Name: Diyabetik Sıçanlarda Termal Nosiseptif Eşik Hızlı Belirlenmesinde (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 45 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda termal nosiseptif eşik belirleme yöntemini kullanarak ağrı hassasiyetini değerlendirmeyi. Bu teknik, diyabetik nöropati ve analjezik etkileri üzerine güvenilir veriler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma American Diabetes Association (ADA), Grant JF1-10-14 (MDiF) tarafından finanse edildi. Biz WSU az Hayvan Kaynakları Laboratuvarı personeline teşekkür etmek istiyorum. Yazarlar minnetle Neil Paton, doktora gelen verilerin istatistiksel analizi ile yardım kabul

Fare ve sıçanların TNTs kullanılarak belirlenir artan sıcak-plate metre [iHPAM, IITC A.Ş. Yaşam Bilimleri (Woodland Hills, CA)]. ; Veri toplama için bir ısı kontrol ünitesi, yazılım (IITC Bölüm # Yumuşak Serisi 8), bir PC (kişisel altındaki ısıtma sistemi ve yukarıda bir pleksiglas gözlem odası ile bir alüminyum plaka (10 x 20 cm): ekipmanları birkaç bileşenden oluşur bilgisayar) ve bir ayak pedalı uzaktan başlangıç ​​için, durdurmak veya birimin kontrol sıfırlayın. Isıtma sistemi de başlangıç ​​/ durdurma / ekipman önünde bir tuş takımı üzerinden manuel ısıtma sürecinin sıfırlamayı sağlar. IHPAM çeşitli ısıtma hızları, bekleme / eşik sıcaklığa ayarlanabilir. 1. Ekipman Set-up <ol><li> Test hayvanları önce, görsel olarak seçilen ısıtma hızı (örneğin, 6 ° C / dk), başlangıç ​​bekleme ve kesme son sıcaklıklarda (örneğin 28 ° C ile 55 ° C, sırasıyla) corroborate üniteyi inceleyin. </li><li> Tüm bağlantıları kontrol edin. Sonuçlarının elektronik kopyasını tutmak için, birim Yazılım Serisi 8 çalıştıran bir bilgisayara bağlı olması gerekir. Alternatif olarak, sonuçların sabit kopya birim seri port üzerinden dışarı basılabilir. </li><li> Ekipmanı test edin. İlk bekleme, son kesme sıcaklıkları ve kesme sıcaklığa ulaşması için gereken saniye cinsinden zamanı: Yazılım Serisi 8 kayıtları veri emin olmak için bir kez ayak basın. </li><li> Bir başka kontrol testi olarak, deney dahil araştırmacılar kendilerini cihazı tecrübe gerekebilir. Ağrı algı anı (46-48 ° C) saçtan elini çekme ne cilde zarar ne de daha sonraki herhangi bir rahatsızlık oluşturur gerekir. </li><li> Birimi kurmak ve adımları 1.3 ve 1.4 sonuçları kaydedildi kez onlar karşılaştırılabilir. Bu ünitenin kullanımı geçersiz olabilecek olası sorunları tespit etmek yararlı olur. Örneğin, başlangıç ​​/ nihai bekleme kesme tempe arasındaki uyumsuzluklarratures ve gerçek biriminin okunması ve / veya birimi ve elle çekilmesi için gerekli olan gerçek plaka sıcaklığı ile gösterilen sıcaklıkları arasında farklılıklar. </li></ol> 2. Normal Hayvanlar Test Ya genç veya yetişkin Wistar rat [post-natal (p) yaşı 21-25 gün], veya herhangi bir genetik arka plan veya cinsiyet farelerde (p21-25) kullanılabilir. Deneylerde kullanılan farelerin suşu C57BL/6J taşımaktadır. <ol><li> Deneyler yapılacak gece önce, iHPAM yerleştirilir bankta kafese koyarak hayvanlar alıştırıldı. Testleri yapılmadan önce iki saat, birimin arka plan gürültü ile hayvanları tanıtmak iHPAM açın. Bu noktada, iHPAM kurmak ve (Adımlar 1) düzgün fonksiyonu doğrulamak için test edilebilir. Yiyecek ve su hayvan (Basamak 2.1) gözlem odacık içinde olması durumu dışında, test boyunca ad libitum sağlanır. Not: Bu impdavranışsal deneylerde laboratuar koşullarında varsayılan tarafından kontrol edildiğini varsaymak değil ortant. Özel dikkat davranışsal çalışmalar (7 Yorumlar) sonucunu etkileyebilecek genetik ve çevresel faktörlere dikkat edilmelidir. </li><li> Yavaşça birim ısıtma plakası üstünde Pleksiglas gözlem odasında normal bir fare / sıçan yerleştirin. Hayvan rahat bir davranışı gösterir kadar hayvan