kafesine 10 ila 15 adet yüksek yağlı yüksek şekerli pelet yerleştirilir. Operant performansı üzerindeki neofobi etkisini önlemek için burada, %49 oranında killer cow yağı içeren 20 miligramlık yüksek yağlı, yüksek şekerli, tozsuz hassas yem peletleri kullanılır. Her bir fare operant odası, havalandırma fanlı ses yalıtımlı bir kabin içerisinde yerleştirilmiştir.Fare operant odaları, yem haznesinin her iki yanına yerleştirilmiş iki adet ultra hafif geri çekilebilir kol ile donatılmıştır. Her kolun üzerinde bir uyaran ışığı ve kafesin üst kısmında bir ortam ışığı bulunur. Ödül dağıtıcı, odanın dış kısmında yer almaktadır.Odacıklar, akıllı bir kontrol arayüz kabini aracılığıyla Med PC four yazılımı yüklü bir PC bilgisayara bağlanır. Fareler operant odacığa yerleştirilir. Başlangıç eğitim paradigması, tek bir kol basımının hazneye bir yiyecek peleti verilmesini sağladığı sabit oranlı bir pekiştirme programından oluşur.Sadece bir kol aktif olarak belirlenir ve gıda ödülünün verilmesini tetikler. Sağ ve sol kolların tahsisi fareler arasında dengelenmiştir. Eğitim, kol basma davranışını artırmak için kolun üzerine ezilmiş gıda peletlerinin yerleştirildiği bir şekillendirme prosedürü de gerektirir.Bu başlangıç eğitimi sırasında, aktif manivela yanıtı gıda ödülünün verilmesini tetikler ve manivelaya basma ile gıda verilmesi arasında herhangi bir gecikme olmaz. Fareler manivelaya beş kez basmayı öğrendikten sonra, ek manivela basmalarının pelet verilmesiyle sonuçlanmadığı bir mola süresi başlatılır. Mola süresi, farelerin peleti tüketmelerine olanak tanır.Aktif manivela basıldıktan sonra gerekirse daha uzun zaman aşımı süreleri kullanılabilir. Tekrar, her bir sabit oran birde beşe karşılık her beş saniyede bir gıda peleti salınımı gerçekleşir. Zaman aşımı eğitim oturumu bir saat sürer veya 50 pelet teslim edildiğinde sona erer.Opera ve eğitim, yemekle desteklenen opera kazanımı gerçekleşene kadar, aktif ve inaktif manivela arasında üçte bir veya daha fazla ayrım sergileyen ve seans başına 20 veya daha fazla ödül alan fareler elde edilinceye dek yedi ila 10 gün boyunca devam eder. Üç ardışık seans boyunca bu durumun sürmesi, kazanım kriterlerine ulaşıldığı şeklinde değerlendirilir. Yedi ila 10 günlük süre sonunda kazanım kriterlerine ulaşamayan fareler, beş ila yedi gün daha ek eğitime tabi tutulur.Beşinci eğitim gününe kadar ilerleme kaydedilmeyen fareler test dışı bırakılır. Bozulmuş operan kazanımın, belirli farmakolojik ve genetik müdahalelerin bir sonucu olabileceği ve bu nedenle belgelenmesi gerektiği unutulmamalıdır. Üst üste üç oturum boyunca 20 veya daha fazla pelet elde edilmesinin ardından, beş aktif kaldıraç basımının yiyecek peleti verilmesini tetiklediği FR 5 T 5 saniye protokolüne geçilmiştir.FR 5, T 0,5 saniye programındaki eğitim, tepki stabil hale gelene kadar yaklaşık üç ila beş gün sürer. Fare daha sonra progresif oranlı pekiştirme programında eğitilir. PR testi sırasındaki tepki oranı programı, R'nin halihazırda kazanılmış gıda ödülü sayısının bir fazlasına eşit olduğu Richardson ve Roberts'a göre hesaplanabilir.Böylece, bir gıda ödülü kazanmak için gereken tepki sayısı 1, 2, 4 6 9 12 15, 20, 25, 32, 40 50, 62, 77, 95 ve bu şekilde devam eden bir sıra izler. Tamamlanan son oran, kırılma noktasıdır (break point). PR oturumu, herhangi bir 10 dakikalık süre boyunca manivela basılmaması durumunda veya maksimum bir saat sonunda sona erer.Oturumun sonlanmasıyla sonuçlanır. PR pekiştirme programındaki performans, bir saatlik oturumda kazanılan ödül sayısının en az üç ardışık gün boyunca %20'den fazla sapma göstermediğinde stabil kabul edilir; PR görevindeki gıda destekli operant tepkilerin doğrulanması için gıda ödülünü modüle ettiği bilinen manipülasyonların ardından kırılma noktası tepkileri değerlendirilir. Uygulanması nispeten kolay bir test olan gıda yoksunluğu, farenin gıdaya yönelik motivasyonel durumunu artıracak ve böylece kırılma noktalarını yükseltecektir.Fareler, son bazal günden bir gün sonra stabil bazal performans elde edilene kadar ad libitum besleme döneminde önce PR görevinde test edilir. Ev kafesindeki yem kaldırılır ve fareler, açlık başlangıcından 12 ila 24 saat sonra PR görevinde test edilir veya kırılma noktası eşikleri üzerindeki karşıt bir etkiyi araştırmak için antik hormonun periferik uygulaması test edilebilir. Leptin PR testi, bir gün PBS IP enjeksiyonunun ardından, ertesi gün kilogram başına beş miligram leptin enjeksiyonu sonrası gerçekleştirilir.Burada görüldüğü üzere, PR testinden bir saat önce leptin enjekte edilir. Açlık, gıdanın ödüllendirici etkilerini artırır; farelerde 24 saatlik bir açlık, burada görüldüğü gibi, progresif oranlı pekiştirme çizelgesindeki kırılma noktalarını anlamlı derecede artırmıştır. Periferik leptin uygulaması kırılma noktası yanıt eşiklerini düşürdüğü için leptin, farelerde gıda ödülünü azaltır. Bu prosedür uygulanırken, gıda edinme yoluyla operant yanıtın sürdürülmesinin, düzenli eğitimle ve gıda kısıtlama rejimi uygulanarak farenin motivasyonel durumunun artırılmasıyla önemli ölçüde geliştiğinin hatırlanması önemlidir.Ek olarak, daha karmaşık programlara geçmeden önce farelerin tek bir pekiştirme programında nispeten stabil tepkiler verdiğinden emin olmak, test sırasındaki değişken performansı en aza indirgemek için temel önem taşır. Obezite ve obezite ile ilişkili hastalıklar, ilgili moleküllerin ve nöral yolların belirlenmesinin aciliyetini artıran, büyüyen bir sorundur. Progresif oran programı, nörobiyolojik, genetik veya farmakolojik manipülasyonların gıdanın ödüllendirici etkileri üzerindeki etkisini ölçmek için değerli bir araçtır.

