Akım Sitometri ve Otomatik Manyetik Aktif Hücre Sıralama (AutoMACS) kullanarak Naive ve Pankreas Tümör taşıyan fareler ile myeloid türevi bastırıcı hücreler (MDSC) hazırlanması

Aşağıdaki deneyin genel amacı, in vivo ve in vitro deneylerde kullanılmak üzere fare dalaklarından canlı miyeloid türevli baskılayıcı hücreler veya M DSC'ler içeren bir GR bir pozitif zenginleştirilmiş lökosit popülasyonunu hızlı bir şekilde oluşturmaktır. İlk olarak, birkaç fareden alınan dalaklar toplanır ve tek hücreli bir süspansiyon oluşturmak için işlenir. Zenginleştirmeden önce MDSC yüzdesini ölçmek için, havuzlanmış hücrelerin küçük bir kısmı 96 kuyulu V alt plakaya aktarılır.

MAC one ve GR one yüzey antijenleri etiketlenir ve etiketli hücreler akış sitometrik analizi için faks tüplerine aktarılır. Kalan havuzlanmış lökositler, GR one'a karşı florokrom konjuge bir antikor ile boyanır ve anti GR one antikoru üzerindeki florokroma bağlanan manyetik mikro boncuklarla inkübe edilir. GR bir pozitif ve GR bir negatif popülasyonlar daha sonra popülasyonun GR bir zenginleştirmesinin başarısını değerlendirmek için bir AutoMax pro ayırıcı kullanılarak ayrılır.