ısıtılmış yüzey (° C ile 28 olarak belirlenmiştir) gelmesini bekleyin. Not: Bu koşullar altında normal erişkin sıçan koklama sırasında zaman zaman gözlem odasının kapağı yukarı doğru duran, bir ilk keşif davranışı göstermektedir. Birkaç dakika sonra, sıçanlar damat gündelik nöbetleri ve rahat bir davranış gösterebilir. Raslantı Çevreyi koklama ederken Bazen, fareler rahat bir vücut postürü (eğilimli uzantısı) ile yatıyordu. Normal fare genellikle sıçan daha aktiftir. Ancak, fareler i birkaç dakika sonra rahat bir keşif davranışı göstermekgözlem odası n. Bu ya (örneğin, atlama, gözlem odasından kaçmaya çalışırken) kaçan davranışlar veya savunma tutumları (örneğin, squealing) gözlemlemek oldukça nadirdir. Farelerin bir fare diğerine 8 ağrı iletişim dikkat etmek de önemlidir. Bu nedenle, ayrı kafeslere yerleştirilir testi fareler için önemli olabilir. </li><li> Yeri her açıda gözlemler izin vermek, gözlem odasının arka yansıtır. Bir dijital video kamera tutan bir üçayak nocifensive (ağrı kaçınarak) davranış ortaya çıkmıştı hangi anı belirlemek için yardımcı olabilir. </li><li> Bir kez hayvan ayak basarak plakası kadar gözlem odasında sıcağında rahat. Plaka sıcaklığı 6 ° C / dakika hızında ısındığı zaman, normal hayvanlar ya arka-pençe içeren nocifensive davranışlar 46 ila 48 ° C 3,5,9,10 için öfkeli * Genellikle sıcaklıklar. Böylece, hayvan gözlemler, tipik çıkarıldı formuduryaklaşık 3 dakika sonra ation odası. Not: sallayarak ve / veya kaldırma sırasında bir fare ya da fare yani tipik nocifensive yanıtı gözlemek, arka-pençe, yalama, termal uyaran sona erdirmek için yeterlidir. Bu, ayak pedalı presleme ile elde edilir. Bu noktada, yazılım plaka sıcaklığı kaydeder ve plaka hemen bekleme sıcaklığında (28 ° C) kadar soğur (~ 0.5 dakika) ulaşılır. Bu sıcaklık, yani herhangi bir nocifensive tepki uyandıran bir normal (kontrol) hayvanın zararlı ısı eşiği (TNT) olarak kabul edilir. * Bazen, özellikle farelerde, zararlı sıcaklığına nocifensive davranışı ilk görülen veya her iki forepaws (örneğin, otururken yalama), birkaç saniye arka-pençeleri önce olabilir. Bununla beraber, ön-pençe yalamaya bakım davranış normal bir bileşendir. Bundan dolayı, sadece arka pençe-reaksiyonlar değerlendirilir. Durumlarda ise farelerin de onların arka-pençeleri damat olabilir. Ancak, normal bir tımar n doBirkaç saniye öteye ot, yalama yoğun içermez ve genellikle onun pençeleri temizledikten sonra sona erer. </li><li> Yavaşça plakadan hayvan kaldırmak ve ilgili kafese yerleştirin. Isı eşik ölçümleri daha sonra diğer kontrol (normal) bir hayvan için tekrarlanır. Not: TNTs gözlem odasından gelen hayvan çıkarmadan 1-2 dakika aralıklar ile tek bir hayvanda tespit edilebilir. Sıçan ya da fare TNT tespitler birkaç gün içinde birkaç kez tekrarlanabilir. Bu, ortalama bir birey hayvanın TNT yanı sıra, yaş ile değişimlerini belirlemek için özellikle yararlıdır. </li><li> Kontrol hayvanları TNT, üç ya da daha fazla eşik ± SEM ortalaması olarak ifade edilir. </li><li> Elde edilen verilerin istatistiksel analizi farelere veya sıçanlara farklı tedavi grupları karşılaştırmak için yapılır. Varyans analizi de dahil olmak üzere Parametrik prosedürler uygun veriler normal dağılım nerede kullanılır ve tedavi gruplarının homo nerede olabilirskedastic; bu koşullar aşağıdaki yaklaşımlar uygulanabilir tatmin edildiğinde. Ile birlikte / tedavi edilmeden veya farklı zaman noktalarında (örn., Şekil 3 içinde verilerin) bireysel TNTs tekrarlanmıştır birden ölçümleri yani farklılıklar tespit etmek için Newman-Keuls testi, ardından varyans analizi. Eşleştirilmiş Student t-testi ilaç tedavisinden sonra vs önce iki veri grupları, yani TNTs karşılaştırmak için kullanılabilir; t-testi eşleştirilmemiş (örneğin araç ile tedavi