progressive-ratio-responding-for-palatable-high-fat-high-sugar-food

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu protokolde güçlendiricidir bir fare gibi duyusal uyaranlar kullanılarak edimsel öğrenme yöntemi açıklar. Bu, önceden herhangi bir eğitim ya da gıda kısıtlama gerektirir ve onu motive davranış, gıda olarak farmakolojik veya doğal bir güçlendiricidir kullanımı olmadan çalışma sağlar.

Fare Aradığınız Edimsel Sensation

Intraoral öz-yönetim: Geçerli çalışma laboratuarı sıçanlarda lezzetli çözümler takviye etkilerini değerlendirmek için yeni bir yöntem değerlendirir. Bu amaçla, operant farklı konsantrasyonda tatlı çözümler ağız içi infüzyonlar için (örneğin bastırarak) yanıt takviye sürekli ve aşamalı oranları programları ile ölçülmüştür.

Laboratuar Farelerinde tat yoğunluğu arttırıcı madde Güçlendirme Properties değerlendirilmesi için yeni bir yöntem: Edimsel İntraoral Self-yönetim

Diyet yağ içeriği etkiler, enerji alımı ve memelilerde vücut yağ kompozisyonu hem de. Seçim bir dizi deneyler yüksek yağlı yiyecek için sıçanların tercih incelenerek, yüksek yağlı yiyecek için kendi tercihinize genetik farklılıkları ve farmakolojik müdahaleleri test etmek mümkündür.

Yağ Tercihi: Yeme Davranışının Bir Roman Model Sıçanlar

Bu çalışma, başarılı bir şekilde translasyon disfaji araştırma kolaylaştırmak amacıyla murin hastalık modellerinde kullanılmak üzere insan videofloroskopik yutma çalışma (VFSS) yöntemleri adapte edilmiştir.