edilen hayvanlar vs uyuşturucu tedavi edilen TNT değişiklikler farklılıkları belirlemek için kullanılabilir Şekil 4, veri). </li></ol> 3. Diyabetik Hayvanlar Test Streptozotosin (STZ) ile diyabet sıçan PDN mekanizmaları incelemek ve analjezik ilaçlar ve tedaviler 11,12 değerlendirmek için en sık kullanılan hayvan modelidir. Sıçanlar STZ bir intraperitoneal tek doz (60 mg / kg) olabilir b tarafından yapılan diyabetike diyabet 11 başlangıcından sonra 3. haftasında termal hiperaljezi için test. O değil tüm diyabetik sıçanlarda PDN geliştirmeye dikkat etmek önemlidir. Bununla birlikte, hiperaljezi (~% 50) geliştirmek mi hayvanların kolayca tespit edilebilir. Gerçekten de, kendi TNTs Normal * daha düşüktür. C yerine, 28 * STZ-diyabetik sıçan TNTs belirlemek için, 15 bir başlangıç ​​plaka sıcaklığı ° C kullanılır. Bu değişimin nedeni PDN ile en diyabetik hayvan hiperaljezik 2,11 olması bekleniyor olmasıdır. Bu nedenle, normal zararlı ısı eşikleri daha düşük olacaktır (örneğin, &lt;45 ° C). <ol><li> A, diyabetik sıçan test cihazının üst kısmında gözlem haznesi yerleştirilir. Hayvan, hayvan rahat bir davranışı gösterir kadar plaka yüzeyine gelmesini izin verilir. Not: Tipik olarak, bir diyabetik sıçan normal davranış çok göstermez. Diyabetik sıçanlarda uyuşuk, genellikle hipoaktif vardır; genellikle gösterenhareket kısıtlılığı ve yavaş tımar. Bu gözlem odasının kapağı doğru sıralamalar gözlemlemek nadirdir. Birkaç dakika sonra, diabetik ratlarda sakince rahat çevrenin koklama ile, odanın bir köşesinde kalabilirsiniz. </li><li> Diyabetik hayvan gözlem odasında rahat bir kez diyabetik sıçan arka / ön pençesini ya içeren nocifensive davranışlar gösterebilir Adım 2.3 gibi, plaka ısıtılır. Bu genellikle zararlı olmayan plaka sıcaklıkları (örneğin, &lt;45 ° C), ya da 6 ° C / dk sıcaklık artışı ile birlikte odasında en fazla 5 dakika sonra olur. Not: Bir genç erişkin diyabetli sıçanlarda nocifensive tepkisi normal bir sıçan bu farklı değildir. Ancak, bu tür davranışları çağrıştıran en düşük sıcaklık önemli ölçüde azaltılmaktadır. </li><li> Adım 2.4 bak </li><li> Deney günü içinde üçten fazla eşiklerinin ortalama ° C olarak ifade edilen ortalama ± SEM diabeti bir zehirli ısı eşik olarak kabul edilirc hayvan. Not: birine benzer bir paradigma normal veya diabetik ratlarda için açıklanan ısı eşiklerinde analjezik termal anti-nocifensive etkisini belirlemek için takip edilebilir. </li></ol> 4. Test Analjezi Ilaçların anti-nosiseptif özellikleri (örn., analjezikler) yanı sıra, bu en az etkili bir doz olarak farmakolojik parametrelerinin belirlenmesi kolayca yukarıda anlatılan aşamalara göre elde edilebilir. Bu sıçanlar / farelere bir analjezik uygun dozlarda kendi TNTs artacağı tahmin edilmektedir. Bu termal hiperaljezi 3 olan hayvanlarda, özellikle duyarlıdır. Ancak, sonuçların yorumlanması önyargı önlemek için, bir hayvan grubunun davranış gözlem katılan araştırmacılar bilmek ya da hayvanların tedavi veya değil olsaydı farkında olmamalıdır. Ayrıca, gözlemci tarafından enjekte edilecek ilaçların başka bir araştırmacı tarafından hazırlanan ve etiketli olabilirA, B, C, vb Dozaj tanımlanan hayvan başına tek tek doz listeleyen bir çıktı sağlanmaktadır. Test edilecek ilaç ile ilgili olarak, potansiyel bir analjezik farklı dozlar normal veya diabetik hayvanlar 5-15 dakika önce, davranış testleri için de uygulanabilir. Uygun denetimleri dahil (örneğin, taşıt enjekte yaştaki hayvanlar tek başına ve / veya PDN olmayan diyabetik sıçan) ve (plaka örneğin, aynı başlangıç ​​sıcaklığı) aynı koşullar kullanılarak test edilmelidir. Ilaçların kronik etkileri de test edilebilir. 5.. Temsilcisi Sonuçlar Genç yetişkin, normal olmayan sıçanlarda veya farelerin ya arka-pençesinde nocifensive reaksiyonlar çağrıştıran düşük plaka sıcaklığı 2-6 aşağıdaki adımları 2-1 belirlendi. Şekil 1 normal, genç yetişkin sıçan ve farelerin TNT gösterildiği gibi idi 47.2 ± 0.2 ° C ve 47.5 ± 0.5 ° C idi. Biz obse varbireyin TNTs (Şekil 2A), ne de aynı yaştaki bireylerin (Şekil 2B) arasında TNTs önemli değişiklikler SVEd ne önemli günlük değişim. Cinsiyet nedeniyle TNT farklar (gösterilmemiştir) görülmedi. Genç erişkin STZ-diyabetik sıçan TNTs normal farelere (Adımlar 3,1-3,3) için de benzer bir şekilde belirlenmiştir. Ancak, başlangıç ​​plakası sıcaklığı 15 ayarlandı ° C yerine 28 ° C STZ-diyabetik sıçan nocifensive davranışının bir birey içinde ve onbir gün post-STZ enjeksiyon başlangıç ​​günlük bir şekilde, en az üç kez değerlendirildi. Şekil 3, STZ-diyabetik sıçan TNT önemli bir düşüş (p &lt;0.01) &#39;de gösterildiği belirgindir iki hafta post-STZ enjeksiyon hale gelir. STZ-diyabetik sıçanların ortalama TNT 45.6 ± 0.1 ° C (n = 16, 14-23 gün birikintilerini değerleri). Norma göre anlamlı derecede düşük TNT sergileyerek Diyabetik sıçanlardal PDN olarak değerlendirildi. Bunlar, sıçanlar, bir analjezik, anti-akut nosiseptif özellikleri (bileşik A) test etmek için kullanıldı. TNTs beş dakika testinden önce tek başına bileşik veya aracı ya tek bir dozunun enjekte normal ve diyabetik sıçan belirlendi. Aracın tek başına (45.6 ° C vs 47.6 ° C, sırasıyla) ile tedavi edilen sıçanlarda karşılaştırıldığında, Şekil 4&#39;te gösterildiği gibi, bileşiğin tek bir doz periton içi önemli ölçüde diyabetik sıçan TNTs artmıştır. Bileşik A ve anti-nocifensive etkisi ayrıca normal farelere görülmüştür;. Önemlidir (p &lt;0.01), bu daha az belirgin (47.4 ° C vs 48.0 ° C, sırasıyla) olmasına rağmen, <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig1.jpg" /> Şekil 1.. Normal yetişkin genç sıçan veya fare TNTs Tayini: erişkinlerde sıçanları (p21-24) veya farelerin (P20-21) arasında TNTs adımları abo anlatılanlara iHPAM test edilmiştirettik. 12, sıçan ve farelerin 25 arasında olan toplam test edildi. Ölçümleri birkaç gün içinde yapıldı ve sonuçlar toplandı. Sonuçlar ortalama ± SEM olarak ifade edildi. Bu fareler kaydedilen minimum ve maksimum değerler TNT 46.2 ° C ve 48.6 ° C idi. Farelerin durumunda, kayıt maksimum ve minimum değerlerinin TNT sırasıyla 48.8 ° C ila 44.9 ° C idi. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig2.jpg" /> Şekil 2. Sıçanlar ve fareler TNTs Yaşı-bağımlılık: A) çizilen 5 gün boyunca en az günde üç kez tespit yaş 21 gün dört normal ratlar (n = 4) TNTs olan B) farelerin TNTs belirtilen bir kez tespit littermates. yaşları. Her belirlenmesi nokta üst üste sayılar kullanılır littermates sayısını temsil eder. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig3.jpg" /> Şekil 3. Diyabetik sıçanlarda hiperaljezik 3 haline bizDiyabetin başlangıcından sonra eks: altı (n = 6) yaşça genç erişkin STZ-diyabetik sıçan TNTs 11 gün diyabet sonrası indüksiyon başlangıç ​​her gün belirlendi. TNT günlük ortalamalar (ortalama ± SEM) gösterilir. 11-13 gün sonrası STZ enjeksiyonu arasında tespit Diyabetik TNTs normal sınırlarda (kırmızı çizgi) içinde idi. STZ enjeksiyonu TNTs 45.1 olarak ölçüldü İki hafta sonra ± 0.4 ° ​​C (p &lt;0.05). <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3785/3785fig4.jpg" /> Şekil 4. STZ-Diyabetik sıçanlarda bileşik B Akut anti-nocifensive etkiler. Genç erişkin normal farelere (mavi grubu n = 12) ve yaş STZ-diyabetik sıçan hiperaljezik (yeşil grubu n = 6) araç intraperitoneal sonra iHPAM test edilmiştir eşleştirilmiş (koyu çubuklar) ya da bileşik, A (açık çubuklar). Her bir işlem (aracın kontrolü ya da bileşik, A-arıtılmış) için ortalama ± SEM TNT gösterilmiştir. Asteriskler istatistiksel olarak farklılık göstermek(P &lt;0.05).