İnsan Videofloroskopik Kırlangıç ​​Eğitim Yöntemleri uyarlanması Algılama ve Mürin Hastalık Modelleri disfajiyi Characterize

Geçerli makalenin üretimi ve yüksek yağlı diyet beslenen farelerin metabolik karakterizasyonu diyet kaynaklı insülin direnci ve obezite bir model olarak açıklar. Daha fazla oral glukoz tolerans testi ve glukoz metabolizma vivo içindetüm vücut değişikliklere izleme insülin tolerans testi gerçekleştirmek için detaylı iletişim kuralları bulunmaktadır.

Vivo glikoz metabolizması farelerde Oral glukoz tolerans testi (OGTT) ve insülin tolerans testi (ITT) kullanarak yüksek yağlı diyet beslenen incelenmesi

Bu iletişim kuralı bir vücut kompozisyon analiz ve metabolik hayvan izleme sistemi vücut kompozisyonu ve farelerde metabolik parametreleri tanımlamak için kullanımını açıklar. Yüksek yağlı beslenme tarafından indüklenen bir obezite modeli örnek olarak bu tekniklerin uygulanması için kullanılır.

Vücut kompozisyonu ve metabolik Caging Analizi yüksek yağ Fed farelerde

Bu protokol, kemirgenlerde aşırı yeme ve obeziteyi modellemek için son derece lezzetli, batı tarzı bir kafeterya diyetinin kullanımını açıklamaktadır. Burada, gıda seçimi, hazırlanması ve ölçümü nün ayrıntılı bir anahatını sağlamakta ve sağlam ve tekrarlanabilir bir fenotip oluşturmaya yardımcı olan metodolojik faktörleri açıklıyoruz.

Kemirgenlerde Diyetkaynaklı Obezitemodellemeiçin Güvenilir Bir Yöntem olarak Lezzetli Batı tarzı Kafeterya Diyet

Burada sunulan sıçanlarda depresyon benzeri ve anhedonik davranış çalışma için bir protokoldür. Bu iki köklü davranış yöntemleri birleştirir, sakaroz tercihi ve yenilik kaynaklı hipofaji testleri, otomatik bir gıda ve sıvı alımı izleme sistemi ile, dolaylı olarak vekil parametreleri kullanarak kemirgen davranışını araştırmak için.

Otomatik Gıda Alımı İzleme Sistemi Kullanan Sıçanlarda Sakaroz Tercihi ve Yenilik Kaynaklı Hipofaji Testleri

Bu makale, farelerde lipid metabolizmasını değerlendirmek için üç kolay ve erişilebilir test sağlar.

Farelerde Tüm Vücut Lipid Taşıma Kapasitesinin Değerlendirilmesi

Gıda alımının zamanlamasını kısıtlamak, diyete bağlı metabolik hastalıkları hafifletmek için umut verici bir müdahale olarak ortaya çıkmıştır. Bu makale, farelerde ritmik gıda alımını ölçmek ve manipüle etmek için şirket içinde inşa edilmiş verimli bir sistemin inşasını ve kullanımını detaylandırmaktadır.

Özel Yapım Bir Besleme Sistemi Kullanılarak Farelerde Ritmik Gıda Alımının Manipülasyonu

Farelerde, M&amp;M'lere (yağ ve şekerden yapılan oldukça lezzetli bir gıda) aralıklı erişim kullanılarak bir tıkınırcasına yeme modeli kuruldu. Bu yüksek yağlı, yüksek şekerli yiyeceğe aralıklı erişimi olan fareler, yiyeceğe sürekli erişimi olan veya hiç erişimi olmayan farelere kıyasla stres benzeri davranışlar, artan kalori alımı ve bu yiyeceği standart yemek yerine tercih etme gösterdi.

Farelerde Aralıklı Tıkınırcasına Alım Modeli

Öğrenin farelerde yüksek yağ ve şeker içeren gıdaların ödüllendirici etkilerini aşamalı oran operant koşullama göreviyle nasıl değerlendirilir. Bu yöntem, obezite araştırmalarında gıda motivasyonunu ve ödül mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

Aşamalı-oranı Farelerde Palatable Yüksek yağ ve yüksek şeker Gıda tepki

Daha fazla video keşfet