<ol><li>Baron, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+neuropathic+pain%3A+From+mechanisms+to+symptoms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+J.+Pain%22%5BJournal%5D)">Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms.</a> Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).</li>
<li>Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tactile+allodynia+and+formalin+hyperalgesia+in+streptozotocin-diabetic+rats%3A+Effects+of+insulin%2C+aldose+reductase+inhibition+and+lidocaine%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine.</a> Pain. 68, 293-299 (1996).</li>
<li>Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noxious+heat+threshold+measured+with+slowly+increasing+temperatures%3A+Novel+rat+thermal+hyperalgesia+models%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models.</a> Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).</li>
<li>Ankier, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+hot+plate+tests+to+quantify+antinociceptive+and+narcotic+antagonist+activities%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities.</a> Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).</li>
<li>Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+resiniferatoxin+on+the+noxious+heat+threshold+temperature+in+the+rat%3A+A+novel+heat+allodynia+model+sensitive+to+analgesics%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics.</a> Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).</li>
<li>Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heat+injury-induced+drop+of+the+noxious+heat+threshold+measured+with+an+increasing-temperature+water+bath%3A+A+novel+rat+thermal+hyperalgesia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model.</a> Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).</li>
<li>Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+ranking+of+genetic+and+laboratory+environment+factors+influencing+a+behavioral+trait%2C+thermal+nociception%2C+via+computational+analysis+of+a+large+data+archive%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).</li>
<li>Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312, 1967-1970 (2006).</li>
<li>Hunt, S. P., Koltzenburg, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHunt%2C+SP+%22The+neurobiology+of+pain%22">The neurobiology of pain</a>. , Oxford University Press. New York. (2005).</li>
<li>Willis, W. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWillis%2C+WD+%22The+pain+system+%3A+The+neural+basis+of+nociceptive+transmission+in+the+mammalian+nervous+system%22">The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system</a>. , Basel, New York, Karger. (1985).</li>
<li>Calcutt, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCalcutt%2C+N+%22Modeling+diabetic+sensory+neuropathy+in+rats.+In%3A+Methods+in+molecular+medicine.+Pain+research%3A+Methods+and+protocols%22">Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols</a>. , Humana Press. Totowa, N.J. (2004).</li>
<li>Bars, D. L. e, Gozariu, M., Cadden, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+nociception%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Animal models of nociception.</a> Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).</li>
<li>Shaikh, A. S., Somani, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+and+biomarkers+of+neuropathy+in+diabetic+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents.</a> Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).</li>
<li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32, 77-88 (1988).</li>
<li>Hardy, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+the+rapid+measurement+of+skin+temperature+during+exposure+to+intense+thermal+radiation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation.</a> J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).</li>
<li>Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+of+small+myelinated+%26quot%3Bwarm%26quot%3B+fibers+to+noxious+heat+stimuli+applied+to+the+monkey%27s+face%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Responses of small myelinated &quot;warm&quot; fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey's face.</a> Brain Res. 62, 260-263 (1973).</li>
<li>Hammond, D. L., Ruda, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+alterations+in+thermal+nociceptive+threshold+and+the+distribution+of+immunoreactive+calcitonin+gene-related+peptide+and+substance+p+after+neonatal+administration+of+capsaicin+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Lett%22%5BJournal%5D)">Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat.</a> Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).</li>
</ol>

Biz bu deneylerde kullanılan analjezik kimliğini ifşa etmemeyi karar verdik. Burada gösterilen sonuçların bir kısmı Amerikan Diyabet Derneği (San Diego CA) ve diyabet (Lizbon, Portekiz) Çalışmaları, Avrupa Birliği 47 inci Yıllık Toplantısı 71 st Bilimsel Toplantısı&#39;nda sunulan edilmiştir.

Benzer şekilde termal hiperaljezi 4,13 ölçmek için klasik hot plate testi, nosisepsiyon tayininde burada açıklanan sıçanlar ve fareler nocifensive davranışı ölçmek için hızlı ve güvenilir bir şekilde izin verir. Ancak, klasik test aksine, artan sıcak-levha yöntemi non-invaziv ve neredeyse stressiz olduğunu. Dizginlemek bazı (yani, hayvanın gözlem odasında olmalı) testi gerçekleştirmek için gerekli olmakla birlikte, sıçan ya da fare benzeri alanlarda (örneğin, konut kafes) alışkın. <p cla...

<table border="1"><tbody><tr><td> Isim </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> Artımlı Hot-Plate Analjezi Metre </td><td> IITC A.Ş. Yaşam Bilimleri </td><td> Part # PE34 </td></tr><tr><td> Yumuşak Serisi 8 </td><td> IITC A.Ş. Yaşam Bilimleri </td><td> Part # Series8 </td></tr><tr><td> Streptozosin </td><td> Calbiochem </td><td> 572201 </td></tr></tbody></table>

diyabetik sıçanlarda termal nosiseptif eşik hızlı belirlenmesinde

Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats

Ağrılı diyabetik nöropati (PDN) hiperaljezi, yani zararlı uyarana artmış duyarlılığı ve allodini yani, normalde zararsız 1 uyaranlara karşı aşırı duyarlılığı ile karakterize edilir. Hiperaljezi ve allodynia 2 diabetes mellitus, birçok farklı kemirgen modellerinde incelenmiştir. Ancak, Bölcskei ark, hayvan modellerinde &quot;acı&quot; nın belirlenmesi belirttiği kendi öznel doğası 3 dolayı zordur. Ayrıca, zararlı termal uyaranlara davranışsal tepkileri belirlemek için kullanılan geleneksel yöntemler genellikle tekrarlanabilirlik ve farmakolojik hassasiyeti 3 yoksundur. Örneğin, Ankier 4 arasında sıcak plaka yöntemi kullanılarak, kılını, yoksunluk ve / ya da arka-ve / veya ön-pençelerin yalamaya sabit bir yüksek ısı uyarıcılar (52-55 ° C) refleksi olarak ölçülür. Ancak, termal uyarana hiperaljezik hayvanların tekrarlanabilir yeniden farklılıklar görünmüyorbu supra-eşik sıcaklıkları 3,5 kullanarak esnek gecikmeleri. Bölcskei ve ark. 6 arasında yakın zamanda açıklanan bir yöntem olarak, burada açıklanan prosedürler farelerde ve sıçanlarda termal nosiseptif eşiklerinin hızlı, hassas ve kesin olarak belirlenmesi (TNTs) sağlar. Metodu fare / sıçan plantar yüzeyinin derisine uygulanmış çok yavaş artan termal uyaran kullanır. Yöntemi gibi PDN gibi hiperaljezik devletleri sırasında, anti-nosisepsiyon incelemek için duyarlıdır. Körük açıklanan prosedürler Almasi ark 5 ve Bölcskei ark 3 ile detaylı olarak yayınlanan olanlar dayanmaktadır. Prosedürler Laboratuar Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (LACUC), Wright State University onaylanmıştır Burada anlatılan.

Burada, biz, sıçan ya da fare nocifensive davranışı göstermek olduğu en düşük sıcaklık belirlemek için hızlı, güvenilir ve basit bir prosedür tarif<em&gt; Yani</em&gt;<em&gt; Termal nosiseptif eşiği</em&gt; (TNT). Eğer varsa bu yöntem hayvanlara, stres, en az TNTs hassas ve tekrarlanabilir bir tahmini sağlayan bir yavaş artan termal uyaran de geçerlidir.

Diyabetik Sıçanlarda Termal Nosiseptif Eşik Hızlı Belirlenmesinde

Ağrılı diyabetik nöropati (ADN); hiperaljezi, yani zararlı uyarana karşı artmış duyarlılık ve allodini, yani aşırı duyarlılık ile karakterizedir...

Bu prosedürün genel amacı, kontrol ve diyabetik sıçanların termal nosiseptif eşiğini belirlemektir. İlk adım, hayvanın artımlı sıcak plaka ve analjezi ölçere yerleştirilmesidir. Ardından, yüzey ısınırken sıcak plakanın sıcaklığı kademeli olarak artırılır.Hayvanın saldırgan davranışlar sergileyip sergilemediği gözlemlenir. Bu davranış gözlemlendiğinde ısıtma durdurulur ve plaketin o anki sıcaklığı kaydedilir. Nihayetinde, analjeziklerle tedavi edilen veya ağrılı diyabetik nöropatiden muzdarip hayvanlarda termal nosiseptif eşikteki değişimleri gösteren sonuçlar elde edilebilir.Bu tekniğin, normalde eşik üstü sıcaklığa ayarlanan sıcak plaka gibi mevcut yöntemlere göre temel avantajı, yöntemimizin plakanın sıcaklığını kademeli olarak artırarak termal nosiseptif eşiğin doğru bir şekilde belirlenmesine olanak tanımasıdır. Termal nosiseptif eşik veya TNT, artımlı sıcak plaka analjezi ölçer veya IH pam kullanılarak belirlenir. Bu sistemin bileşenleri arasında bir pleksiglas gözlem odası, sıcaklık kontrollü bir alüminyum plaka, programlama için kullanılan bir tuş takımı ve ünitenin uzaktan kontrolü için bir ayak pedalı yer almaktadır.Veriler, yakındaki bir bilgisayarda özelleştirilmiş bir yazılım kullanılarak toplanır. Alternatif olarak, ünitede bulunan bir seri port kullanılarak basılı kopyalar alınabilir. Hayvanın davranışının görünürlüğünü artırmak için pleksiglas odanın arkasına bir ayna yerleştirin.Ardından, istenen ısıtma hızlarının yanı sıra başlangıç bekleme ve final kesme sıcaklıklarını ayarlayın. Sistemi başlatmak ve durdurmak için ayak şalterine basın. Başlangıç bekleme ve final kesme sıcaklıklarının yanı sıra final sıcaklığa ulaşmak için geçen sürenin kaydedildiğini onaylayın.İstenirse, deneyci sistemi kendi üzerinde test edebilir. El, ağrı algılandığı anda metal plakadan çekilmelidir. Algı ne cilde zarar vermeli ne de daha sonra herhangi bir rahatsızlığa yol açmalıdır.Kafesleri testlerin gerçekleştirileceği tezgaha yerleştirerek alışma sürecini bir gece önceden başlatın. Testlerden iki saat önce, hayvanların cihazın arka plan gürültüsüne alışması için IH panini çalıştırın.Bu aşamada, sistem daha önce görüldüğü gibi kurulabilir ve test edilebilir. Hayvanlar ortama alıştıktan sonra, bir sıçanı sıcak yüzeyin üzerindeki pleksiglas hazneye nazikçe yerleştirin. Hayvanın hazneyi birkaç dakika boyunca keşfetmesine izin verin.Test etmeye başlayın. Hayvan denemeye başlamak için rahat göründüğünde, plakayı ısıtmaya başlamak için ayak anahtarına basın. Plaka ısınırken hayvanın davranışlarını gözlemleyin.Genellikle, bu yöntemde yeni olan kişiler, kitle saldırgan davranışlarının tanımlanması her zaman kolay olmadığı ve pratik gerektirdiği için zorluk yaşayacaklardır. Hiçbir saldırgan davranış, her iki arka gözeneğin yalanması, sallanması veya kaldırılması ile karakterize edilmez. Gözlemlenen ilk davranışın dört gözeneğin yalanması olabileceğini ve bunu arka gözeneklerin verdiği bir reaksiyonun takip edebileceğini not etmek faydalıdır.En belirgin ağrı davranışı gözlemlendiğinde, denemeyi sonlandırmak için ayak pedalına basın ve hayvanı çıkarıp kendi kafesine geri götürün. Bu davranışı tetikleyen sıcaklık, kontrol hayvanının termal nosiseptif eşiği veya TNT olarak kabul edilir. Ünite temizlenir ve test, sıradaki hayvan için tekrarlanır.Burada normal genç yetişkin sıçanların ve farelerin termal nosiseptif eşikleri yer almaktadır. Buradaki veriler, sıçanların TNT değerlerinin dört günlük bir test süresi boyunca değişmediğini göstermektedir. Benzer şekilde, farelerin TNT değerleri farklı yaşlar arasında tutarlılık göstermiştir.Bu örnekte, genç yetişkin STZ diyabetik sıçanların TN TS değerleri tekrarlanan ölçümlerle belirlenmiştir. Diyabet indüksiyonundan iki hafta sonra başlayarak termal nosiseptif eşiklerde istikrarlı bir düşüş görülebilir. Burada, analjezik bileşiğin akut antinosiseptif özellikleri test etmek için IH pam kullanılmıştır.A bileşiği, kontrol hayvanlarında taşıyıcı alanlara kıyasla hafif bir analjezik etki üretmiştir. Ancak, bileşik verilen diyabetik hayvanlarda analjezi, taşıyıcı kontrollerine göre daha belirgindi. Bu prosedürü uygularken, hayvanın davranışlarını, özellikle hayvanın cept T bölgesinin yakınında meydana gelenleri sürekli olarak izlemeyi hatırlamak çok önemlidir.

rapid-determination-thermal-nociceptive-threshold-diabetic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Algoritmalar insan deneklerin deneysel iltihaplı deride ısı ve mekanik ağrı eşikleri değerlendirilmesi gösterilmiştir. Iki ağrı test paradigmalar, acı verici, iki büyük periferik sinir lifi popülasyonları bağımsız nosiseptif işleme incelemek, yani miyelinli olmayan C lifleri ve küçük A-delta lifleri miyelinli.

İnsan denekler üzerinde iltihaplı cilt ısı ve mekanik ağrı eşiğini Belirlenmesi

Cerrahi basitlik ve sağlam davranışsal sonuçları nedeniyle, siyatik sinirin kronik daralma nöropatik ağrı seçkin hayvan modelleri biridir. Ameliyat sonrası 24 saat içinde, ağrı aşırı duyarlılık kurulan ve kantitatif bir von Frey aesthesiometer (mekanik test) ve plantar analjezi metre (termal testi) kullanılarak ölçülebilir.

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Bu opioid kaynaklı hiperaljezi ve farelerde tolerans gelişimini incelemek için bir protokol açıklar. Naif ve morfin ile tedavi edilen hayvanların, termal ve mekanik nosiseptif yanıtların ölçümü dayanarak, ağrı duyarlılığı (hiperaljezi) 'de artışı ölçmek ve kronik opiat uygulama ile bağlantılı analjezi (tolerans) azalma sağlar.

Termal ve Mekanik nosiseptik Usuller kullanma Farelerde Morfin kaynaklı Hiperaljezi ve Analjezik Hoşgörü Değerlendirilmesi

Bu çalışma yüksek yoğunluk odaklı ultrason diyabetik nöropatik sinir aksiyon potansiyelleri engellemek için uygulanan metodoloji sunar.

Sinir iletim için ultrasonik bir araç diyabetik sıçan modellerinde engelleme

Burada verilen kronik post-iskemi ağrı (CPIP) bir hayvan modeli kurmak için adımları ayrıntıları bir protokoldür. Bu insan kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I taklit iyi tanınan bir modeldir. Mekanik ve termal hipersensitiviteler daha da değerlendirilir, ayrıca CPIP sıçan modelinde gözlenen kapsaisin kaynaklı nosifensif davranışlar.

Sıçanlarda Kompleks Bölgesel Ağrı Sendromu Tip-I kronik Post-Iskemi Ağrı Modeli

Modifiye cerrahi, hem ortak peroneal hem de sural sinirleri yaralamak için sadece bir ligasyon ve bir kesi gerektiren fare veya sıçan korunmuş sinir yaralanması modeli için basitleştirilmiş bir yöntemdir.

Farelerde Nöropatik Ağrının Modifiye Edilmiş Korunmuş Sinir Yaralanması Cerrahisi Modeli

Sırt ağrısının önlenmesi ve yönetimi için yeni terapötik müdahaleler geliştirmek için, bu tedavilerin mekanizmalarını ve etkinliğini translasyonel bir bakış açısıyla incelemek için hayvan modellerine ihtiyaç vardır. Mevcut protokol, sıçandaki mekanik duyarlılığı değerlendirmek için standartlaştırılmış bir yöntem olan BMS testini açıklamaktadır.

Kronik Sırt Ağrısının Mekanik Araştırılması için Sıçanda Geri Mekanik Duyarlılık Değerlendirmesi

Bu protokol, operant tabanlı bir orofasiyal ağrı değerlendirme cihazı kullanılarak nöropatik orofasiyal ağrının bir sıçan modelinde mekanik aşırı duyarlılığın değerlendirilmesini açıklar.

Sıçanlarda Sinir Hasarına Bağlı Mekanik Aşırı Duyarlılığın Orofasiyal Operant Ağrı Testi Kullanılarak Değerlendirilmesi

Parsiyel siyatik sinir ligasyonu, termal ve mekanik uyaranlara abartılı tepkilerle karakterize uzun süreli kronik nöropatik ağrıya neden olur. Nöropatik ağrının bu fare modeli, ağrı yönetimi için yenilikçi terapileri incelemek için yaygın olarak kullanılır. Bu makalede, standardizasyonu ve tekrarlanabilirliği artırmak için cerrahi prosedür ayrıntılı olarak anlatılmaktadır.

Kısmi Siyatik Sinir Ligasyonu: Yeni Tedavilerin Antinosiseptif Etkisini İncelemek için Kronik Nöropatik Ağrının Bir Fare Modeli

Minör kronik daralma yaralanması olan sıçanlar için "Üç Manipülasyon ve Üç Akupunktur Noktası" tuina tedavisini gerçekleştirmek için tuina manipülasyon simülatörünü kullanan bir protokol sunuyoruz ve davranış analizi yoluyla ağrı değişikliklerini ve enzime bağlı immünosorbent testi kullanarak inflamatuar faktör ekspresyonundaki değişiklikleri test ederek 24 saat içinde tuina'nın etkili analjezik zaman noktalarını değerlendiriyoruz.

Tek Seferlik Tuina Müdahalesinden Sonra 24 Saat İçinde Sinir Yaralanması Olan Sıçanlarda Ağrı Değişikliklerinin Özellikleri

Ağrı araştırmalarındaki son gelişmeler, farmakolojik olmayan bir tedavi olarak yeşil ışık yayan diyotların (GLED) kullanılmasının potansiyelini vurgulamaktadır. GLED ağrı yollarını modüle ederek etkili ağrı kesici sağlar. Bu makale, GLED maruziyet protokollerini standartlaştırmayı ve iyileştirmeyi, çalışmalar arasında tutarlılığı artırmayı ve bu tedavinin klinik uygulamasını ilerletmeyi amaçlamaktadır.

Yeşil Işık Yayan Diyotların Ağrı Yönetimindeki Rolünü Değerlendirmek için Fotonöromodülasyon Tekniklerinin Optimize Edilmesi

Öğrenin, sıçanlarda termal nosiseptif eşik belirleme yöntemini kullanarak ağrı hassasiyetini değerlendirmeyi. Bu teknik, diyabetik nöropati ve analjezik etkileri üzerine güvenilir veriler sağlar.

Diyabetik Sıçanlarda Termal Nosiseptif Eşik Hızlı Belirlenmesinde

Daha fazla video keşfet